背景:马铃薯种植在世界主要农作物中排名,但容易受到众多疾病的影响。将草甘膦抗性基因的整合到马铃薯植物中,可以直接应用草甘膦,从而简化杂草和疾病的管理。这项创新减少了对复杂控制方法的需求。此外,还采用了各种生物技术策略来应对马铃薯种植中的疾病挑战。目的:通过农杆菌介导的转化方法制定了有效的方案,该方法具有质粒,P485,该方法具有来自细菌种类dickeya dadantii的ARO A基因,以提高对马铃薯细菌软性腐烂疾病的耐药性。这项研究旨在研究草甘膦施用与马铃薯对两种影响植物的细菌病原体的抗性之间的关系。材料S和方法:将草甘膦的最佳浓度(1.8 mg.l -1)应用于转基因马铃薯品种。奥德赛品种的叶子表现出对两种致病性菌株的抗性,即胸骨杆菌21a和D. dadantii Ena49。聚合酶链反应(PCR)和逆转录PCR(RT-PCR)验证证明了马铃薯基因组中ARO A基因的成功整合和异源表达。此外,转录分析揭示了与马铃薯相关的发病机理相关基因和基因的表达
摘要 - 马铃薯(索拉纳姆结核L.)是印尼社会高度要求的至关重要的食物来源。2018年国家马铃薯作物的生产力约为1,284,773吨。提高马铃薯的可用性需要通过扩大耕种区域并采用改进的耕种技术来提高生产率。但是,过度使用无机肥料可能会对土壤生育能力和质量产生不利影响。因此,必须使用有机肥料来增强有机物含量,例如源自加工糖甘蔗残留物的液体有机肥料,从而增强土壤生育能力。因此,本研究旨在确定液体有机肥料的最佳剂量,以增强马铃薯植物的生长和产量。这项研究是从2022年6月至2022年10月在帕苏鲁安摄政区图图尔区的Nongkojajar村进行的。使用了各种工具,包括手持式拖拉机,铭牌,竹子钉,宝石,胶带量,150 L鼓,搅拌钻,5升和250毫升量杯,车辆和相机。格兰诺拉麦片品种的马铃薯种子,液体有机肥料,无机肥料(尿素,SP-36和KCL)以及土壤和水样构成了研究的材料。采用了实验研究方法,利用环境随机块设计(RBD)重复了七种治疗方法。参数所观察到的植物高度,叶子数量,叶子面积,干重,植物生长速率,土壤化学分析,养分吸收和收获分析。结果表明,与没有肥料的对照组相比,在100%剂量下的液体有机肥料的治疗以50%,100%,150%和200% + 80%的无机肥料的剂量综合治疗在马铃薯植物中的生产率较高。此外,这些治疗方法与100%标准剂量的无机肥料相比表现出可比的马铃薯植物生产力。
分别使用嵌合引物UF/UT (-)和gRT (+)/gR-R进行扩增,其中靶序列被设计在gRT (+)和UT (-)引物中。在嵌套PCR位点特异性引物对的第二个PCR反应中,使用含有BsaI切割位点的Pps/Pgs来扩增带有靶序列的sgRNA表达盒。BsaI位点被设计在用于Golden Gate连接的位点特异性引物中。BsaI属于IIs型限制性内切酶,具有一种新的切割特性,可以产生非回文的独特粘性末端,从而避免自连接和连接不相容末端[39]。我们使用Golden Gate克隆策略制备了pYLCRISPR/Cas9Pubi-BstERF3构建体,该构建体携带两个由OsU6a启动子驱动的sgRNA表达盒,用于马铃薯的基因靶向。
翻译起始因子,特别是 eIF4E 家族,是许多植物物种对马铃薯 Y 病毒组隐性抗性的主要来源。然而,在马铃薯 (Solanum tuberosum L.) 种质中尚未鉴定出 eIF4E 介导的对该病毒属的抗性。与番茄一样,马铃薯 eIF4E 基因家族由 eIF4E1、其旁系同源物 eIF4E2、eIF(iso)4E 和 nCBP 组成。在番茄中,eIF4E1 敲除 (KO) 可对一组马铃薯 Y 病毒组产生抗性,而 eIF4E1/2 双 KO 虽然可产生更广泛的抗性,但会导致植物发育缺陷。这里,四倍体马铃薯 cv。 Desirée 拥有显性 Ny 基因,该基因可抗马铃薯 Y 病毒 (PVY) 菌株 O 但不抗 NTN,用于评估通过 CRISPR-Cas9 介导的 eIF4E1 易感基因 KO 来扩大其 PVY 抗性谱的可能性。经过植物原生质体转染再生的双重过程,获得了 eIF4E1 KO 马铃薯。敲除是针对 eIF4E1 的,在其 eIF4E2 旁系同源物中未发现突变。eIF4E 家族的表达分析表明,eIF4E1 的破坏不会改变其他家族成员的 RNA 稳态水平。用 PVY NTN 分离物攻击的 eIF4E1 KO 系显示病毒积累减少和病毒诱导症状改善,表明 eIF4E1 基因是其增殖所必需的但不是必需的。我们的数据表明,可以通过增强 eIF4E 介导的隐性抗性,有效利用 eIF4E1 编辑来拓宽优良马铃薯品种(如 Desirée)的 PVY 抗性谱。
加工品种,源自1902年的“ Burbank”突变(Bethke等,2014)。世界上有4000多个马铃薯品种,在英国列表中有500多个(Ghimire,2022年)。这表明一旦某种品种吸引了一旦捕捉到一个新的来代替它就很难。为了进一步使繁殖复杂的栽培马铃薯是四倍体的,具有高度的杂合性和同样高的近交抑郁症的可能性(Slater等,2014),需要12-20年的年度,用于开发和释放一种新的马铃薯品种(Bonierbale等人(Bonierbale等,2020年)。它的四倍体性质使得难以繁殖所有四个等位基因的特征,其中所有四个等位基因都必须是基因的最佳版本,例如对疾病的抗性。一旦进行了交叉,所有特征就在发挥作用,并且会重新组合以创建新型的马铃薯类型,但不一定与所需特征的结合,或者只有一个或几个特定的改变特征。此外,
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沉默机制。BG25马铃薯中修饰的第二种预期效应是降低糖的水平并减少酶促变暗(称为“黑点”)。Simplot引入了含有液泡转化酶基因(VINV)和多酚氧化酶基因(PPO)的倒重复段的DNA序列,它们产生DSRNA以降低VINV和PPO的RNA转录水平。VINV基因编码VINV蛋白,该蛋白参与将蔗糖转化为其成分减少糖,而PPO基因编码PPO蛋白,该PPO蛋白氧化酚类化合物可产生深色色素。第三,Simplot引入了来自卵巢结核的改性乙酰乳酸合酶基因(Stmals),该基因编码了stmals蛋白,该蛋白具有对乙酰乳酸合酶(ALS)的耐受性,可抑制除草剂,并用作可选的标记。
马铃薯(Solanum tuberosum L.)是世界第三大消费食品,营养丰富、生产潜力大,在全球粮食安全中发挥着核心作用。在巴西,尽管产量很大,但由于高温、病虫害压力加大等因素,仍远未达到最高作物产量。高于作物理想范围(15°C 至 20°C)的温度会损害植物的新陈代谢,降低块茎的产量和质量。在这些健康挑战中,马铃薯Y病毒(PVY)的影响最大,它影响植物的新陈代谢、必需光同化物的运输和生产,从而损害植物的发育。鉴于上述情况,该项研究的目标是选出具有高农学潜力且在热带条件下能抗 PVY 病毒的克隆。该实验是在 2020/2021 年水资源收获期间采用 p-rep 实验设计在位于 Lavras-MG 市的 Lavras-Fazenda Muquém 联邦大学科学技术发展中心进行的。对来自 RPC 群体的 312 个克隆(分为 12 个家族,由预先建立的杂交获得)进行了以下性状评估:总块茎生产力(t ha -1 )和比重。在评估农艺性状后,确定了存在 Ry adg 等位基因的克隆。通过分子标记辅助选择(SAM)。使用 R 软件,通过混合线性模型,对农学数据分别进行每个性状的偏差分析 (ANADEV)。使用克隆的平均值加上实验误差来获得维恩图。这项工作允许通过 SAM 识别出存在 RY adg 等位基因的大约 60% 的克隆。此外,还有 80 个克隆品种具备 BRS ANA 品种的三大优良特性,可用于继续进行改良计划。 RPC 10-04 克隆品种脱颖而出,块茎总产量超过 40 吨/公顷,比重接近 1.070,并且对 PVY 具有抗性。关键词:Solanum tuberosum L.;改进;马铃薯Y病毒;标记辅助选择。
合成单元开发的七个方面将分两个阶段在五年计划中得到资助(图 3)。至关重要的是,我们要在农作物中设计和测试合成单元,并开发可用于多种作物的方法,以对粮食安全产生有益影响。为了最大限度地发挥技术进步共享的潜力,第一阶段的工作将集中于单一作物品种马铃薯(Solanum tuberosum),第二阶段将扩展到其他品种(包括单子叶植物)。选择马铃薯既有社会原因,也有科学原因:它是一种具有社会和经济重要性的作物,而且相对容易转化。将在计划开始时与所有创建者协商确定要使用的马铃薯具体品种。第一阶段的概念验证工作可以在衣藻、立碗藓、浮萍、拟南芥或烟草等模型物种中建立。