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生物技术通知文件号000197 CFSAN注释
摘要J.R. Simplot Company（Simpleot）已就BG25马铃薯衍生的食品进行了咨询（FDA）的咨询。BG25马铃薯经过基因设计，以表达对植物疫霉菌（RPI）蛋白质蛋白AMR3，BLB2和VNT1的抗性，以抗击马铃薯晚期疫病疾病，以及对乙酰蛋白质的抗性，这使乙酰蛋白耐受性耐乙酸盐合成酶（Als） - 抑制了 - 抑制的雄性固醇。stmals用作可选标记。BG25马铃薯还经过基因设计，以抑制马铃薯病毒Y外套蛋白（PVY-CP）的表达，并使用RNA干扰（RNAI）诱导PVY抗性。最后，BG25马铃薯被设计为抑制液泡转化酶（VINV）和多酚氧化酶（PPO）的表达，以分别使用RNAi，分别称为“黑点”，从而降低了还原糖的较低水平，并降低了酶褐变。本文档总结了FDA食品安全与应用营养中心（CFSAN，WE）评估与BG25马铃薯的人类食品用途有关的结论和支持数据和信息。FDA的兽医中心总结了其与动物食品用途有关的评估。
生物技术通知文件号000197 CVM文件
沉默机制。BG25马铃薯中修饰的第二种预期效应是降低糖的水平并减少酶促变暗（称为“黑点”）。Simplot引入了含有液泡转化酶基因（VINV）和多酚氧化酶基因（PPO）的倒重复段的DNA序列，它们产生DSRNA以降低VINV和PPO的RNA转录水平。VINV基因编码VINV蛋白，该蛋白参与将蔗糖转化为其成分减少糖，而PPO基因编码PPO蛋白，该PPO蛋白氧化酚类化合物可产生深色色素。第三，Simplot引入了来自卵巢结核的改性乙酰乳酸合酶基因（Stmals），该基因编码了stmals蛋白，该蛋白具有对乙酰乳酸合酶（ALS）的耐受性，可抑制除草剂，并用作可选的标记。
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2020 年 6 月 16 日 Bernadette Juarez APHIS 副局长 生物技术监管服务部 4700 River Road, Unit 98 Riverdale, MD 20737 主题：确认使用 CRISPR/Cas9 开发的低 PPO 鳄梨不是管制物品 尊敬的 Juarez 女士， JR Simplot 公司的植物科学部门（Simplot）恭敬地寻求生物技术监管服务部的确认，使用 CRISPR/Cas9 开发的低 PPO 鳄梨（Persea americana Mill.）不符合 7 CFR 第 340 部分对管制物品的定义。美国农业部之前已审查了一种树木作物苹果（Malus × domestica）的低 PPO 性状，并确定经过基因改造以降低多酚氧化酶的不变色苹果不太可能对植物造成有害生物风险 1,2。Simplot 已经开发出一种核糖核蛋白 (RNP) 方法，可以将 CRISPR/Cas9 元素递送到植物细胞中。该方法导致目标基因的等位基因内出现双链断裂，并敲除 [ ] Ppo [ ] 中的两个等位基因。最终选定的品系不包含任何来自 CRISPR/Cas9 的引入 DNA。使用此方法，基因编辑是通过用核糖核蛋白 (RNP) 复合物转染鳄梨原生质体细胞来实现的，该复合物由纯化的 CAS9 蛋白与合成向导 RNA (gRNA) 结合而成 (Andersson et al., 2018)。鳄梨不是植物害虫，也不会成为杂草。低 PPO 鳄梨没有引入植物害虫序列，RNP 方法中也没有使用任何此类序列。与传统鳄梨相比，使用 CRISPR/Cas9 开发的低 PPO 鳄梨不太可能成为植物害虫或具有改变的杂草潜力。因此，低 PPO 鳄梨不符合 7 CFR 第 340 条规定的受管制物品的定义。
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