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mavericc：通过体外CRISPR/CAS9裂解
基于疫苗的病毒（VACV）的载体广泛用作疫苗和癌症免疫疗法。VACV工程传统上依赖于父母病毒基因组和含转基因转移质粒之间的同源重组，这是一个不具体的过程，它需要使用选择或筛选标记物来分离重组者。这种方法的最新扩展试图通过使用CRISPR-CAS9工程来裂解感染细胞中的病毒基因组，以增强持续转基因病毒的恢复。但是，这些方法并不能完全消除WT病毒后代的产生，因此继续需要多轮病毒传播和斑块纯化。在这里，我们描述了MAVERICC（通过体外CRISPR/CAS9裂解对重组的无标记疫苗病毒工程），这是一种以克服当前限制的方式来设计重组VACV的新策略。Mavericc还利用CRISPR/CAS9系统，但不需要标记，并且在一个步骤中基本上可以对所需的重组剂进行本质上的纯制剂。我们使用这种方法在Vacv基因组中的多个位置和组合中引入点突变，插入和缺失。MAVERICC的效率和多功能性使其成为在病毒基因组中任意选择的位置生成突变体和突变体库以构建复杂的VACV载体的理想选择，并促进对矢量的改善，并促进POXVIRUS生物学的研究。2021 Elsevier Ltd.保留所有权利。
短暂的中和抗体反应...
Nordic（MVA-BN）疫苗Jynneos（巴伐利亚州北部，https：//www.bavarian-nordic）最有风险的人群。MPXV感染在中部和西非地区被认为是流行的，在中部和西非地区，每年引起数千例案件，而当前的跨国爆发IB IB MPXV感染已升级为世界卫生组织宣布国际公共卫生的公共卫生紧急情况（1，2）。mPXV是正托病毒属的成员，与Variola病毒，天花的病因和毒性较低的属成员有关，包括牛波克病毒和vacinia病毒（VECV）。VACV疫苗提供了防护剂的保护，并导致了它的根除。由于VACV和MPXV抗Gens之间的交叉反应性，基于VACV的天花疫苗有望预防MPOX（3，4）。 第一代和第二代天花真空，包括复制疫苗的复制菌株，因为某些人（包括HIV）可能会严重或致命的副作用，因此不建议使用疫苗的复制菌株（5）。 MVA-BN被认为是一种更安全的第三代天花疫苗，因为它是一种高度传递的vacinia菌株。但是，与先前的天花疫苗不同，MVA-BN不会在人类中复制。 对保护MPXV的保护MVA-BN的理解是不完整的。 2019年，美国食品和药物管理局批准使用MVA-BN用于MPOX预防MPOX预防（巴伐利亚北欧）（6），而欧洲药品机构在2022年以Imvanex品牌批准了它（7）。基于VACV的天花疫苗有望预防MPOX（3，4）。第一代和第二代天花真空，包括复制疫苗的复制菌株，因为某些人（包括HIV）可能会严重或致命的副作用，因此不建议使用疫苗的复制菌株（5）。MVA-BN被认为是一种更安全的第三代天花疫苗，因为它是一种高度传递的vacinia菌株。但是，与先前的天花疫苗不同，MVA-BN不会在人类中复制。对保护MPXV的保护MVA-BN的理解是不完整的。2019年，美国食品和药物管理局批准使用MVA-BN用于MPOX预防MPOX预防（巴伐利亚北欧）（6），而欧洲药品机构在2022年以Imvanex品牌批准了它（7）。美国的流行病学研究支持MVA-BN的疫苗效率，并估计其针对MPOX的有效性在
RNF138通过抑制IRF3激活来下调抗病毒先天免疫
摘要：MPOX是一种由属于正托氧化病毒（OPXV）属的猴蛋白质病毒（MPXV）引起的传染病，其中包括天花和vaccinia病毒（VACV）。始于2022年5月的全球MPOX爆发已感染了88,000多人。基于VACV的疫苗可保护对MPOX疾病的保护，但使血清学测定法进行疾病监测复杂化。We tested the reactivity of serum IgG from Modified Vaccinia Ankara-Bavarian Nordic (MVA-BN)-vaccinated ( n = 12) and convalescent mpox-infected ( n = 5) individuals and uninfected, non-vaccinated controls ( n = 32) to MPXV/VACV proteins A27, A29, A30, A35, B16, B21，C19，D6，E8，H3，I1和L1。Using a subset of MPXV antigen-based assays (A35, B16, E8, H3, and I1), we conducted a mpox antibody survey of serum from 214 individuals, including 117 (54.7%) people with HIV (PWH) collected between June 2022 and January 2023, excluding individuals who reported recent mpox vaccination or infection, and 32 young, pre-pandemic controls.康复血清对大多数测试的抗原反应强烈。疫苗血清反应仅限于A35，E8，H3和I1。在所有接种疫苗的个体中， IgG抗体均明显升高。 b16 IgG表现出较高的敏感性（100％[95％CI：56.55–100.0％]）和特定城市（91.67％[64.61–99.57％]），用于区分感染与MVA-BN疫苗接种，而E8 IgG则显示100％[75.75-100] sensitivity and 100％[75.75-100] [75.75-100] [7]检测并区分接种疫苗的个体与对照组。 男性的血清阳性率为10/129（7.8％），而女性中的血清阳性率为1/85（1.2％）。IgG抗体均明显升高。b16 IgG表现出较高的敏感性（100％[95％CI：56.55–100.0％]）和特定城市（91.67％[64.61–99.57％]），用于区分感染与MVA-BN疫苗接种，而E8 IgG则显示100％[75.75-100] sensitivity and 100％[75.75-100] [75.75-100] [7]检测并区分接种疫苗的个体与对照组。男性的血清阳性率为10/129（7.8％），而女性中的血清阳性率为1/85（1.2％）。我们确定了11/214（5.1％）最近的血清样品和1/32（3.1％）年轻的，流行前的对照组，其血清阳性为≥2MPXV抗体，包括PWH的6.8％。我们的发现提供了对MPOX的体液免疫反应的洞察力，并证明了廉价，基于抗原的血清监视在识别无症状或未报告的感染中的有用性。
一种用于快速和敏感检测MPOX病毒的现场诊断方法
图1通过整合侧向流条（RAA -LF）系统，重组酶 - AID放大测定法的特异性和灵敏度。（a）横向流条的说明。FITC-生物素标记的RAA扩增子首先与胶体金标记的抗FITC抗体结合。随着偶联的飞行，该建筑群被测试线上的链霉亲和蛋白捕获。其余的复合物继续向前扩散，并被控制线的抗FITC抗体抗体捕获。在测试和控制线上的视觉带表示正读数，而控制线处的单个频段仅表示负读数。（b，c）用底漆和探针集对MPXV和VACV DNA的RAA -LF检测，靶向D6R，E9L，N3R和N4R基因。控件不包括模板控件（模拟）。（d）使用MPXV DNA作为具有横向流量读数的模板的D6R，E9L，N3R和N4R引物的检测极限。MPXV DNA浓度作为基因组拷贝/μL表示。控件不包括模板对照（模拟）。（E）在手掌温度下放大N4R引物和探针设置的横向流量结果。在指定的时间消除了10μL反应产物的体积并用横向读数进行测试。所有实验重复了三次，显示了一个代表性结果。
1003119.pdf
自 2019 年以来，全球发生了重大病毒疫情，需要进一步研究和医疗系统调查。继 2019 年冠状病毒病 (COVID-19) 大流行之后，在 2022 年，在严重急性呼吸综合征冠状病毒 2 (SARS-CoV-2) 毒株进化的同时，猴痘病毒 (MPXV) 感染变得更加明显。MPXV 属于正痘病毒属，属于痘病毒科。可能发生人畜共患传播（动物传播给人类）。正痘病毒属包括存在于动物宿主中的其他正痘病毒 (OPXV)，包括牛痘病毒 (CPXV)、痘苗病毒 (VACV) 和天花病毒 (VARV)，后者是天花和过高死亡率的病原体。本综述旨在介绍有关 MPXV 特定发病机制、流行病学和免疫学的事实以及历史观点。 2000 年 4 月之前，非洲以外地区很少报告出现猴痘病毒。自 1796 年以来的早期研究有助于根除天花病毒，从而制定免疫策略。世界卫生组织 (WHO) 于 1980 年宣布天花病毒已被根除。2022 年 7 月 23 日，WHO 宣布猴痘病毒为卫生紧急事件。因此，对猴痘病毒传播导致猴痘 (mpox) 疾病的担忧需要澄清。受感染的宿主表现出广泛的细胞引发的皮疹和病变等症状。感染猴痘病毒很难与其他疾病或皮肤病区分开来。抗病毒治疗药物通常用于治疗天花和猴痘病；然而，细胞变化的分子和免疫机制仍然令人感兴趣。此外，目前尚无针对猴痘病的官方授权治疗方法。全球某些人可能被认为处于危险之中。从历史上看，猴痘的症状类似于