本表仅列出其适用国家法律包含有关微生物和其他生物材料保藏规定的主管局。除非本表另有说明,否则,为了专利程序的目的,可向这些主管局的任何已根据《国际承认用于专利程序的微生物保藏布达佩斯条约》获得国际保藏机构地位的保藏机构进行保藏(本附件进一步列出了这些机构,相关通知可在 www.wipo.int/treaties/en/registration/budapest/ 下查阅)。有关《布达佩斯条约》下国际保藏机构要求的更多信息,请访问 www.wipo.int/treaties/en/registration/budapest/guide/
要求保护的发明。例如,参见 Ajinomoto Co. v. Archer-Daniels-Midland Co., 228 F.3d 1338, 1345-46, 56 USPQ2d 1332, 1337-38 (Fed. Cir. 2000),cert. denied, 121 S.Ct. 1957 (2001)(解释保藏如何有助于满足实施要求);Enzo Biochem, Inc. v. Gen-Probe, Inc., 323 F.3d 956, 63 USPQ2d 1609 (Fed. Cir. 2002)(保藏可能满足书面说明要求);In re Argoudelis, 434 F.2d 666, 168 USPQ 99 (CCPA 1970)。为了促进世界各地的专利申请对已保存的生物材料的认可,《关于国际承认用于专利程序的微生物保藏的布达佩斯条约》于 1977 年制定,并于 1981 年开始实施。该条约要求签署国(如美国)承认任何经世界知识产权组织 (WIPO) 批准的保藏机构的微生物保藏。
1. 武汉大学中南医院泌尿外科,武汉 2. 武汉大学中南医院泌尿外科湖北省重点实验室,武汉 3. 武汉大学中南医院放射科,武汉 4. 武汉大学中南医院湖北省人类遗传资源保藏中心生物样本库,武汉 5. 中关村欧拉科技,北京 6. 北京大学生命科学学院定量生物学中心,北京 7. 中国医学科学院武汉传染病肿瘤研究中心,武汉 8. 武汉大学医学研究所,免疫与代谢前沿科学中心,泰康生命与医学科学中心,武汉 9.
本手册是新面貌的 NIES 的第一份年度报告。尽管 NIES 最近从日本政府的一个研究机构转变为一个独立的研究机构,但我们的使命——环境研究——保持不变;此外,我们还增加了一项新活动,即回收研究。然而,该研究所的结构和行政管理已完全重组——NIES 现在有 6 个研究部门、6 个特别优先研究项目、2 个政策响应研究中心和 2 个研究基础研究技术的小组。还包括几个支持部门和全球环境研究中心。该研究所的结构已重组,以快速响应研究、政府和社会的需求。新设施(生物生态工程研究实验室、物质循环和废物管理研究中心和微生物培养物保藏中心)已经建成,为我们先进的研究活动做出了贡献。
在某些分枝杆菌科和麻风分枝杆菌中,结核病的免疫诊断对其在结核病的特异性诊断中的应用造成了限制。因此,为了提高基于 ESAT- 6/CFP 10 的细胞介导免疫 (CMI) 检测的特异性,已将 esx-1 基因座的 RD 1 区域内外基因编码的其他蛋白质评估为 CMI 的候选抗原,以及研究与 ESAT-6 和/或 CFP 10 结合的体液反应,结果具有不同的特异性和敏感性。因此,在本研究中,我们评估了 NCBI 数据库中可用的各种非结核分枝杆菌 (NTM)、分枝杆菌、分枝杆菌和分枝杆菌种基因组,以了解 esx-1 基因座 RD1 区域的存在和组成。此外,我们还通过聚合酶链式反应 (PCR) 和测序对我们培养物保藏中的分枝杆菌科细菌进行检测,以确定编码 ESAT-6 和 CFP 10 的 esxA 和 esxB 基因的存在和序列多样性。全基因组序列 (WGS) 数据分析表明,在已发表的 100 多个除结核病以外的致病性和非致病性分枝杆菌科细菌基因组中,有 70 个存在 RD 1 基因直系同源物。在我们培养物保藏中评估的物种中,除了之前报道的某些分枝杆菌中存在 esxA 和 esxB 之外,还发现败血性分枝杆菌/分枝杆菌、猪分枝杆菌和分枝杆菌属 N845T 也含有这两个基因的直系同源物。仅在 Mycobacterium brasiliensis 、 Mycolicibacterium elephantis 和 Mycolicibacterium fluroantheinivorans 中检测到 esxA 的直系同源物,而在 Mycolicibacter engbackii 、 Mycolicibacterium mageritense 和 Mycobacterium paraffinicum 中仅检测到 esxB 直系同源物。基于 esxA 和 esxB 序列的系统发育分析将缓慢生长的细菌与快速生长的细菌区分开来。这些发现强化了先前的观点,即 esxA 和 esxB 可能在大多数分枝杆菌科中编码。Esx-1 系统在致病性和非致病性分枝杆菌科中的作用需要进一步研究,因为这些物种可能会限制结核病的免疫学检测。
1. Wickerham, J. Tropical Med. Hyg., 42, 176 (1939) 2. Williams, (Ed.),2005,《官方分析化学家协会官方分析方法》,第 19 版,AOAC,华盛顿特区 3. 微生物类型培养物保藏中心和基因库 (MTCC) 微生物技术研究所,昌迪加尔。 4. Isenberg, HD 《临床微生物学程序手册》第 2 版。 5. Jorgensen, JH、Pfaller, MA、Carroll, KC、Funke, G.、Landry, ML、Richter, SS 和 Warnock., DW (2015) 《临床微生物学手册》,第 11 版。 1. 6. 美国公共卫生协会,《乳制品检验标准方法》,1978 年,第 14 版,华盛顿特区 7. Salfinger Y. 和 Tortorello ML,第五版(编辑),2015 年,《食品微生物检验方法概要》,美国公共卫生协会,华盛顿特区 8. Wehr HM 和 Frank JH,2004 年,《乳制品微生物检验标准方法》,第 17 版,APHA Inc.,华盛顿特区
突变或遗传工程,及其涉及的 DNA 或 RNA, 载体 ( 如质粒 ) 或其分理、制备 或纯化;所使用的宿主 Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engi- neering, vectors, e. g. plasmids, or their isolation, preparation or purifica- tion; Use of hosts therefor 酶;酶原;其组合物、制备、活化、抑制、分离或纯化酶的方法 Enzymes, e. g. ligases; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating, or purifying enzymes 微生物本身,如原生动物;及其组合物;繁殖、维持或保藏微生物或其组 合物的方法;制备或分离含有一种微生物的组合物的方法;及其培养基 Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propa- gating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorgan- ism; Culture media therefor 具有多于 20 个氨基酸的肽;促胃液素;生长激素释放抑制因子;促黑激 素;其衍生物 Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Mela- notropins; Derivatives thereof 饲养或养殖其他类不包含的动物;动物新品种 Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New breeds of animals 包含酶、核酸或微生物的测定或检验方法;其组合物;这种组合物的测定方法 Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microor- ganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
植物皂苷(PMS)购自成都慕斯特生物技术有限公司(四川,中国),纯度≥98%。A549、95D、SPC-A1、H460和H292细胞购自美国典型培养物保藏中心(ATCC;美国弗吉尼亚州马纳萨斯)。RPMI-1640培养基购自HyClone公司(Cat#SH30809.01;美国犹他州洛根)。胎牛血清(ATCC 30-2020)购自赛默飞世尔科技公司(美国马萨诸塞州)。二甲基亚砜(DMSO)、1-溴-3-氯丙烷、异丙醇、乙醇、顺铂(DDP)和其他溶剂购自Sigma公司(美国密苏里州圣路易斯)。细胞计数试剂盒-8 (CCK-8)、0.25%胰蛋白酶、0.01 M PBS (粉末,pH7.2~7.4)、1%多聚甲醛、线粒体膜电位测定试剂盒(含JC-1)和100×青霉素-链霉素溶液均购自北京索莱宝科技有限公司(北京,中国)。B27、表皮生长因子 (EGF) 和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF) 均购自 Invitrogen 公司(CA,美国)。一抗,包括抗 Caspas-3 (Cat#ab13847)、抗 Caspas-9 (Cat#ab32539)、抗 SOX2 (Cat#ab93689)、抗 CD44 (Cat#ab216647)、抗
缩写:α-SMA,α-平滑肌肌动蛋白;ALP,碱性磷酸酶;ALT,丙氨酸氨基转移酶;ASBT,顶端钠依赖性胆汁酸转运蛋白;ASBTi,ASBT 抑制剂;ATCC,美国典型培养物保藏中心;AUC inf,从给药时间到最后可测量浓度的 AUC 并外推至无穷大;BAs,胆汁酸;BDL,胆管结扎;C4,7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮;CA,胆酸;CDCA,鹅去氧胆酸;CK7,细胞角蛋白-7;CMC,羧甲基纤维素;Cyp7a1,细胞色素 P450 家族 7 亚家族 A 成员 1;d,天;DCA,脱氧胆酸;DEGs,差异表达基因;GCDCA,甘氨鹅去氧胆酸; GO,基因本体;H&E,苏木精-伊红;IC50,半数最大抑制浓度;LCA,石胆酸;LC-MS/MS,液相色谱串联质谱法;MCA,鼠胆酸;MCP-1,单核细胞趋化蛋白-1;MDR3,多药耐药蛋白3;基质金属蛋白酶7 (MMP-7),基质金属蛋白酶7;NRC,正常大鼠胆管细胞;NTCP,Na+-牛磺胆酸共转运多肽;OST α /OST β,有机溶质转运蛋白α/β;QWBA,定量全身放射自显影;RNAseq,RNA测序;RT-qPCR,定量实时PCR;SAD,单次递增剂量;t 1/2,终末半衰期;UDCA,熊去氧胆酸;WT,野生型。
缩写:α-SMA,α-平滑肌肌动蛋白;ALP,碱性磷酸酶;ALT,丙氨酸氨基转移酶;ASBT,顶端钠依赖性胆汁酸转运蛋白;ASBTi,ASBT 抑制剂;ATCC,美国典型培养物保藏中心;AUC inf,从给药时间到最后可测量浓度的 AUC 并外推至无穷大;BAs,胆汁酸;BDL,胆管结扎;C4,7α-羟基-4-胆甾烯-3-酮;CA,胆酸;CDCA,鹅去氧胆酸;CK7,细胞角蛋白-7;CMC,羧甲基纤维素;Cyp7a1,细胞色素 P450 家族 7 亚家族 A 成员 1;d,天;DCA,脱氧胆酸;DEGs,差异表达基因;GCDCA,甘氨鹅去氧胆酸; GO,基因本体;H&E,苏木精-伊红;IC50,半数最大抑制浓度;LCA,石胆酸;LC-MS/MS,液相色谱串联质谱法;MCA,鼠胆酸;MCP-1,单核细胞趋化蛋白-1;MDR3,多药耐药蛋白3;基质金属蛋白酶7 (MMP-7),基质金属蛋白酶7;NRC,正常大鼠胆管细胞;NTCP,Na+-牛磺胆酸共转运多肽;OST α /OST β,有机溶质转运蛋白α/β;QWBA,定量全身放射自显影;RNAseq,RNA测序;RT-qPCR,定量实时PCR;SAD,单次递增剂量;t 1/2,终末半衰期;UDCA,熊去氧胆酸;WT,野生型。