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Suprewicz Łukasz、Zakrzewska Magdalena (micro)、Okła Sławomir、Głuszek Katarzyna、Sadzyńska Alicja、Deptuła Piotr、Fiedoruk Krzysztof、Bucki Robert：E
波形蛋白是一种中间丝状蛋白，主要因其在维持细胞结构中的细胞内作用而受到认可，最近引起了越来越多的关注，并成为免疫调节和宿主 - 病原体相互作用中的关键细胞外参与者。虽然细胞外波形蛋白的功能最初被其细胞骨架作用所掩盖，但现在越来越多的证据凸显了其在各种生理和病理事件中的重要性。本综述探讨了细胞外波形蛋白在调节免疫反应和协调宿主细胞与病原体之间相互作用方面的多方面作用。它深入研究了波形蛋白释放到细胞外环境中的潜在机制，阐明了其非常规分泌途径并确定了关键的分子触发因素。此外，还讨论了将细胞外波形蛋白用于诊断和作为疾病治疗的靶蛋白的未来前景。
评估 CRISPR/Cas9 基因组编辑对小麦病原菌 Parastagonspora nodorum 的功效
摘要背景：基因组编辑工具 CRISPR/Cas9 提供了一种产生靶向突变的有效方法，彻底改变了基因操作。该技术利用 Cas9 内切酶和向导 RNA (sgRNA)，它们相互作用形成 Cas9-sgRNA 复合物，通过引入双链 DNA 断裂来启动基因编辑。我们测试了 CRISPR/Cas9 方法作为促进小麦致病真菌 Parastagonospora nodorum 中各种反向遗传方法的有效性。结果：用 Cas9 蛋白和 sgRNA 转化 Parastagonospora nodorum 原生质体，以 Tox3 效应基因为靶点的预组装核糖核蛋白 (RNP) 复合物的形式转化。随后对 P. nodorum 转化子的筛选表明，筛选出的突变体 100% 被编辑。我们进一步测试了 RNP 复合物与含有 1 kb 同源侧翼 DNA 的 Tox3 -同源定向修复盒共转化时的功效。随后对所得转化子进行筛选，结果显示同源重组效率超过 70%。使用含有 50 bp 微同源侧翼的可选择标记的 Tox3 -同源定向修复盒进一步转化也实现了 25% 的同源重组效率。这些同源定向修复方法的成功表明 CRISPR/Cas9 适用于其他体内 DNA 操作方法，例如插入 DNA 和产生点突变。结论：这些数据突出了 CRISPR/Cas9 在加速 Parastagonospora nodorum 中无转基因基因敲除以及促进其他基因操作方法方面的巨大潜力。使用这些工具将大大减少评估疾病基因需求和进行功能研究以确定其作用所需的时间。关键词：CRISPR/Cas9、基因编辑、核糖核蛋白复合物、Parastagonospora nodorum