从无DNA编辑的葡萄藤原生质体中的植物再生Simone scintilla 1*,Umberto salvagnin 1,Lisa Giacomelli 2,Tieme Zeilmaker 2,Mickael A. Mickael A. Malnoy A. Malnoy 1,Jeroen Rouppe Van der Voort 2,Claudio Moser 1。1果实作物,研究与创新中心的基因组学和生物学系,E. Mach 1,I-38010,San Michele A/Adige(TN)意大利; 2 Enza Zaden,Haling 1-E,1602 dB,Enkhuizen,荷兰。*通讯作者:Simone Scintilla博士(Simone.scintilla@unitn.it)。抽象的CRISPR-CAS技术已广泛扩展了植物育种中基因组编辑的应用领域,从而使遗传库中可能的特定和最小突变。关于标准基因组编辑技术,可以以核糖核蛋白(RNP)的形式引入CRISPR-CAS机械,从而避免将外源性DNA引入细胞中。对将无DNA递送到植物细胞中应用中的兴趣不断增加,尤其是在有价值的木本植物精英品种的情况下,CRISPR-CAS9技术将保留其基因型,同时仍导致靶向遗传修饰。通过确保CRISPR-CAS DNA-RNP作为RNP的无效递送,并且由于单个编辑的单元将不存在嵌合体,因此,使用CRISPR-CAS DNA-无需递送,非常适合新育种技术的需求。然而,通常通过低编辑效率和不成功的再生过程来阻碍木质植物中原生质体的细胞培养。深红色的L.胚胎愈伤组织。此策略符合无DNA策略要求。我们在这里描述了一种成功的无DNA方法,以获得完全编辑的葡萄植物,该方法是从V. vinifera cv获得的原生质体中再生的。在浓霉敏感性基因VVDMR6-2上编辑了转染的原生质体。再生的编辑植物表现出1bp或2bp的纯合缺失,以及1BP的纯合插入。引言基因组编辑技术允许以高度精确度修改细胞DNA。尤其是随着CRISPR-CAS9的出现(群集定期间隔短的短质重复 - CAS9)技术,基因组编辑的应用领域已被广泛扩展。该系统基于通过互补的RNA序列和CAS核酸酶介导的DNA双链破裂对DNA编辑位点的识别,这使得插入,缺失,甚至仅仅使一个核苷酸的修饰成为可能。因此,尤其是在木质植物遗传改善的情况下(例如葡萄藤或苹果)精英品种,CRISPR-CAS9技术可确保其基因型保存,同时导致靶向遗传修饰。CRISPR-CAS成分可以以核酸的形式引入细胞内(即DNA/mRNA编码整个系统),或以核糖核蛋白(RNP)复合物的形式进行编码。虽然DNA可以整合到基因组中,而mRNA受其内在不稳定性的影响,但RNP的直接细胞递送打开了有吸引力的场景,因为它有可能体现出强大的方法论,导致特定而最小的突变,而没有外源性DNA的痕迹(Woo等,2015)。从这种角度来看,与经典的转基因生物相比,对植物的应用兴趣可能会更好地接受消费者(Saleh等,2021)。到目前为止,已经提出了三种主要策略将CRISPR-CAS系统输送到植物细胞中。1)使用工程化的农杆菌,可以轻松克服植物细胞壁。然而,该策略采用外源质粒DNA,这些DNA含有农杆菌的DNA部分,在转化后,该策略在细胞DNA中积分为细胞DNA。对于木本植物,外源性DNA只能通过杂交去除,从而导致遗传背景的变化。成功地应用于包括木本植物在内的许多农作物的替代方法,包括T-DNA的分子切除(Dalla Costa等,2020),几乎完全去除外源性DNA。但是,剩余的最小残留外国DNA可能与许多国家的当前严格转基因生物法规不相容。2)粒子轰击使用装有生物材料的纳米颗粒子弹来射击植物组织,从而超过了细胞壁垒,并释放了纳米颗粒装载的生物货物以诱导基因组编辑。尽管如此,各种物理参数严重影响了这种方法的效率。,并非所有细胞都会被子弹击中,因此下游再生过程可能会引起嵌合植物。3)替代解决方案是暂时清除细胞壁,有效地将生物材料递送到单个细胞中。根据此策略,细胞壁是酶法消化的,因此提供了一个“裸”植物细胞(即原生质体)由质膜界定。在有利的条件下,可以通过PEG浸润,电穿孔或LiPofection轻松实现RNP的细胞递送。2-3天后,恢复了细胞壁,进一步的细胞划分
Sosteneo于去年由意大利最大的保险集团资产管理部门的Generali Investments以及由Elliott Green Power的前首席执行官Umberto Tamburrino领导的管理团队。
3105 Ellingson,Steven W.(2018)电磁学,第1卷。1。布莱克斯堡,弗吉尼亚州:VT出版。ISBN:9780997920192。 学生免费电子书:https://doi.org/10.21061/electromagnetics-vol-1 cc by-sa 4.0作者提供免费访问本书。 推荐:Fawwz T. Ulaby,Umberto Ravaioli,Applied Electromagnetics的基础,第8版,Pearson。 ISBN:978-0135199008。 注意:此ISBN适用于Pearson Etext访问卡。ISBN:9780997920192。学生免费电子书:https://doi.org/10.21061/electromagnetics-vol-1 cc by-sa 4.0作者提供免费访问本书。推荐:Fawwz T. Ulaby,Umberto Ravaioli,Applied Electromagnetics的基础,第8版,Pearson。ISBN:978-0135199008。 注意:此ISBN适用于Pearson Etext访问卡。ISBN:978-0135199008。注意:此ISBN适用于Pearson Etext访问卡。
3105 Ellingson, Steven W. (2018) Electromagnetics, Vol. 1 . Blacksburg, VA: VT Publishing. ISBN: 9780997920192。免费电子书供学生使用:https://doi.org/10.21061/electromagnetics-vol-1 CC BY-SA 4.0 作者提供免费阅读。推荐:Fawwz T. Ulaby, Umberto Ravaioli, Fundamentals of Applied Electromagnetics , 第 8 版, Pearson。ISBN 978-0135199008。注意:此 ISBN 适用于 Pearson eText 访问卡。
3105 Ellingson, Steven W. (2018) Electromagnetics, Vol. 1 . Blacksburg, VA: VT Publishing. ISBN: 9780997920192. 为学生提供免费电子书:https://doi.org/10.21061/electromagnetics-vol-1 CC BY-SA 4.0 作者提供免费阅读。推荐:Fawwz T. Ulaby, Umberto Ravaioli, Fundamentals of Applied Electromagnetics , 第 8 版, Pearson。ISBN: 978-0135199008。注意:此 ISBN 适用于 Pearson eText 访问卡。
Chairs: Fabio PISCAGLIA, Italy Radu VIDRA, Romania 08:30 - 09:00 Case 1 Umberto Cillo, María Reig, Jens Ricke, Tim Meyer, Anna Saborowski, Giuliana Amaddeo, Gerda Elisabeth Villadsen 09:00 - 09:30 Case 2 Umberto Cillo, María Reig, Jens里克(Ricke),蒂姆·迈耶(Tim Meyer),安娜·萨博洛夫斯基(Anna Saborowski),朱利亚纳(Giuliana)amaddeo,格尔达·伊丽莎白·维拉德森(Gerda Elisabeth Villadsen)09:30-09:40反映了13个Serum-蛋白质签名反映的肝细胞瘤炎症类细胞球瘤在接受医疗治疗的患者中的爆发性肝癌的作用 infiltration in hepatocellular carcinoma treated with liver surgery after selective internal radiation therapy Maria Stella FRANZÈ, Italy 09:50 - 10:00 Subsequent anticancer therapy analysis of the Phase 3 HIMALAYA study of tremelimumab plus durvalumab in unresectable hepatocellular carcinoma Ghassan ABOU-ALFA, United States 10:00 - 10:10 A holistic approach of肝细胞癌的经皮射频消融过程中的系统性肿瘤和非肿瘤活检:诊断,预后和治疗性影响Lorraine Blaise,法国
腹腔疾病中的微囊泡:可能的生物标志物和肠道炎症的玩家。d'Ambrosio A.1,Vincentini O.1,Columba Cabezas S. 1,Zamboni S. 1,Camerini S 1,Casella ML。1,Crescenzi M. 1,Silano M. 1,Cecchetti S. 1,Borghini R. 2,Picarelli A.2,Margutti P. 1 1 Istituto Superiore diSanità。 2 Medicina Interna e Mediche,Policlinico umberto I.腹腔疾病(CED)是一种免疫介导的肠病,是由遗传易感个体(HLA-DQ2/DQ8)触发的免疫介导的肠病。 最近的研究强调了腔外囊泡(外泌体,微囊泡和凋亡体)在炎症性肠病中的可能作用,以及它们可能用作疾病进展和治疗反应的生物标志物。 但是,它们的作用在乳糜泻中仍未探索。2,Margutti P. 1 1 Istituto Superiore diSanità。2 Medicina Interna e Mediche,Policlinico umberto I.腹腔疾病(CED)是一种免疫介导的肠病,是由遗传易感个体(HLA-DQ2/DQ8)触发的免疫介导的肠病。最近的研究强调了腔外囊泡(外泌体,微囊泡和凋亡体)在炎症性肠病中的可能作用,以及它们可能用作疾病进展和治疗反应的生物标志物。但是,它们的作用在乳糜泻中仍未探索。
洛雷托的萨曼莎,亚历山德罗·里奇特利(Alessandro Ricciutelli),塞尔吉奥·蒙特帕雷(Sergio Montelpare)219 219声学压力源对教育环境中对神经介绍者个人Marco Caniato的影响伊拉里亚。 LOMBARDI,GIOVANNI AMADASI,路易吉Guerriero 129 Bejaia(Algeria)吉诺·伊安娜斯(Giniel Saidan)区域剧院的声学校正,Heniel Saidan 131声学改善了Benevento Gino Iannace Opera的声学改进TechPark)建筑绩效模拟:做正确的事情或做正确的事情?Ardeshir Mahdavi -TechnischeUniversitätGraz
1 神经外科,Fondazione Policlinico Universitario A. Gemelli IRCCS,00168 罗马,意大利; giovannipennisi91@gmail.com (GP); benedetta.burattini@gmail.com (BB); giacomo.piaserguerrato@gmail.com (GPG); giuseppemaria.delapepa@policlinicogemelli.it (GMDP); carmelo.sturiale@policlinicogemelli.it (CLS); alessandro.olivi@unicatt.it (AO); quintinogiorgio.dalessandris@policlinicogemelli.it (QGD); nicolamontanomd@yahoo.it (NM) 2 F. Spaziani 医院神经外科,03100 Frosinone,意大利; biagialapira@hotmail.it (BLP); gdandrea2002@yahoo.it (GD) 3 意大利罗马大学 Sapienza 医院人体神经科学系、神经外科分部、罗马大学综合医院、00157 罗马,意大利;pietro.familiari@uniroma1.it 4 英国牛津大学纳菲尔德外科科学系、牛津 OX1 2JD;pierfrancesco.lapolla@nds.ox.ac.uk * 通信地址:placntz@gmail.com † 这些作者对本研究的贡献相同。‡ 这两位作者为高级作者。