©编辑(如果适用)和作者,根据Springer Nature Switzerland AG 2022的独家许可,“痛苦,焦虑和压力的数字干预措施的更大图片:对1200多个对照试验的系统审查”是根据Creative Commons属性4.0 International许可(httpp:httpp:/httpp:/httpp:httpp:httpp:/creativecomm/fivecomm n oferny vents of 1200+对照试验''的系统评价。有关更多详细信息,请参见本章中的许可信息。这项工作属于版权。所有权利都是由出版商保留的,无论材料的全部或部分都涉及,都可以涉及翻译,重印,重新使用,插图,朗诵,广播,对微型企业或以任何其他物理方式或任何其他物理方式复制,以及以任何其他物理方式,以及传播或信息存储和检索,电子适应,计算机软件,相似或相似的方法,或者现在已知或不知情的方法。使用一般描述性名称,注册名称,商标,服务标记等。在本出版物中,即使在没有特定陈述的情况下,这种名称也不受相关的保护法律和法规的限制,因此也没有暗示,因此可以免费使用。出版商,作者和编辑可以肯定地假设本书中的建议和信息在出版之日被认为是真实而准确的。就本文包含的材料或可能已犯的任何错误或遗漏而言,出版商,作者或编辑都没有提供任何明示或暗示的保修。出版商在已发表的地图和机构之后的管辖权索赔方面保持中立。
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这种FDA开发的QPCR方法适用于使用Applied Biosystems TM(ABI)7500快速实时PCR系统快速筛选食品和环境表面。该方法靶向沙门氏菌浸润基因(INVA),该基因已被证明与s的内在化有关。哺乳动物上皮细胞中的伤寒(1-4)。该基因被发现是沙门氏菌(3,5)独有的,其DNA序列在沙门氏菌属中高度保守。(2,4,6)。该方法使用定制设计的引物和塔克曼探针来扩增具有严格特异性的沙门氏菌特异性Inva基因的262 bp片段(7,8,9),并包括定制设计的内部扩增对照(9),这是识别通常在食物中发现的PCR抑制pCR抑制的虚假结果所需的。可以在BAM第5章E9(https://www.fda.gov/media/107724/107724/download)中找到使用此QPCR方法作为沙门氏菌分离株的验证性测定的协议。在我们的两项MLV研究中,QPCR方法被证明是一种可再现,敏感和特定的快速筛选方法(11)。在MLV婴儿菠菜研究中,qPCR方法的检测极限50(LOD 50)为0.811 cfu/ 25g,用于BAM培养方法的0.837 CFU/ 25G(13)。在MLV冷冻鱼类研究中,QPCR和培养方法的LOD 50为0.75 CFU/25G。使用QPCR方法作为快速筛选工具的协议如下所述。协议中的QPCR组件和数据分析是针对ABI 7500快速实时PCR系统的。This qPCR method has been shown to be an effective and rapid screening tool for a broad range of foods that includes fruits, fresh leafy green vegetables and herbs (blackberry, blueberry, raspberry, strawberry, baby spinach, cabbage, iceberg lettuce, romaine lettuce, spring mix, basil, cilantro, parsley, dill, oregano, watercress), low-moisture foods (almond, almond butter, chia seed powder, dried cereal, dried egg noodle, infant formula, peanut butter, pine nuts, soy formula, walnuts), seafoods (fish, shrimp, raw oyster), whole shell eggs, spices (crushed red pepper, ground basil, ground black pepper, ground cumin, ground white pepper, paprika, red chili powder), and environmental surfaces (plastic, stainless钢,陶瓷瓷砖,橡胶和铸铁)以及多个动物饲料(小鸡饲料,优质苜蓿颗粒,小麦麸,整燕麦),它们是在一系列SLV研究中用浸泡或混合程序制备的(7,8,9,10)。必须首先根据FDA微生物学方法验证指南(https://wwwww.fda.gov/media/83812/download)或其他国际认可的验证指南,例如AOAC International的Appendix j(httpp:htttp:htttp:/JAPF:标准化组织的16140:2 2016(www.iso.org)。