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血小板传播-1介导Rho-激酶抑制剂...
图7细胞运动分析显示了TSP1抑制剂和siRNA敲低的作用。间隙打开区域的呈现为第0天间隙宽度的百分比。（a）以不同浓度的LSKL或SLLK处理（每组n = 3）。（b）用TSP1 siRNA和NC炒对照siRNA转染（每组n = 3）。（c）1 µM Y39983与5 µM LSKL或SLLK（每组n = 4）的处理。（d）1 µM Y39983的处理与100 pmol的对照或TSP1 siRNA（每组n = 4）。（E）在1 µM Y39983处理中与5 µM LSKL或SLLK的治疗中的Transwell迁移2天（每组n = 3）。（f）在1 µM Y39983与100 pmol的对照或TSP1 siRNA的处理中，Transwell迁移2天（每组n = 3）。sllk：控制肽； LSKL：TSP1阻断肽。数据表示平均值±SEM。lskl，亮氨酸 - 丝氨酸 - 赖氨酸 - 亮氨酸； NC，阴性对照； NS，没有统计学意义； siRNA，小干扰RNA； SLLK，丝氨酸 - 亮氨酸 - 亮氨酸 - 赖氨酸； TSP1，血小板传播-1。**p≤0.01; *p≤0.05（Student's T -Test）
用于 mRNA 脂质纳米粒子血脑屏障转染和穿越的双重筛选的预测高通量平台
摘要：脂质纳米颗粒 (LNP) 介导的核酸疗法，包括 mRNA 蛋白质替代疗法和基因编辑疗法，在治疗神经系统疾病（包括神经退行性疾病、脑癌和中风）方面具有巨大潜力。然而，全身给药后将 LNP 递送至血脑屏障 (BBB) 仍未得到充分探索。在这项工作中，我们设计了一个用于 BBB (HTS-BBB) 的高通量筛选 transwell 平台，专门针对筛选 mRNA LNP 进行了优化。与大多数仅评估跨内皮单层运输的 transwell 检测不同，HTS-BBB 同时测量 LNP 运输和内皮细胞本身的 mRNA 转染。然后，我们使用 HTS-BBB 筛选由结构多样的可电离脂质制成的 14 个 LNP 库，并通过验证静脉注射后将 mRNA 递送到小鼠大脑的主要候选物来证明它可以预测体内性能。展望未来，该平台可用于筛选大量针对大脑的 LNP 库，以用于一系列蛋白质替代和基因编辑应用。关键词：脂质纳米颗粒、mRNA、脑输送、血脑屏障
论文胃癌干细胞对胃癌侵袭、迁移及血管生成的影响
目的：利用胃癌细胞株SGC7901和胃癌干细胞（CSC-G），探讨肿瘤干细胞在侵袭、转移及肿瘤血管生成中的作用。方法：RT-PCR和Western印迹法检测干细胞标志物（OCT4、SOX2、C-Myc、Klf4）的表达。体外球形克隆实验、平板克隆实验、Transwell迁移实验、Transwell侵袭实验、耐药实验、划痕迁移实验、环状形成实验检测其增殖、迁移、侵袭能力、L-OHP和5-FU抗性、血管生成，小鼠成瘤实验检测其致瘤能力。结果：与SGC7901相比，CSC-G中Oct4、Sox2、Klf4、CD44 mRNA表达显著增高，E-cadherin mRNA相对表达量低于SGC7901，而c-Myc表达量无显著变化。CSC-G的增殖、耐药、迁移、侵袭能力显著增高，小鼠成瘤能力也显著增高。结论：CSC-G的增殖、耐药、迁移、侵袭、成瘤能力显著高于SGC7901，CSC-G在增殖、迁移、侵袭、成瘤过程中发挥重要作用。
肠内通信的混合生物监测系统
摘要 - 这项工作提出了一个综合的电化学和电生理生物监测系统，使能够沿肠道脑轴（GBA）进行分子信号的研究。体外肠道细胞培养物为研究肠道生理学提供了可控制的，可访问的平台。同样，离体cray鱼腹神经绳为神经信号传导的电生理研究提供了模型。在第一次，我们的系统集成了这些平台，以便研究从肠道到神经系统的信号传导，这些信号传导会影响大脑。The platform consists of two interconnected modules: (I) the electrochemistry module (ECM), mimicking a Transwell platform for cell growth and enabling neurotransmitter (serotonin (5-HT)) detection, and (II) the electrophysiology module (EPM), hosting a dissected crayfish nerve cord and allowing electrode accessibility for the assessment of nerve responses to 5-ht。通过在体温（38℃）附近的可靠加热器（38℃），跨膜膜修改中纳入良好的细胞来帮助整个系统的整合，以改善分子扩散（450倍），同时保持良好的细胞兼容性，并保持良好的细胞兼容性，并从ECM中进行精确控制的5-HT运输。这项工作实现了模块的特定环境控制，最终将使肠道和神经细胞之间的分子信号转导研究，以促进对GBA内两个组织的实时监测。[2020-0151]
使用流体壁微流体技术检测巨噬细胞趋化性
自 1960 年代以来，人们使用了各种趋化性测定方法，但这些测定方法都存在很大的局限性。Transwell 测定方法技术简单且应用广泛；将装有细胞的多孔插入物放置在装有引诱剂的孔内，（一旦通过扩散建立起浓度梯度）细胞就会通过微米大小的孔迁移到孔中，通过取出插入物并计数孔中的细胞来量化趋化性。[5] xCEL-Ligence 测定方法提供了一项重大技术进步；当细胞穿过改良的 Boyden 室中的孔时，可以实时测量阻抗变化。[6] 为了解决 Transwell 测定方法的一些局限性，人们引入了替代方法，包括跟踪和监测单个细胞（如 Dunn 室）[7] 以及检测细胞可逆性或细胞趋向性（如琼脂糖下迁移测定方法）。 [8] 最近，人们开发出了微流控系统 [9]，该系统能够控制稳定的梯度，[10] 区分不同类型的运动（例如，趋化性、化学运动——无方向性细胞迁移和逃逸性 [11] ），实时追踪单个细胞，[12] 并提高吞吐量 [13]——有时不需要太多依赖专门的设备即可实现。 [14] 虽然微流控方法前景广阔，但它们在生物医学研究中的应用受到了阻碍，因为操作设备所需的技术复杂性、制造和原型制作时间长、经常使用的塑料的生物相容性问题（即聚二甲基硅氧烷、
摘要：本研究旨在探讨脂质体氯膦酸盐联合顺铂或索拉非尼对 FOXQ1 表达的影响
摘要：本研究旨在探讨氯膦酸盐脂质体联合顺铂或索拉非尼对肝癌细胞系FOXQ1表达及生物学功能的影响。采用实时定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测正常肝细胞系和肝癌细胞系中FOXQ1的表达。HepG2和MHCC97H细胞分别给予低、中、高浓度的顺铂（3、5和7 μg/ml）或索拉非尼（2、7和20 μg/ml）联合氯膦酸盐脂质体（LC，20μg/ml），检测各组FOXQ1的表达。采用细胞迁移、MTT和Transwell实验检测各处理对HepG2和MHCC97H细胞生物学功能的影响。 qRT-PCR结果显示，4种肝癌细胞系中FOXQ1 mRNA表达均高于正常细胞，且在HepG2和MHCC97H细胞中FOXQ1 mRNA的表达更占优势。所有试验剂量的顺铂均下调FOXQ1表达，但仅高剂量索拉非尼下调FOXQ1表达，而低、中浓度索拉非尼对FOXQ1表达无明显影响。顺铂或索拉非尼与LC联合应用时，FOXQ1表达水平明显降低。细胞迁移、MTT和transwell实验显示，各药物单独应用时增殖、迁移和侵袭均受到抑制，但与氯膦酸盐脂质体联合应用时作用更强。脂质体氯膦酸盐联合顺铂或索拉非尼可以下调HepG2和MHCC97H肝癌细胞中FOXQ1的表达，抑制其增殖、迁移和侵袭。
duxap8通过下调microRNA-29A-3P表达
摘要。- 目的：研究长链非编码RNA（LNCRNA）DUXAP8在卵巢癌（OCA）和潜在的机制中的作用。患者和方法：使用GEPIA数据库对卵巢癌中DUXAP8的表达模式进行了处理。定量实时聚合酶链反应（QRT-PCR）用于确定OCA组织中DUXAP8的表达。同时，将OCA细胞系培养以完成功能实验，包括细胞计数KIT-8（CCK-8），板克隆实验和Transwell Excorentes，以评估DUXAP8对OCA细胞系的增殖和迁移能力的影响。生物信息学分析和双lu- ciferase报告基因用于确定OCA细胞中Duxap8与其下游关键基因MicroRNA-29A-3P的结合和表达。此外，还使用共转染技术和细胞功能恢复实验来验证OCA中DUXAP8/ microRNA-29A-3P调节网络的重要作用。结果：在OCA组织和细胞系中，DUXAP8异常上调，其表达与患者的前进性不佳有关。cck-8和板克隆概述表明，OCA细胞中DuxAP8的敲低可以显着抑制OCA细胞的增殖。Transwell结果表明，DuxAP8的敲低可以显着抑制OCA细胞迁移。此外，发现DuxAP8可以结合并负调节OCA中microRNA-29A-3P的表达。结论：DUXAP8在OCA中的表达异常高，可以导致肿瘤的恶性进展。在OCA细胞中进行的功能实验表明，microRNA-29A-3P是介导DUXAP8在OCA功能上调节的关键下游基因。
白桦脂酸通过诱导自噬细胞死亡、抑制细胞迁移和侵袭以及调节耐药性人胃癌细胞
1 山东大学第二医院消化内科，山东省济南市 250033；2 山东省淄博市沂源县人民医院科教科，山东省淄博市 256100；3 山东大学齐鲁医院（青岛）超声科，山东省青岛市 256600；4 山东大学第二医院健康管理科，山东省济南市 250033 本研究的主要目的是检验植物三萜桦木酸对抗胃癌的作用及其潜在机制。通过 MTT 测定和克隆形成试验评估对照细胞和桦木酸处理细胞的细胞活力。采用透射电子显微镜和蛋白质印迹法研究桦木酸对自噬的刺激作用。通过蛋白质印迹法监测 ERK/MEK 信号通路。通过Transwell小室实验研究了SGC-7901细胞的迁移和侵袭。研究结果表明，与正常胃GES-1细胞相比，白桦脂酸对胃癌SGC-7901细胞具有显著的细胞毒性。白桦脂酸的细胞毒性是由于其在靶细胞中具有自噬刺激倾向。Western印迹法的数据支持自噬细胞死亡，显示LC3-II增强，LC3-I和p62表达降低。此外，观察到白桦脂酸阻断SGC-7901细胞中的ERK/MEK信号通路，这与磷酸化ERK和MEK蛋白表达水平下降有关。最后，Transwell小室实验表明，白桦脂酸可能降低SGC-7901细胞的迁移和侵袭能力。综上所述，这些结果表明，桦木酸通过诱导自噬、阻断 ERK/MEK 信号传导和抑制迁移和侵袭，表现出显著的抗胃癌作用。因此，桦木酸可能成为胃癌管理和研究中的先导分子。
2-硬脂氧苯乙基磷酸胆碱靶向微管动力学和 Wnt/β-catenin/EMT 信号在人类结直肠癌细胞中的治疗作用
细胞间粘附丧失，导致紧密连接溶解、顶端-基底极性破坏和细胞骨架结构重组；这些影响与侵袭性或转移表型有关 (Vu and Datta, 2017)。因此，我们分析了 stPEPC 诱导的有丝分裂细胞死亡是否与 CRC 转移进展紊乱有关。我们的数据显示，与 24 小时后用载体处理的 CRC 细胞相比，用 stPEPC 治疗可增加上皮标志物的表达水平，包括 E-cadherin 和 occludin (图 7A)，并减少迁移 (图 7B)。此外，与用载体处理的 CRC 细胞相比，stPEPC 显着降低了 HT29 和 HCT116 细胞通过 Matrigel 包被的 Transwell 聚碳酸酯滤膜的侵袭能力
科学计划
Isabelle Dupin，波尔多大学 使用患者来源的成体干细胞构建肺类器官模型，以了解慢性阻塞性疾病 Vivek Thacker，海德堡大学诊所 结核病的微生理模型 Camilla Tvedt Ekanger，卑尔根大学 用于人类呼吸道病毒感染研究的气液界面 transwell 和气道类器官模型的比较 Mara Fischer，柏林夏里特医学院 向用于肺炎链球菌感染的免疫功能正常的人类肺类器官模型迈进 海报会议/咖啡休息 观点：柏林夏里特医学院的 Jennifer Rosowski 谈柏林新兴的 3R 网络 第 2 场：血脑屏障 (BBB) 17:00 – 17:30 17:30 – 17:45 17:45 – 18:00 18:30