图1。cts stemscale培养基提供的性能与Ruo Stemscale培养基相似。如表1所示,与在Ruo Stemscale培养基中生长的球体相比,在CTS茎层培养基中生长的球体将需要额外的生长一天才能达到相似的细胞收率。(a)通过日的球体形态。在Ruo Stemscale培养基中生长的球体通常在5天内平均直径为400 µm,而在CTS茎尺度培养基中生长的球体将需要额外的一天才能达到类似的直径。(b)通过日的累积细胞扩展。通过在第5天收集在Ruo Stemscale培养基中生长的球体,并在第6天在CTS Stemscale培养基中生长的球体,可以实现相似的总细胞产量(报道为折叠膨胀)。(c)球体直径比较。在RUO茎谱培养基中生长的球体的球体直径和CTS Stemscale培养基中生长的球体在各自的收获天数相似,两者都接近直径400 µm的上部建议。
36. 我可以同时给多少个 6 孔板或培养容器喂料?首次在孔板或其他培养容器中培养悬浮培养物时,我们建议一次只给这些容器喂料一个。随着您变得更加有经验并熟悉其细胞系在悬浮状态下的表现,您可以选择增加同时喂料的培养物数量。经验丰富的用户可以轻松同时给多个 6 孔板或 125 毫升摇瓶喂料。只要及时更换所有容器中的培养基,沉降的球体聚集成大团块的风险就会降到最低。
PSC悬架介质,以支持基于PSC的临床制造工作流程。cts stemscale不含异种,使单个细胞可以自由聚集成3D球体,以有效地细胞膨胀。cts stemscale支持诱导的多能干细胞(IPSC)和胚胎干细胞(ESC),每个通过的细胞系依赖性生长在5倍 - 10倍膨胀范围内。当在多个连续的通道上培养时,这些球体已被证明可以保持多能性,基因组稳定性和三利分化潜力。这种悬浮培养方法可以轻松地在各种细胞培养容器大小中进行扩展,从小规模(<100 mL)培养容器到包括生物反应器的大规模(> 1L)培养系统。值得注意的是,通过使用这种PSC培养基在生物反应器中生长球体,将4.5亿个细胞在5天内扩展到50亿个细胞。为了更好地启用未来的扩展或其他下游应用,我们还以高密度冷冻保存这些细胞,这将最大程度地减少解冻所需的冰冻量的数量。从这些小瓶中解冻的细胞表现出很高的活力,并且能够形成能够以正常速率扩展的球体。最终,在CTS Stemscale中生长的细胞具有区分为3D球体,将其分化为单个细胞并在下游应用中使用,或者作为单个单元供以将来使用的单个细胞进行冷冻保存。
stemscale TM PSC悬浮培养基,设计用于CGT制造,可实现PSC的大规模培养。天然杀伤(NK)细胞是先天的,细胞毒性的淋巴免疫细胞,可以杀死恶性细胞而无需HLA匹配,并且是同种异体治疗发展的主要重点。nk细胞疗法临床试验表明,有效治疗可能需要〜5x10 6-1x10 8 nk细胞。但诸如捐助者采购和成功扩展之类的要求妨碍了有效产生大量功能性NK细胞的能力。在这里,我们描述了一种产生PSC衍生的NK(墨水)细胞的方法,该方法从CTS-STAMScale悬浮培养物中,使能够以可扩展的培养格式产生高度富集的功能性油墨。PSC在悬浮液中生长,因为使用生长因子鸡尾酒诱导球体,以区分CD34+造血祖细胞,然后在不使用进料细胞的情况下转化为CD56+墨水细胞。CTS TM NK-Xpander TM中墨水细胞的进一步培养导致CD56+CD3-和CD56+CD16+表型的显着富集。这些墨水的细胞溶性通过它们杀死K562癌细胞以及患者来源的3D结肠肿瘤的能力进一步证明了这些墨水。总而言之,CTS茎扫描的使用突出了馈线 - 游离PSC悬浮培养物的潜力,以分为大规模的细胞溶解油墨。
PSC 和神经元细胞培养 Essential 8 培养基 500 mL A1517001 StemFlex 培养基 500 mL A3349401 StemScale PSC 悬浮培养基 1 L A4965001 B-27 Plus 添加剂 10 mL A3582801 Neurobasal Plus 培养基 500 mL A3582901 蛋白表达系统 Expi293 表达系统试剂盒 1 套 A14635 ExpiCHO 表达系统试剂盒 1 套 A29133 ExpiSf 表达系统入门试剂盒 1 套 A38841 Expi293 GnTI 表达系统试剂盒 1 套 A39250 Expi293 诱导表达系统 1 套 A39251 Expi293 诱导 GnTI 表达系统试剂盒 1 套 A39252 CTS 产品 CTS Essential 8 培养基 500 mL A2656101 CTS 氙气电穿孔系统1 个系统 A50301 CTS Rotea 逆流离心系统 1 个系统 A44769 CTS NK-Xpander 培养基 500 mL A5019001 CTS AIM V 培养基,不含酚红,不含抗生素 2 L A4672701 CTS AIM V SFM 1,000 mL 0870112DK CTS LV-MAX 慢病毒生产系统 1 套 A35684 CTS OpTmizer Pro SFM 1 L A4966101 CTS 病毒生产培养基 1 L A5144001 CTS 病毒生产细胞 2.0 1.5 mL A48400 CTS AAV-MAX 转染试剂盒 用于 1 L 生产 A5427701 CTS AAV-MAX 裂解缓冲液 100 mL A5152101 转染产品 Lipofectamine 3000 转染试剂0.1 毫升 L3000001 Neon NxT 电穿孔系统入门包 1 套件 NEON1SK 根据您的需求在 thermofisher.com/transfectionselect 查找转染产品