摘要:在生命的三个领域中,同源重组(HR)的过程在修复双链DNA断裂和重新开始停滞的复制叉中起着核心作用。奇怪的是,参与人力资源过程的主要蛋白质参与者似乎对于高素化的古细菌提出了有关人力资源在极端条件下的古细菌中的复制和修复策略中的作用的有趣问题。该过程的一个关键参与者是重组酶RADA,它允许同源链搜索,并提供了遵循DNA合成并恢复遗传信息所需的DNA底物。DNA聚合酶在古细菌中尚不清楚链交换步骤后的操作。使用Abyssi Abyssi蛋白的工作,在这里我们表明,DNA聚合酶,家庭-B聚合酶(POLB)和家族-D聚合酶(POLD)都可以负责处理RADA介导的重组中间体。我们的结果还表明,与POLB相比,POLD的效果要少得多,以扩展位移环(D-Loop)底物处的入侵DNA。这些观察结果与先前对热圆菌物种获得的遗传分析相吻合,表明POLB主要参与DNA修复,而不是必不可少的,这可能是因为Pold可以接管其他伴侣。
三维染色体 - 某些组织和基因组过程(例如复制和转录)之间的相互作用需要在体内研究染色体动力学。荧光或元素染料通常用于体内染色体标记。这些染料与DNA的结合方式导致其失真,伸长和部分放松。结构变化会诱导DNA损伤并干扰染色质相关蛋白的结合动力学,从而扰动基因表达,基因组复制和细胞周期过程。我们开发了一种微型扰动的,遗传编码的荧光DNA标记,该标记由(可拍摄的)荧光蛋白融合到H-NS的DNA结合结构域 - 一种细菌核苷相关蛋白。我们表明,该DNA标记缩写为Hi-度(基于H-NS的核酸染色指标),在培养中的Eu-Karyotion细胞中的染色体是最小的,在培养物中的染色体和标记ZebrafifeS胚胎中,在Zebrafif的胚胎中,在Zebrafif的胚胎中具有优先结合到富含富富酸性的熟食中。
