摘要背景:本文介绍了一种新的 R/Bioconductor 包 rprimer,用于设计序列可变病毒的简并寡核苷酸和 PCR 检测。多重 DNA 序列比对用作输入数据,而输出则包括综合表格(数据框)和仪表板式图表。工作流可以直接从 R 控制台或通过图形用户界面(Shiny 应用程序)运行。本文演示并评估了 rprimer,方法是使用它设计两种诺如病毒基因组 I (GI) 检测:一种用于定量检测的 RT-qPCR 检测和一种用于 Sanger 测序和基于聚合酶衣壳的基因分型的 RT-PCR 检测。结果:使用检测为诺如病毒 GI 阳性的粪便样本评估生成的检测。RT-qPCR 检测准确扩增和量化了所有样本,并显示出与广泛使用的标准化检测相当的性能,而 RT-PCR 检测成功测序和基因分型了所有样本。通过与三个类似的免费软件包进行比较,确定了该软件包的优点和局限性。不同工具的几个特点是相似的,但 rprimer 的重要优势在于其速度、寡核苷酸设计的灵活性和可视化能力。结论:开发了一个 R/Bioconductor 软件包 rprimer,并证明它可以成功设计引物和探针,用于定量检测和基因分型序列可变的病毒。该软件包提供了一种高效、灵活且直观的退化寡核苷酸设计方法,因此可以帮助病毒研究和方法开发。
