蜡状细菌在牛奶和乳制品中的发生归因于卫生方案不足,因此导致了两种胃肠道疾病:肠毒素触发的罕见催眠症和腹泻疾病。目前的研究旨在克服通过在聚合酶链反应(PCR)中掺入未改性金纳米颗粒(GNP)来检测低细菌浓度的局限性。Bacillus cereus,与常规PCR和SYBRGREEN QPCR相比,以检测NHE基因。基因是一个关键的毒力因子,它编码与非溶血性肠毒素产生有关的蛋白质。结果表明,将GNP添加到PCR反应中增强了DNA的产量,并使检测到10 2份Cereus DNA的副本,而使用标准PCR的10 3。GNPS辅助PCR以10 2 CFU/ml的尖刺样品检测到蜡状芽孢杆菌,而常规PCR则需要10 3 CFU/mL。sybrgreen qpcr也可以在10 2 DNA拷贝和10 2 CFU/ml的峰值牛奶中进行检测。GNPS辅助PCR特异性扩增了蜡状芽孢杆菌,而不是其他细菌,例如枯草芽孢杆菌,大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,单核细胞增生李斯特氏菌和沙门氏菌,表现出分析特异性。总体而言,GNP提高了蜡状芽孢杆菌检测的PCR敏感性。关键字: - 肠毒素;蜡状芽孢杆菌;牛奶; pcr;金纳米颗粒; sybrgreen。
Catalogue No Description PackSize GEN-TaQ5 GENTaq Taq DNA Polymerase 5U/ul, 500U GEN-RMX-50 GenKit RT-PCR Master Mix kit for cDNA synthesis 50 RXN GEN-TQMX-100 GenKit qPCR Master Mix Kit with SYBRGREEN and ROX 100RXN GEN-TMXG-100 Green Dye PCR Master Mix 100Rxn GEN-PCR-MM-100 PCR主混合套件(2x)(带有100 bp的DNA梯子),每个Gen-PCR-RMM-5-100红色染料PCR主混合(2x),5x100,每个反应每个反应,每个反应,每个gen-Hottaq-3-1000-A HotStart Taq DNA聚合酶(3 U/µL)每个Gen-HotpCr-MM-1x100 diverist Masterivions diverip Master
<实用方法>肺(左上和下叶,右上和下叶),肾脏(左肾脏,右肾脏),肝脏和脾脏被从溺水的身体中取出。将每个器官切成30 mg,将其浸入100 L提取物SYBRGREEN提取物N-Amp™Plant PCR试剂盒(美国Sigma-Aldrich)中,并在95°C孵育10分钟。之后,使用浸泡解决方案作为模板进行实时PPCR。实时PCR的反应混合物(总量为20·L)如下:模板4·L,Sybrgreenextract- n-amppcrReadyMix 10·L,底漆(前向,反向)2·l,引用1·L,rnaseednasefree Water 1·L 1·L。当前生产的引物是Nitzschia 18 S RRNA,Fragilariaα-微管蛋白,Navicula IBP,Naviculaβ-肌动蛋白,Fragilariaβ-微管蛋白,RBCL和23 S rRNA,靶向生活在许多海洋和河流中的植物Planchon。在上述底漆被证明是有用的之后,我们计划为针对海洋和河流(例如海水Chaetoceros)的浮游植物物种准备底漆,并试图估计溺水位置。这使得可以在一定程度上恢复在溺水中发现的浮游植物的物种组成。作为对照,从发现溺水物体的位置收集水,并检查放大效率是否有差异。最后,我们认为,通过创建一个麦克风阵列,其中排列了多个植物浮游生物的DNA部分序列,我们可以以高精度恢复浮游生物物种。
