Yanjia Zhou,A Feng Li,A,B Guihong Lan,A* Yongqiang Liu,C Haiyan Qiu,A Bo Xu,A Keyu Pu,A Wenren Dai,A Xinyang Zhang,A a。西南石油大学,化学与化学工程系,成都610500,中国。b。 Yibin Tianyuan Group Co.,Ltd.,Yibin 644004,中国。c。英国南安普敦南安普敦大学工程与物理科学学院。
通过外切酶融合改进 FnCas12a 基因组编辑 吴永强 1*,袁其晨 2*,朱玉峰 3,高翔 4,宋家宝 5,尹子如 6 1 河北科技大学基因编辑研究中心,河北石家庄 050018。2 美国莱斯大学化学与生物分子工程系,休斯顿,德克萨斯州 77005,美国。3 河北科技大学科技发展研究所,河北石家庄。4 河北科技大学环境科学与工程学院,河北石家庄 050018。5 河北科技大学生物科学与生物工程系,河北石家庄。 6 河北科技大学期刊出版社,河北石家庄 050018。 * 通讯作者:吴永强(wuyongqiang@hebust.edu.cn),袁其晨(yqc@rice.edu) 摘要 在目前报道的 Cas12a 直系同源物中,新凶手弗朗西斯菌 Cas12a (FnCas12a) 受原型间隔区相邻基序 (PAM) 的限制较少,这将有助于靶向以前无法接近的基因组位点。然而,FnCas12a 核酸酶的活性在人体细胞中相对较低或无法检测到,限制了其作为理想基因组工程工具的应用。在这里,我们描述了 TEXT(将 EXonuclease T5 与 FnCas12a 连接),这是一种融合策略,可显着提高人体细胞中 FnCas12a 在三种不同细胞系中的多个基因组位点的敲除效率。使用18nt至23nt的不同间隔长度,TEXT的插入和删除(indel)效率均高于FnCas12a,其中18nt的插入效率最高,比FnCas12a高出11倍。深度测序表明,TEXT显著增加了目标位点的删除频率和删除大小。TEXT增强了FnCas12a核酸酶的活性,拓展了其在人类细胞基因组工程中的应用。
通过外切酶融合改进 FnCas12a 基因组编辑 吴永强 1*、袁其晨 2*、朱玉峰 3、高翔 4、宋家宝 5、尹子如 6 1 河北科技大学基因编辑研究中心,河北石家庄 050018。2 美国莱斯大学化学与生物分子工程系,休斯顿,德克萨斯州 77005,美国。3 河北科技大学科技发展研究所,河北石家庄。4 河北科技大学环境科学与工程学院,河北石家庄 050018。5 河北科技大学生物科学与生物工程系,河北石家庄。 6 河北科技大学期刊出版社,河北石家庄 050018。 * 通讯作者:吴永强(wuyongqiang@hebust.edu.cn),袁其晨(yqc@rice.edu) 摘要 在目前报道的 Cas12a 直系同源物中,新凶手弗朗西斯菌 Cas12a (FnCas12a) 受原型间隔区相邻基序 (PAM) 的限制较少,这有助于靶向以前无法接近的基因组位点。然而,FnCas12a 核酸酶的活性相对较低或无法观察到,限制了其作为理想基因组工程工具的应用。在这里,我们描述了 TEXT(将 EXonuclease T5 与 FnCas12a 连接),这是一种融合策略,可显着提高 FnCas12a 在人类细胞中在三种不同细胞系中的多个基因组位点的敲除效率。 TEXT 在 18nt 至 23nt 不同间隔长度下均表现出比 FnCas12a 更高的插入和缺失效率,其中 18nt 的插入效率最高,比 FnCas12a 高出 11 倍。深度测序表明 TEXT 显著增加了目标位点的缺失频率和大小。总之,TEXT 增强了 FnCas12a 核酸酶的活性,拓展了其在人类细胞基因组工程中的应用。
标题 ◼ 经济和社会发展(会议记录),第 92 届经济和社会发展国际科学会议 – “大流行后的商业、经济和社会发展” 编辑 ◼ Pornlapas Suwannarat、Sasivimol Meeampol、Bordin Rassameethes、Suparerk Sooksmarn Scientific委员会/Programski Odbor ◼ Marijan Cingula(主席),大学克罗地亚萨格勒布; Sannur Aliyev,阿塞拜疆国立经济大学,阿塞拜疆; Ayuba A. Aminu,尼日利亚迈杜古里大学; Anona Armstrong,维多利亚大学,澳大利亚; Gouri Sankar Bandyopadhyay,Burdwan 大学,Rajbati Bardhaman,印度; Haimanti Banerji,印度理工学院,印度克勒格布尔; Victor Beker,布宜诺斯艾利斯大学,阿根廷; Asmae Benthami,穆罕默德五世大学,摩洛哥; Alla Bobyleva,俄罗斯莫斯科罗蒙诺索夫国立大学;Leonid K. Bobrov,俄罗斯新西伯利亚国立经济管理大学;Rado Bohinc,斯洛文尼亚卢布尔雅那大学;Adnan Celik,土耳其科尼亚塞尔丘克大学;Angelo Maia Cister,巴西里约热内卢联邦大学;罗马尼亚克拉约瓦大学 Mirela Cristea;摩洛哥穆罕默德五世大学 Taoufik Daghri;土耳其伊斯坦布尔商业大学 Oguz Demir;T.S.审查委员会 / Recenzentski Odbor ◼玛丽娜·克拉克默·卡洛帕 (主席);安娜·阿列克西奇;桑德拉·拉奎尔·阿尔维斯;阿尤巴·阿米努;米霍维尔·安杰利诺维奇;约瑟普·阿尔内里奇;利迪娅·巴加里奇;托米斯拉夫·巴科维奇;桑娅·布拉泽维奇;列昂尼德·鲍勃罗夫;鲁齐卡·布雷契奇;安妮塔·切赫·卡斯尼;伊琳娜·切尔尼什;米雷拉·克里斯蒂亚;奥古兹·德米尔;斯捷潘·德沃斯基;罗伯特·法巴克;伊维卡·菲利波维奇;西尼萨·弗兰吉克;弗兰·盖莱蒂克;米里亚娜·格利戈里克;托米斯拉夫·格洛班;安妮塔·高特尼克·乌纳特;托米斯拉夫·赫尔采格;伊雷娜·扬科维奇;埃米娜·杰科维奇;达芙娜·卡里夫;奥利弗·凯萨尔;希拉尔·伊尔迪尔·凯瑟;玛蒂娜·德拉吉娅·科斯蒂克;塔贾娜·科瓦奇;弗拉基米尔·科夫斯卡;爱德华多·莱特;安吉洛·玛雅·西斯特;卡塔琳娜·马罗舍维奇;维多塔斯·马图蒂斯;玛雅娜·梅尔卡克·斯科克;丹尼尔·弗朗索瓦·迈耶;纳塔尼亚·迈耶;乔西普·米库利奇;柳比卡·米兰诺维奇·格拉万;冈特·穆勒;伊万娜·纳西诺维奇·布拉耶;兹拉特科·内德尔科;格拉蒂拉·乔治亚娜·诺哈;苏珊娜·诺瓦克;阿尔卡·奥巴迪奇;克劳迪娅·奥格林;伊戈尔·皮希尔;纳杰拉·波德鲁格;沃伊科·波托坎;丁科·普里莫拉克;泽利卡·普里莫拉克;散打莲子;大卫·雷森德;温贝托·里贝罗;弗拉斯塔·罗斯卡;苏海拉·赛义德;阿曼多·哈维尔·桑切斯·迪亚兹;托米斯拉夫·塞库尔;洛雷娜·斯库夫利克;米尔科·斯莫利奇;佩塔尔·索里克;马里奥·斯普雷米奇;马特贾兹斯托尔;托马斯·斯图齐涅茨基;莱吉拉·蒂贾尼奇;丹尼尔·托米奇;鲍里斯·图塞克;丽贝卡·丹妮拉·弗拉霍夫;托马斯·威尔;佐兰·维廷;曾涛;格热戈日·泽蒙;斯内扎娜·日夫科维奇;贝里斯拉夫·兹穆克。保留所有权利。作者对其贡献的语言和技术准确性负责。Devaraja,印度迈索尔大学;Onur Dogan,土耳其多库兹艾鲁尔大学;Darko Dukic,克罗地亚奥西耶克大学;Gordana Dukic,克罗地亚奥西耶克大学;Alba Dumi,阿尔巴尼亚发罗拉大学;Galina Pavlovna Gagarinskaya,俄罗斯萨马拉国立大学;Mirjana Gligoric,塞尔维亚贝尔格莱德大学经济学院;Mehmet Emre Gorgulu,土耳其阿菲永科卡特佩大学;Klodiana Gorica,阿尔巴尼亚地拉那大学;Aleksandra Grobelna,波兰格丁尼亚海事大学;Liudmila Guzikova,俄罗斯彼得大帝圣彼得堡理工大学;Anica Hunjet,克罗地亚科普里夫尼察北方大学;Khalid Hammes,摩洛哥穆罕默德五世大学; Oxana Ivanova,乌里扬诺夫斯克国立大学,俄罗斯乌里扬诺夫斯克;Irena Jankovic,贝尔格莱德大学经济学院,塞尔维亚;Sanda Rasic Jelavic,萨格勒布大学,克罗地亚;Myrl Jones,拉德福德大学,美国;Hacer Simay Karaalp,棉花堡大学,土耳其;Dafna Kariv,管理学术研究学院,以色列里雄莱锡安;Hilal Yildirir Keser,乌鲁达大学,土耳其布尔萨;Sophia Khalimova,俄罗斯科学院西伯利亚分院经济与工业工程研究所,俄罗斯新西伯利亚;Marina Klacmer Calopa,萨格勒布大学,克罗地亚;Igor Klopotan,梅吉穆尔斯科韦勒乌西利斯特乌察科夫库,克罗地亚;Vladimir Kovsca,萨格勒布大学,克罗地亚;Goran Kozina,北方大学,科普里夫尼察,克罗地亚; Dzenan Kulovic,波斯尼亚和黑塞哥维那泽尼察大学; Eduardo Leite,葡萄牙马德拉大学; Robert Lewis,瑞士布勒理诺士格鲁耶尔应用科学大学;拉迪斯拉夫·卢卡斯,大学。组委会/Organizacijski Odbor ◼ Domagoj Cingula(主席);贾尼·邦贾;玛丽娜·克拉默·卡洛帕;萨西维莫·米安波尔;博丁·拉萨米特斯;蓬拉帕斯·苏瓦纳拉特;哈鲁泰·努姆普拉塞猜; Suparerk Sooksmarn;斯波门科·凯西纳;埃里诺·科斯卡克;伊万娜·米克洛舍维奇;托马斯·奥奇诺夫斯基;米罗斯瓦夫·普齐戈达;迈克尔·斯特福尔吉;托马斯·斯图齐涅茨基;丽贝卡·达尼耶拉·弗拉霍夫;西梅·武切季奇.出版编辑 ◼ Spomenko Kesina、Domagoj Cingula 出版商 ◼ 设计 ◼ 印刷 ◼ Varazdin 发展与创业机构,Varazdin,克罗地亚 / 北方大学,科普里夫尼察,克罗地亚 / Kasetsart 商学院,曼谷,泰国 / Kasetsart 大学,曼谷,泰国 / 华沙大学管理学院,华沙,波兰 / 法学、经济学和社会科学学院 销售 - 摩洛哥拉巴特穆罕默德五世大学 / ENCGT - 丹吉尔国立商业与管理学院 - 阿卜杜勒马利克·埃萨迪大学,摩洛哥丹吉尔 / 克罗地亚卡科韦茨梅迪穆尔耶理工学院 印刷 ◼ 在线版 ISSN 1849-7535 本书为开放获取,并经过双盲同行评审。西波希米亚,经济学院,捷克共和国; Mustafa Machrafi,穆罕默德五世大学,摩洛哥; Joao Jose Lourenco Marques,阿威罗大学,葡萄牙;帕斯卡·马蒂,罗谢尔大学; Vaidotas Matutis,维尔纽斯大学,立陶宛; Sasivimol Meeampol,农业大学,泰国;丹尼尔·弗朗索瓦·迈耶,西北大学; Marin Milkovic,克罗地亚科普里夫尼察北方大学; Abdelhamid Nechad,ENCGT- Abdelmalek Essadi 大学,摩洛哥; Haruthai Numprasertchai,农业大学,泰国; Gratiela Georgiana Noja,罗马尼亚西蒂米什瓦拉大学; Zsuzsanna Novak,匈牙利布达佩斯科维努斯大学; Tomasz Ochinowski,华沙大学,波兰; Barbara Herceg Paksic,奥西耶克大学,克罗地亚; Vera Palea,都灵大学意大利; Dusko Pavlovic,自由国际大学,克罗地亚萨格勒布; Igor Pihir,克罗地亚萨格勒布大学; Damir Piplica,克罗地亚斯普利特大学法医学系; Dmitri Pletnev,俄罗斯联邦车里雅宾斯克国立大学; Miroslaw Przygoda,华沙大学波兰; Bordin Rassameethes,农业大学,泰国; Karlis Purmalis,拉脱维亚大学,拉脱维亚;尼古拉斯·雷克,大都会州立大学; Kerry Redican,弗吉尼亚理工大学,布莱克斯堡; David Resende,葡萄牙阿威罗大学; Douglas Rhein,泰国玛希隆大学国际学院; Humberto Ribeiro,阿威罗大学,葡萄牙; Robert Rybnicek,格拉茨大学,奥地利; Suparerk Sooksmarn,农业大学,泰国; Tomasz Studzieniecki,欧洲 Nostra 学院,波兰; PornLapas Suwannarat,农业大学,泰国; Elzbieta Szymanska,比亚韦斯托克理工大学,波兰; Katarzyna Szymanska,波兰切哈诺夫国立职业教育高等学校; Ilaria Tutore,那不勒斯帕特诺普大学,意大利; Sandra Rachel Alves,葡萄牙莱里亚理工学院; Joanna Stawska,罗兹大学,波兰; Stanislaw Walukiewicz,比亚韦斯托克理工大学,波兰;托马斯·威尔,艾格尼丝·斯科特学院;李永强,澳大利亚维多利亚大学; Peter Zabielskis,澳门大学; Silvija Zeman,克罗地亚恰科夫库的 Medjimursko Velucilist;曾涛,威尔弗里德·劳里埃大学,加拿大滑铁卢; Snezana Zivkovic,塞尔维亚尼什大学。作者保留进一步出版的权利。我们过去的书籍已由 ProQuest、EconBIZ、CPCI(Web of Science)和 EconLit 数据库编制索引和摘要,可从经济和社会发展会议网站以 PDF 格式下载:http://www.esd-conference.com © 2023 瓦拉日丁发展和创业机构,瓦拉日丁,克罗地亚;北方大学,科普里夫尼察,克罗地亚;泰国曼谷农业商学院;泰国曼谷农业大学;华沙大学管理学院,波兰华沙;摩洛哥拉巴特穆罕默德五世大学法学院、经济和社会科学学院 Sale;摩洛哥丹吉尔阿卜杜勒马利克伊萨迪大学 ENCGT - 丹吉尔国立商业和管理学院;克罗地亚察科韦茨察科韦茨梅迪穆列理工学院。