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通过CRISPR-CAS9-介导的Hibit标记
许多蛋白质家族由多种高度同源蛋白组成，无论它们是由不同基因编码还是来自相同基因组位置的编码。某些同工型的优势与各种病理状况（例如癌症）有关。研究中蛋白质同工型的检测和相对定量通常是通过免疫印迹，免疫组织化学或免疫荧光来完成的，其中使用针对特定家族成员的同工型特异性表位的抗体。但是，同工型特异性抗体并非总是可用的，因此无法破译同工型特异性蛋白表达模式。在这里，我们描述了多功能11氨基酸标签的插入到感兴趣蛋白质的基因组位置中。此标签是开发的，由Promega（美国威斯康星州Fitchburg）发行。本协议描述了高度同源蛋白的精确蛋白质表达分析，通过hibit标签的表达，当缺失特定抗体时，可以实现蛋白质表达定量。可以通过传统方法（例如蛋白质印迹或免疫荧光）以及在荧光素酶二元报道器系统中分析蛋白质表达，从而可以使用板读取器进行可靠且快速的相对表达定量。
序列徽标：显示共识
序列的模式（4）。但是，共识序列并不代表序列中的所有信息，因为在许多情况下，其他碱基也出现了很大的频率。例如，主要是Aug的procaryotic启动密码子也有时也有Gug和Uug。如果人们忽略了这些可能性，则已经扭曲了数据。这是共识序列是结合位点的差模型的几个原因之一（5，6）。在绑定站点中特定位置的重要性更清楚地始终如一地描述了那里的模式所需的信息（7，8）。从同样可能的可能性中选择一个符号或状态需要一个“位”信息。例如，要向某人传达硬币弹的结果需要1个信息，因为只有一个是不是一个问题：“是头吗？”。如果绑定站点中的位置始终包含一个基数（例如g），然后我们需要两个信息，因为需要回答两个是的问题：“是A还是G？”（即是嘌呤吗？）和'是A还是C？”。（如果两个问题的答案都是“否”的，则必须是T。）此外，如果职位包含两个基础（例如有时A，有时是G），只有一个问题就足够了，因为四分之二的选择等同于两个选择中的一个。因此，仅需要一个位来描述仅包含嘌呤的结合位点的位置，但是需要两个位来描述始终包含腺嘌呤的位置。在1948年，克劳德·香农（Claude Shannon）展示了如何做到这一点（7,8）。如果碱的频率不是完全概括的，则需要更复杂的计算以在某个位置找到平均信息。在香农之后，我们将不确定性度量定义为：
CRISPR/CAS通过同源重组的第3章基因组编辑
在整个细胞发育中，DNA可能遭受威胁基因组完整性和细胞存活的损害。最有害的病变之一是双链DNA断裂（DSB），因为它可能导致基因组信息的丢失。DSB可能自然发生在细胞代谢期间，也可能是由外部因素触发的（Deriano; Roth，2013）。无论哪种方式，这些损坏都会通过细胞立即修复，主要是通过两种途径：非同源末端连接（NHEJ）或同源指导修复（HDR）。与通过NHEJ进行修复不同，NHEJ仅将裂解的DNA的末端连接起来（请参阅第2章），HDR途径需要存在相同或非常相似的模板，即完整的序列，以准确地修复病变的DNA（Heyer等人，2010年）。提供用于HDR中使用的模板的可能性代表了通过同源重组（HR）途径进行基因编辑的关键元素，该途径可能被利用为几种新的繁殖技术（NBT）之一。
异源促进h1N1疫苗接种加剧了疾病，在猪模型中，与不匹配的H1N2插入病毒的挑战
流经病毒（IAVS）对人类和动物健康构成了显着威胁。制定能够引起对抗原多样性IAV菌株的广泛的异源保护的IAV疫苗策略在有效控制该疾病方面至关重要。这项研究的目的是检查各种H1N1插入疫苗策略的免疫原性和保护性效率，包括单价，双重和异源促进疫苗接种方案，针对不匹配的H1N2 Suwin2 Swine-lofenza-lofEenza-lofeNza virus。五组是同源的，促进油的促进疫苗接种了一个油添加的全部吸收病毒（WIV）单价a/swine/georgia/georgia/27480/2019（GA19）H1N2疫苗，WIV单位a/sw/sw/sw/sw/sw/sw/sw/sw/sw/sw/sw/sw/a0263666116/2021（MN1） A/California/07/2009（CA09）H1N1，由CA09和MN21组成的WIV二价疫苗，或仅辅助疫苗（模拟疫苗接种组）。第六组用CA09 WIV进行了主要疫苗接种，并用MN21 WIV（异源Prime-Boost组）增强。四周后，促进猪的鼻内和气管内被A/猪/乔治亚/27480/2019，H1N2猪IAV领域分离株挑战。疫苗诱导的保护是根据五个关键参数评估的：（i）抑制（HAI）抗体反应的血凝性抗体反应，（ii）临床评分，（III）鼻拭子和呼吸道组织植酸盐中的病毒滴度，（III）降低病毒滴度，（IV）BALF细胞学学和（V）。不匹配的疫苗接种方案不仅未能在挑战后授予临床和病毒学保护，而且加剧了疾病和病理。While all vaccination regimens induced seroprotective titers against homologous viruses, heterologous prime-boost vaccination failed to enhance HAI responses against the homologous vaccine strains compared to monovalent vaccine regimens and did not expand the scope of cross-reactive antibody responses against antigenically distinct swine and human IAVs.与模拟疫苗接种的猪相比，异源促进的猪表现出长时间的临床疾病和肺部病理的增加。
高光暴露和β-胡萝卜素酮酶异源表达对胡萝卜素reinhardtii
结果：在这项研究中，用高光暴露和β-徘徊的酮醇酶的异源表达以时间依赖的方式研究了Reinhardtii中的类胡萝卜素代谢调节。结果表明，高光暴露（500μmol /m 2 /s）的应力对β-胡萝卜素的积累负调节。积极地诱导玉米黄质，晕辉语和甘氧蛋白的积累。并不断促进Zeaxanthin和canthaxanthin在C. reinhardtii中的积累。代谢组学分析表明，高光暴露应力促进了类胡萝卜素的生物合成，改善了与astaxanthin合成途径相关的中间体，并促进了β-胡萝卜素转化为下游物质。实施了几种策略，以改善Reinhardtii中的canthaxanthin的产生，以实现来自不同来源的β-芳香烯酮醇酶基因的过表达，包括强启动子，插入内含子和叶绿体传导肽。发现，在转化的过表达β-胡萝卜素酮醇酶的转化后，β-胡萝卜素，晕辉酮和canthaxanthin均显着增加。其中，在PH124-CRTO中发现了最高的canthaxanthin含量，这是
智能原型的霍斯学学习
摘要B-千奇蛋白具有重要的生态和生理作用以及广泛应用的潜力，但是很少有来自B-奇异生产剂的差异相关酶的表征。针对Tara Oceans基因地图集的查询，在芽孢杆菌元转录组中发现了来自12个PFAM接收器的4,939个与丁氏蛋白相关的独特序列。假定的几丁质合酶（CHS）序列在甲壳类（39％），斯特雷默刺激（16％）和昆虫（14％）中降低，来自Tara Oceans Unigenes Unigenes Unigenes Unigenes Unigenes版本1 Metatranscrentsomes（Matouv1 1 T）数据库的昆虫（14％）。从模型diatom thalassiosira pseudonana（thaps3_j4413，指定为tp chs1）中的CHS基因被鉴定。海洋微生物真核生物转录组测序项目（MMETSP），Phycocosm和Plaza Diotom Omics数据集的TP CHS1的同源分析表明，Mediophyceae和thalassionemales物种是潜在的B -Chitin生产国。tp chs1在酿酒酵母和三角肌中过表达。在转基因P. tricornutum系中，TPCHS1- EGFP定位于高尔基体和质膜，并且在细胞分裂期间的裂解沟中主要可获得。增强的TP CHS1表达可以诱导异常的细胞形态并降低三角杆菌的生长速率，这可能归因于G2/M期的抑制。S.酿酒酵母被证明是表达大量活性TPCHS1的更好系统，在放射测定中，在放射测定中有效地不合适的UDP-N-乙酰葡萄糖胺。我们的研究扩大了有关海洋真核微生物中几丁质合酶分类分布的知识，并且是第一个集体表征活性海洋硅藻CHS的知识，该硅藻可能在细胞分裂过程中起重要作用。
Bliss，Carly M.，Hulin-Curtis，Sarah L Orcid logoorcid：https：//orcid.org/000000-0000-0003-0889-964X，Williams，Marta，Marušková，Mahuule，Mahuule，Davies，James A. James A.
腺病毒（ADS）表现出了显着的成功，因为它是复制（RD）病毒载体的疫苗，以及基因治疗和癌症治疗的广泛潜力。ad载体通过二级细胞整合素相互作用在病毒纤维旋钮和细胞表面受体之间的直接相互作用来转导人类细胞。在广泛的系统发育中， AD受体使用情况各不相同。 经常研究人类AD血清型5（AD5），以及在许可的Chadox1 NCOV-19疫苗中的黑猩猩AD衍生的矢量“ Cha-Dox1”，两者都与Coxsackie和腺病毒受体（CAR）相互作用，这在人类上皮细胞和Eryperial cellial and Erytherth-eRyth-ryyth--rocytees中表达。 CAR使用对于靶向基因递送到具有低/负CAR表达的细胞（包括人DEN-DIRITICS）（DCS）和血管平滑肌细胞（VSMC）的细胞。 我们评估了用人类AD血清型49的旋钮键入的RD AD5矢量伪伪伪伪载体的性能，称为AD5/49K载体。 AD5/49K显示，使用5T4肿瘤相关的抗原在小鼠癌疫苗模型中评估时，鼠和人类DC超过了AD5，其转化为AD5。 此外，AD5/49K表现出增强的原代人VSMC的转导。 这些数据突出了用于血管基因治疗的AD5/49K载体的潜力，并作为有效的疫苗载体。AD受体使用情况各不相同。经常研究人类AD血清型5（AD5），以及在许可的Chadox1 NCOV-19疫苗中的黑猩猩AD衍生的矢量“ Cha-Dox1”，两者都与Coxsackie和腺病毒受体（CAR）相互作用，这在人类上皮细胞和Eryperial cellial and Erytherth-eRyth-ryyth--rocytees中表达。CAR使用对于靶向基因递送到具有低/负CAR表达的细胞（包括人DEN-DIRITICS）（DCS）和血管平滑肌细胞（VSMC）的细胞。我们评估了用人类AD血清型49的旋钮键入的RD AD5矢量伪伪伪伪载体的性能，称为AD5/49K载体。AD5/49K显示，使用5T4肿瘤相关的抗原在小鼠癌疫苗模型中评估时，鼠和人类DC超过了AD5，其转化为AD5。此外，AD5/49K表现出增强的原代人VSMC的转导。这些数据突出了用于血管基因治疗的AD5/49K载体的潜力，并作为有效的疫苗载体。
自体造血干细胞移植的全球特征和结果，用于新诊断的多发性骨髓瘤：全球血液和骨髓移植网络的研究（WBMT）
缩写：ANZTCT，澳大利亚和新西兰移植和蜂窝疗法注册表； BM，骨髓； BM，骨髓； CI，置信区间； CR，完全响应； Em，东地中海地区； HCT，造血细胞移植； HCT-CI，造血细胞移植合并症指数；人力资源，危险比； IMID，免疫调节药物； IQR，四分位数范围； ISS，国际分场评分； NRM，非释放死亡率； OS，整体生存； PB，外周血； PFS，无进展的生存； PI，蛋白酶体抑制剂； PR，部分反应； R/R，复发/难治； RI，复发发生率； VGPR，非常好的部分响应。欧洲数据由EBMT提供，还包括来自南非的患者（n = 142），哥伦比亚（n = 12），新加坡（n = 48），伊拉克（n = 1），伊朗（n = 114），印度（n = 3）和巴西（n = 7）。
自体造血干细胞移植的比较有效性与芬洛莫德，纳塔尔苏单抗和ocrelizumab在高度活跃的复发率中
标题：1自体造血干细胞移植的有效性与2 fingolimod，natalizumab和ocrelizumab在高度活跃的复发多个3个硬化症4 5作者（限制为50位作者）中：6 Tomas Kalincik，MD，MD，MD，Phd 1,2; Sifat Sharmin，博士1,2； Izanne Roos，MBCHB，博士1,2； Mark S.7 Freedman，医学博士3；哈罗德·阿特金斯（Harold Atkins），医学博士4；约阿希姆·伯曼（Joachim Burman），医学博士，博士5；詹妮弗·梅西（Jennifer Massey），MBBS，8博士6,7；伊恩·萨顿（Ian Sutton），MBBS，博士6,8；芭芭拉·威瑟斯（Barbara Withers），医学博士，博士9,7；理查德·麦克唐纳（Richard MacDonell），医学博士，9博士10,11；医学博士Andrew Grigg博士12,11; ØivindTorkildsen，医学博士，博士13; Lars Bo，医学博士，博士13； 10 Anne Kristine Lehmann，医学博士，博士14；伊娃·库巴拉·哈夫多瓦（Eva Kubala Havrdova），医学博士15；伊娃·克拉苏洛娃（Eva Krasulova），医学博士，11博士学位15； Marek Trneny，医学博士，博士16；托马斯·科扎克（Tomas Kozak），医学博士，博士17； Anneke van der Walt，MBBS，12博士18,19； Helmut Butzkueven，MBBS，博士18,19； Pamela McCombe，MBBS 20,21; Olga Skibina，13 Mbbs 22,23,18; Jeannette Lechner-Scott，医学博士，博士24,25；芭芭拉·威尔肯斯（Barbara Willekens），医学博士，博士26,27； 14 Elisabetta Cartechini，医学博士28; Serkan Ozakbas，医学博士29; Raed Alroughani，医学博士30；詹斯·库尔（Jens Kuhle），15 MD，博士学位31；弗朗切斯科·帕蒂（Francesco Patti），医学博士32;，33;皮埃尔·杜奎特（Pierre Duquette），医学博士34；医学博士Alessandra Lugaresi，16 PhD 35,36;萨米亚·J·库里（Samia J. Khoury），医学博士，博士37; Mark Slee，医学博士，博士38; Recai Turkoglu，医学博士39; 17 Suzanne Hodgkinson，医学博士40； Nevin John，医学博士，博士41,42； Davide Maimone，医学博士43; Maria Jose 18 SA，MD 44；文森特·范·佩奇（Vincent van Pesch），医学博士，博士45,46;奥利弗·格拉赫（Oliver Gerlach），医学博士，博士47,48； Guy Laureys，19 MD 49； Liesbeth van Hijfte，医学博士49; Rana Karabudak，医学博士50； Daniele Spitaleri，医学博士51； Tunde 20 Csepany，医学博士，博士52; Riadh Gouider，MD 53,54; Tamara Castillo-Triviño，医学博士55;布鲁斯·泰勒（Bruce Taylor），21 MD，博士64,65； 22 Basil Sharrack，医学博士，博士56;约翰·A·斯诺登（John A Snowden），医学博士，博士57 23代表MSBASE作者和MSBASE合作者。24 25 MSBASE作者将在小组作者身份中列出：26 Saloua Mrabet，MD 53,54；贾斯汀·加伯（Justin Garber），MBBS 58; Jose Luis Sanchez-Menoyo，医学博士59; Eduardo 27 Aguera-Morales，MD 60; Yolanda Blanco，医学博士61; Abdullah al-Asmi，MD 62; Bianca Weinstock-28 Guttman，MD 63; Yara Fragoso，MD 66; Koen de Gans，MD 67; Allan Kermode，医学博士，博士68,69 29 30 31 32隶属关系：33 1，神经免疫学中心，皇家墨尔本皇家墨尔本医院神经病学系，澳大利亚墨尔本34号，澳大利亚墨尔本34 34，Core 35 2，核心医学系，墨尔本大学，墨尔本大学，墨尔本大学，澳大利亚澳大利亚澳大利亚墨尔本大学，澳大利亚36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 3 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 36 3 36 36 36 3 36 36 36 3 36 36 33 3 33，医学院3. 4，渥太华医院研究所，渥太华大学，渥太华，加拿大39 5。医学科学系，神经病学，乌普萨拉大学，乌普萨拉，瑞典40 6。澳大利亚悉尼圣文森特医院悉尼神经病学系41 7。St Vincent的临床学校，新南威尔士大学，澳大利亚悉尼42 8。 悉尼大学，澳大利亚悉尼43 9。 血液学系，澳大利亚悉尼圣文森特医院悉尼44 10。 澳大利亚墨尔本奥斯汀健康神经病学系45 11。 墨尔本大学，澳大利亚墨尔本46 12。 血液学系，奥斯汀健康，澳大利亚墨尔本47 13。 挪威卑尔根卑尔根大学医院神经病学系48 14。 挪威卑尔根北汉氏大学医院血液学系49 15。 血液学系，布拉格查尔斯大学第一学院和捷克共和国布拉格普拉格通用大学医院52St Vincent的临床学校，新南威尔士大学，澳大利亚悉尼42 8。悉尼大学，澳大利亚悉尼43 9。血液学系，澳大利亚悉尼圣文森特医院悉尼44 10。澳大利亚墨尔本奥斯汀健康神经病学系45 11。墨尔本大学，澳大利亚墨尔本46 12。血液学系，奥斯汀健康，澳大利亚墨尔本47 13。挪威卑尔根卑尔根大学医院神经病学系48 14。挪威卑尔根北汉氏大学医院血液学系49 15。血液学系，布拉格查尔斯大学第一学院和捷克共和国布拉格普拉格通用大学医院52神经病学系和临床神经科学中心，捷克共和国布拉格的布拉格50号医学院第一院
成功的自体造血干细胞移植在难治性抗Caspr1抗体淋巴结中
1神经学系，神经中心，瑞士锡安，瑞士2号，瑞士2临床神经科学系，洛桑大学（CHUV）大学医院和洛桑大学，瑞士洛桑大学，瑞士大学3号，洛桑血液学系3疾病和ALS，LA TIMONE医院，法国Marseille，5个部门和神经病学实验室，国家参考“稀有周围神经病”，Limoges大学医院（CHU LIMOGES），法国Limoges，6 Institut degénomiquefoncountionnelle，Montpellier，cnrander，cnrander，cnrance cnrance in Insermer，Insermermermer，Montermer，Montermer，Montermer，Montermenter，Insermermenter，Montermermen