在 PET 或放射免疫治疗的诊断和放射治疗药物的开发中,快速获取放射性标记抗体的方法至关重要。人类肝细胞生长因子受体 (c-MET) 信号通路在包括胃癌在内的几种恶性肿瘤中失调,是药物发现中的重要生物标志物。在这里,我们使用光放射化学方法直接从完全配制的药物 (MetMAb) 开始生产 89 Zr 放射性标记的 onartuzumab(一种单价抗人 c-MET 抗体)。方法:在含有 89 Zr-草酸盐、光活性螯合物去铁胺 B (DFO) - 芳基叠氮化物 (DFO-ArN 3 ) 和 MetMAb 的一锅反应中同时进行 89 Zr 放射性标记和蛋白质结合,得到 89 Zr-DFO-azepin-onartuzumab。作为对照,使用预纯化的 onartuzumab 和 DFO-Bn-NCS,通过常规两步工艺制备 89 Zr-DFO-苄基 Bn-异硫氰酸酯 Bn-NCS-onartuzumab。使用尺寸排阻法纯化放射性示踪剂,并通过放射色谱法进行评估。研究了人血清中的放射化学稳定性,并使用 MKN-45 胃癌细胞通过细胞结合试验确定了免疫反应性。对带有皮下 MKN-45 异种移植瘤的雌性无胸腺裸鼠进行多个时间点(0 – 72 小时)的 PET 成像。在获得最终图像后进行生物分布实验。通过竞争性抑制(阻断)研究在体内评估了 89 Zr-DFO-azepin-onartuzumab 的肿瘤特异性。结果:初始光放射合成实验在不到 15 分钟的时间内产生了 89 Zr-DFO-azepin-onartuzumab,分离的衰变校正放射化学产率 (RCY) 为 24.8%,放射化学纯度约为 90%,摩尔活度约为 1.5 MBq nmol − 1。反应优化将 89 Zr-DFO-azepin-onartuzumab 的放射化学转化率提高到 56.9% ± 4.1% (n=3),分离的 RCY 为 41.2% ± 10.6% (n=3),放射化学纯度超过 90%。采用常规方法生产 89 Zr-DFO-Bn-NCS-onartuzumab,分离 RCY 超过 97%,放射化学纯度超过 97%,摩尔活性约为 14.0 MBq nmol − 1 。两种放射性示踪剂均具有免疫反应性,在人血清中稳定。PET 成像和生物分布研究表明,两种放射性示踪剂均具有较高的肿瘤摄取率。到 72 小时时,89 Zr-DFO-azepin-onartuzumab ( n = 4) 的肿瘤和肝脏摄取量(注射剂量百分比 [%ID])分别达到 15.37 ± 5.21 %ID g − 1 和 6.56 ± 4.03 % ID g − 1,而 89 Zr-DFO-Bn-NCS-onartuzumab ( n = 4) 的肿瘤和肝脏摄取量分别达到 21.38 ± 11.57 %ID g − 1 和 18.84 ± 6.03 %ID g − 1。阻断实验显示肿瘤摄取量显著降低
受体酪氨酸激酶 (RTK) 共表达促进肿瘤耐药性,这是由于磷脂酰肌醇-3'-激酶/蛋白激酶 B 和 KRAS/细胞外信号调节激酶信号通路等存在冗余。致癌 RTK 肝细胞生长因子受体 (MET)、表皮生长因子受体 (EGFR) 和人表皮生长因子受体 2 (HER2) 之间的串扰与肿瘤对 RTK 靶向疗法的耐药性有关。方法:在相关肾细胞癌患者来源的异种移植模型中,我们使用 89 Zr 标记的抗 RTK 抗体 (免疫 PET) 奥那妥珠单抗、帕尼单抗和曲妥珠单抗分别监测 MET、EGFR 和 HER2 蛋白水平,在使用模型对其有耐药性(西妥昔单抗)或敏感(INC280 和曲美替尼)的药物治疗期间。结果:西妥昔单抗治疗导致肿瘤持续生长,以及免疫 PET 和细胞水平的离体肿瘤中所有 RTK 蛋白水平增加。相反,在双重 MET/丝裂原活化蛋白激酶抑制后,肿瘤生长明显减缓,并且与 RTK 水平降低相对应。结论:这些数据表明 RTK 靶向免疫 PET 可用于注释 RTK 蛋白表达变化并告知肿瘤对靶向治疗的反应。
摘要 简介 I/II 期临床试验表明,肝细胞生长因子 (HGF)/间质上皮转化 (MET) 通路靶向药物在抑制胃癌 (GC) 方面有效。进行了随机对照试验 (RCT),评估在化疗中添加抗 HGF/MET 药物 (rilotumumab 或 onartuzumab) 是否会改善晚期 GC 的生存结果,但得出的结论相互矛盾。因此,我们计划进行这项系统评价和荟萃分析,以综合有关抗 HGF/MET 药物联合化疗作为晚期 GC 一线治疗的疗效和安全性的证据。方法与分析将从开始到 2022 年 1 月 31 日对 PubMed、Embase 和 Cochrane 对照试验中心注册库进行系统搜索,不受语言限制,以确定探索抗 HGF/MET 药物联合化疗作为晚期 GC 一线治疗的比较疗效和安全性的 RCT。主要结果将是事件发生时间无进展生存期和总生存期,次要结果将是疾病控制率、总不良事件率和 3-5 级不良事件率。统计异质性将通过目视检查森林图来评估,并使用 I 2 统计数据进行测量。当异质性低时,将使用固定效应模型,否则将选择随机效应模型。出版偏倚将通过漏斗图来评估;亚组分析和敏感性分析将在正确的环境中进行。对于每个结果,我们将使用 Rev Man V.5.3 软件进行数据合成,并使用 GRADEpro 软件编制“研究结果摘要”表。道德与传播由于本研究不会收集个人数据,因此无需获得道德批准。预计结果将在会议上和通过在同行评审期刊上发表来传播,对方案的任何调整都将在最终报告中清楚地记录和解释。 PROSPERO 注册号 CRD42020177404。