摘要 背景与目的:本研究利用锌指核酸酶(ZFN)技术破坏霍乱毒素基因(ctxA),抑制霍乱弧菌(V. cholera)产生CT毒素。实验方法:设计一个工程化的ZFN,靶向ctxA基因的催化位点,将ZFN编码序列克隆到pKD46、pTZ57R T/A载体和E2-crimson质粒中,转化大肠杆菌(E. coli)Top10和霍乱弧菌,通过菌落计数法评估ZFN的转化效果。结果:转化后的大肠杆菌经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白质印迹实验未见表达,ctxA基因测序未见突变,pKD46-ZFN质粒聚合酶链式反应结果为阴性。用含有完整 ZFN 序列的 T/A 载体转化大肠杆菌 Top10 产生 7 个菌落,所有菌落均含有具有自连接载体的细菌。用左阵列 ZFN 转化产生 24 个菌落,其中 6 个含有具有自连接载体的细菌,18 个含有具有载体/左阵列的细菌。用含有完整 ZFN 的 E2-深红色载体转化霍乱弧菌未产生任何菌落。用左阵列载体转化产生 17 个含有具有载体/左阵列的细菌的菌落。使用蛋白质印迹分析捕获左阵列蛋白带。结论和意义:由于缺乏非同源末端连接 (NHEJ) 机制,ZFN 可能脱靶细菌基因组,从而导致致命的双链 DNA 断裂。建议开发针对细菌基因的 ZFN,具有 NHEJ 修复系统的工程包装宿主是必不可少的。关键词:ctxA 基因;基因编辑工具;霍乱弧菌;锌指核酸酶。
* 通讯作者:moumahuya1@yahoo.com 摘要 本研究从药用植物长春花 (长春花) 中分离细菌和真菌内生菌。共获得 13 种内生细菌分离株。筛选细菌分离株以产生植物生长促进剂(吲哚乙酸、固氮和磷酸盐溶解)以及针对强效人类病原体的抗菌剂。在这些分离株中,11 种细菌分离株产生吲哚-3-乙酸(浓度范围为 11-74 µg/ml),3 种分离株能够固氮,3 种分离株可在体外溶解不溶性磷酸三钙。在初步筛选中,5 种内生分离株的提取物通过琼脂孔扩散法体外测定似乎对 3 种病原体(大肠杆菌、葡萄球菌属、弧菌属)具有抗菌活性。
1从RIDOH州卫生实验室(401-222-5606)提出之前,请在提交样品2法规遵守范围之前:州法律/法规规定要发送到罗德岛州州卫生实验室的微生物列表:http://health.gort.rist.rist.rists.port.rists.port.rists.port.rists.port.ristss/ref。分离物是纯培养物(除选择肠样本 *除外 *参见脚注4)提交以识别,确认,进一步的研究或银行业务。3肠分离株(无论来源如何)包括: *大肠杆菌(Shiga-toxin产生), *沙门氏菌, * Shigella spp。,Campylobacter spp。,Vibrio spp。和Yersinia spp。和Yersinia spp。4用于百日咳测试,左右鼻咽拭子被认为是一个标本。测试检测百叶窗和毛虫的Bordetella。命令呼吸面板以接收完整的面板结果。5特殊病原体主要是指在Rishl进行测试的临床标本(血清,CSF)。6 cDC发送用于提交样品或分离株被转发到疾病控制和预防中心(CDC)进行特定测试。CDC提交表格可从特殊病原体实验室(401-222-5586)获得。7急性传染病中心(401-222-2577)需要前批准前,在提交样品之前。
与海洋生物相关的细菌已成为全球研究的重点,因为它们产生了生物活性物质,例如抗菌化合物。这项研究旨在确定印度尼西亚的Teluk Awur Jepara与痤疮和表皮葡萄球菌的抗菌相关细菌的抗菌活性。在这项研究中采样了三种海藻物种,Caulerpa Racemosa,Padina Minor和Halimeda Opuntia。使用纸盘扩散和最小抑制浓度方法,选择了其分离株的抗菌活性,并根据16S RNA基因(27F-1492R)对分子进行了鉴定。从3种海藻物种中分离出21个分离株:11个来自C. racemosa,6个来自P. Minor的菌株,而H. Opuntia的4个分离株。进一步的测试揭示了对抗菌活性的潜在分离株(C2A,C2C,C2D和H2D),抗菌活性对痤疮疟原虫F2 ATCC 6919和S. epidermidis fncc-0048。Gene-based identification using 16s RNA (27F-1492R) demonstrated the occurrence of 4 bacterial species, namely Vibrionaceae bacterium PH25 (99.86 %), Vibrio alginolyticus strain GS MYPK1 (99.65 %), Salinivibrio costicola strain M318 (99.86 %), and V. alginolyticus strain 2014V-1011 (99.93%)。
Acinetobacter Baumannii, Staphylococcus capnocytophaga Haemolytica, Pseudomonas fluorescens, Staphylococcus horses, Actinomyces Israelii, Staphylococcus Epidermidis, Capnocytophaga Ochracea, Pseudomonas Mosselii, Streptobacillus moniliformis, Bordetella tunnels,葡萄球菌血液溶血,囊孢子虫,pseudomonas putida,链球菌,Gallolyticus,Burkholderia cepacia,葡萄球菌,弯曲球菌,弯曲球菌Ococcus沙门氏菌肠道SSP。 div>Acinetobacter Baumannii, Staphylococcus capnocytophaga Haemolytica, Pseudomonas fluorescens, Staphylococcus horses, Actinomyces Israelii, Staphylococcus Epidermidis, Capnocytophaga Ochracea, Pseudomonas Mosselii, Streptobacillus moniliformis, Bordetella tunnels,葡萄球菌血液溶血,囊孢子虫,pseudomonas putida,链球菌,Gallolyticus,Burkholderia cepacia,葡萄球菌,弯曲球菌,弯曲球菌Ococcus沙门氏菌肠道SSP。 div>
无症状菌尿产前筛查 细菌/分离株确认 BioFire Filmarry 胃肠病学小组 BioFire Filmarry 肺炎小组 Biofire Filmarray 呼吸道小组 血涂片、疟疾和其他血液寄生虫 血型和抗体筛查 流产布鲁氏杆菌血清学 弯曲杆菌培养或确认 碳青霉烯类产生菌 (CPO) 先天性肾上腺增生症 2 级检测 培养、常规粪便培养、弧菌培养、耶尔森氏囊性纤维化 2 级检测 查菲埃里克体 土拉弗朗西斯菌血清学 真菌 (真菌学),临床标本 真菌 (真菌学),转诊标本 淋病/衣原体筛查 B 组链球菌 (GBS) 产前筛查 糖化血红蛋白 血红蛋白病 甲型肝炎 IgM 抗体(HAV IgM)乙肝IgM核心抗体(HBcIgM)乙肝表面抗体(HBsAb)乙肝表面抗原(HBsAg)
落基山斑点发烧,斑疹伤寒和斑疹伤寒组,Q Fever,RickettsialPox和Rickettsiae引起的tick虫发烧。由支原体肺炎引起的呼吸道感染。由沙眼衣原体引起的淋巴结瘤。由于衣原体psittaci引起的psittacosis(鸟丝病)。由沙眼衣原体引起的沙眼瘤,尽管并非总是消除感染剂,这是通过免疫荧光判断的。由沙眼衣原体引起的结膜炎。尿素尿素尿素或沙眼衣原体引起的成年人中的非核菌尿道炎,肠持续感染或直肠感染。由于疏螺旋体引起的发烧。由嗜血杆菌引起的冠状动脉。瘟疫是由于耶尔森氏菌。由于francisella tularensis引起的。霍乱是由弧菌霍乱引起的。弯曲杆菌胎儿感染是由弯曲杆菌引起的。由于布鲁氏菌种类引起的布鲁氏菌病(与链霉素结合)。由于巴托拉芽孢杆菌引起的BARTONELLOSIOS。由克雷伯氏菌肉芽肿引起的肉芽肿。
摘要:聚β-羟基丁酸酯(PHB)是由盐单胞菌等细菌产生的一种代谢产物,在营养受限条件下可作为细菌的碳源和能量储存化合物。开展两个试验研究了饲料中添加盐单胞菌-PHB对杂交石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus♀×E.lanceolatu♂)的影响。试验一,给幼鱼石斑鱼饲喂在基础饲料中添加3%盐单胞菌-PHB(3%HM-PHB)(含1.4%PHB)和3%盐单胞菌(3%HM)(不含PHB)以及对照饲料,连续7周。结果显示,3%HM-PHB组与对照组的存活率、增重和粗脂肪含量无显著差异,但3%HM-PHB组的粗蛋白显著低于对照组。此外,添加 3% HM-PHB 可增加鱼肌肉中的脂肪酸含量,包括长链不饱和脂肪酸 C18:1n9、EPA 和 DHA。在实验 II 中,石斑鱼喂食基础饲料,其中添加了 6.5% 盐单胞菌 -PHB(6.5% HM-PHB)(含 3% PHB)和 6.5% 盐单胞菌(6.5% HM)(不含 PHB),以及基础饲料(对照)。饲养七周后,用鳗弧菌对石斑鱼进行 48 小时的诱变。虽然不同组间存活率和生长情况无显著差异,但饲料中添加6.5% Halomonas -PHB可提高受到鳗弧菌攻击的石斑鱼的存活率,并显著增加血液中过氧化氢酶( CAT )和超氧化物歧化酶( SOD )基因表达,肝脏、脾脏、头肾和血液中白细胞介素1( IL1 )和白细胞介素10( IL10 )的表达( p < 0.05)。综上所述,饲料中添加Halomonas -PHB对鱼的生长性能无显著的积极影响,但增加了鱼肌肉中脂肪酸,包括长链不饱和脂肪酸C18:1n9、EPA和DHA的含量,并提高了对鳗弧菌的抗性,可能是通过增加不同组织器官中免疫相关基因的表达来实现的。我们的研究结果提供了令人信服的证据,表明 Halomonas -PHB 可用作集约化石斑鱼养殖的饲料添加剂,以增强石斑鱼对弧菌的抵抗力。
越来越多的研究报告说,细菌DNA甲基化具有重要的功能,超出了其在限制性修饰系统中的作用,包括影响临床相关的表型,例如毒力,宿主定殖,孢子孢子,生物膜形成等。尽管有洞察力,但此类研究在很大程度上具有临时的性质,并且将从系统的策略中受益,从而实现微生物学界对细菌甲基瘤的联合功能表征。在这种意见中,我们建议高度保守的DNA甲基转移酶(MTases)代表了细菌表观基因组学研究的独特机会。这些MTases在细菌中很常见,跨越各种分类法,并且存在于多种人类病原体中。除了具有良好特征的核心DNA MTase,例如来自Vibrio Cholera,Salmonella Enterica,梭状芽胞杆菌艰难梭菌或化脓性链球菌的核心MTase,在许多人类病原体中也发现了多个高度保守的DNA MTase,其中包括属于Burkholderia属的人和阿科氏菌。我们讨论了为什么以及如何优先考虑这些MTase,以使社区范围内的综合方法进行功能基氏症研究。最终,我们讨论了一些高度保守的DNA MTases如何成为开发新型表观遗传抑制剂以用于生物医学应用的有希望的靶标。
霍乱仍然是整个非洲的巨大公共卫生挑战,对边缘化和脆弱的人群产生了不成比例的影响[1]。该疾病的持久性强调了其多方面的性质,不仅源于弧菌霍乱的生物学特征。相反,它反映了环境,社会,经济和系统性因素的复杂相互作用,每种因素都加剧了有效的预防和控制的困难[1,2]。非洲继续承担全球霍乱的最高负担,反复出现的爆发引起了明显的发病率和死亡率,通常已经压倒了已经脆弱的医疗保健系统[3]。这种疾病经常袭击地区,由于无法获得清洁水,卫生和卫生(WASH)基础设施而困扰[3,4]。这些缺陷为该细菌的扩散创造了肥沃的基础,尤其是在人口稠密的城市贫民窟和农村地区,公共卫生外展有限。气候变化进一步加剧了这个问题,洪水和干旱等极端天气事件创造了有利于霍乱暴发的状况[5]。