结果:PCR和整个基因组分析证实了MCR-1基因在10个大肠杆菌分离株中的存在。colistin的最小抑制浓度范围为4 ug/ml至32 ug/ml。分解分析表明,存在多种耐药性决定因素,赋予β-内酰胺,氨基糖苷,甲氧苄胺,磺胺酰胺,四环素,四环素,喹诺酮类,氟烯甲苯甲酸和大乙二醇化的多种耐药性决定因素。杂交基因组组装表明MCR-1在INCI2质粒上携带。质粒复制子键入表明INCI2型质粒(n = 10)是这些菌株中最普遍的质粒,其次是Incfib(n = 8),Incfic(n = 7),Incfia(n = 6),INCFII(incfii(incfii(incfii)(4),INCQ1(n = 3),INCQ1(n = 3),INCI1(N = 1),IN = 1),IN = 1(n = 1),IN = 1(n = 1),IN = 1(n = 1),(n = 1),(n = 1),(n = 1),(n = 1),(n = 1)(n = 1),(n = 1)(n = 1),(n = 1)。Achtman MLST打字方案在MCR -1阳性大肠杆菌中揭示了STS的大量多样性。毒力芬德分析表明,存在范围为4到19的许多毒力因子。
摘要:结肠素是一种用于治疗多药耐药的革兰氏阴性菌粒的最后一个抗菌剂。表型结肠蛋白抗性高度与质粒介导的移动结肠蛋白抗性(MCR)基因高度相关。MCR - 耐肠杆菌科在许多国家都被发现,随着抗组织素病原体的出现是全球关注的。这项研究评估了MCR-1,MCR-2,MCR-3,MCR-4和MCR-5基因的分布,并在孟加拉国的腹泻婴儿和儿童分离株中具有表型结肠蛋白耐药性。使用API-20E生化面板和16S rDNA基因测序鉴定细菌。聚合酶链反应检测到分离株中的MCR基因变体。通过琼脂稀释剂和E检验确定其对大肠菌素的敏感性,并通过最小的抑制浓度(MIC)测量来确定。根据琼脂稀释评估(MIC>2μg/ml),分离株超过31.6%(71/225)的分离株显示出结肠蛋白酶的耐药性。总体而言,15.5%的分离株携带MCR基因(7,MCR-1; 17,MCR-2; 13和MCR-3,共发生在两个分离株中)。临床突破MIC值(≥4μg/ml)与91.3%的MCR阳性分离株有关。MCR-斑点病原体包括20个spp。,五个志贺氏菌,五个柠檬酸杆菌属,两个克雷伯氏菌肺炎和三个假单胞菌parafulva。MCR基因似乎与表型结肠蛋白抗性现象显着相关(P = 0.000),其中100%抗菌菌素抗性分离株显示了MDR现象。患者的年龄和性别与检测到的MCR变体没有显着关联。总体而言,邦德什已经出现了与MCR相关的抗colist蛋白抗性细菌,该细菌需要进一步的研究来确定其传播并促进活动以降低耐药性。
摘要:丝状真菌基因组测序表明,大多数次级代谢物生物合成基因簇 (BGC) 在标准实验室条件下处于沉默状态。在这项研究中,我们在温氏曲霉中建立了一个体外 CRISPR-Cas9 系统。为了激活原本沉默的 BGC,我们删除了负转录调节因子 mcrA 。当菌株在马铃薯葡萄糖培养基 (PDA) 上培养时,mcrA (mcrA Δ) 的缺失导致总共产生 17 种 SM。在 15 种 SM 中,有 9 种已得到充分表征,包括大黄素 ( 1 )、大黄酸乙酯 ( 2 )、sulochrin ( 3 )、大黄酸乙酯二蒽酮 ( 4 )、14- O-脱甲基sulochrin ( 5 )、( 反式 / 顺式 )-大黄素二蒽酮 ( 6 和 7 ) 和 ( 反式 / 顺式 )-大黄素大黄酸乙酯二蒽酮 ( 8 和 9 )。经发现,这些化合物均由相同的聚酮合酶 (PKS) BGC 产生。随后,我们在 mcrA Δ 背景下针对该 PKS 簇进行了二次敲除。双敲除菌株的代谢物谱揭示了先前未在 mcrA Δ 亲本菌株中检测到的新代谢物。从双敲除菌株中纯化出另外两种 SM,并被鉴定为曲霉酸 B ( 16 ) 和一种结构相关但之前未鉴定的化合物 ( 17 )。这项工作首次提出了一种能够在 A.wentii 中进行靶向基因编辑的简便遗传系统。这项工作还说明了进行双敲除以消除主要代谢产物的实用性,从而能够发现更多的 SM。■ 简介
