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请引用本文：Toda and Okamoto，（2020）。通过将大分子直接递送到水稻卵细胞中的基因表达和基因组编辑系统
请引用本文：Toda and Okamoto，（2020）。通过将大分子直接递送到水稻卵细胞和受精卵中的基因表达和基因组编辑系统，Bio-protocol 10 (14): e3681。DOI：10.21769/BioProtoc.3681。
使用同时替莫唑胺和颅内MGMT修饰？D T细胞进行高级神经胶质瘤的产卵细胞疗法，遵循标准的分离后化学疗法和放疗：当前的策略和未来方向
细胞疗法，包括嵌合抗原受体T细胞疗法（CAR-T），虽然通常在血液学恶性肿瘤中成功成功，但面临着针对实体瘤的实质性挑战，例如胶质母细胞瘤（GBM），由于快速生长，抗原异质性，抗原异质性，并且由于对细胞质量和免疫的反应不足，以前显示了GB的响应，我们以前曾表现过GB，我们以前曾经表现出GB，我们以前曾经表现出GB，我们曾经表现出GB，我们曾经表现出GB的响应。由伽马三角洲（GD）T细胞识别的配体（NKG2DL），这是一种次要淋巴细胞亚群，通过GD T细胞受体（TCR），NKG2D和多种机制，天生识别靶分子。鉴于NKG2DL表达在GBM细胞上通常不足以引起对GD T细胞免疫疗法的有意义反应，然后我们证明，使用诸如替莫唑胺（TMZ）的烷基化剂的DNA损伤反应（DDR）途径的激活可以通过激活DNA损伤反应（DDR）途径来暂时上调NKG2DL表达。tmz也对GD T细胞有毒。使用p140k/mgmt lentivector，通过表达O（6） - 甲基瓜氨酸-DNA-DNA-甲基转移酶（MGMT）来赋予对TMZ的耐药性，我们进行了基因工程的GD T细胞，这些GD T细胞可在TMZ治疗剂量的存在下保持全部效应。然后，我们验证了一种治疗系统，该系统称我们称其为耐药性免疫疗法（DRI），该系统将TMZ的标准方案与同时在最初的I-Human Spearial I临床试验中同时抗TMZ内输注TMZ耐TMZ的GD T细胞（NCT04165941）。本手稿将讨论DRI作为新诊断的GBM的合理治疗方法，并且在具有稳定的最小残留疾病的患者中，重复给予DRI与现有标准的Stupp方案相结合的重要性。
N-甲基-N-亚硝脲诱变受精卵细胞引起的水稻突变体文库成员的全基因组测序
摘要 尽管靶向基因组编辑技术已成为加速功能基因组学的有力反向遗传方法，但由化学诱变剂诱导的传统突变体文库对于植物研究仍然很有价值。含有化学诱导突变的植物是简单而有效的遗传工具，可以在不考虑生物安全问题的情况下种植。突变体个体的全基因组测序减少了突变体筛选所需的工作量，从而提高了它们的实用性。在本研究中，我们对由用 N-甲基-N-亚硝脲 (MNU) 处理单个受精卵细胞而获得的 Oryza sativa cv. Nipponbare 突变体文库成员进行了测序。通过对该突变体文库中的 266 株 M 1 植物进行全基因组测序，我们总共鉴定出 66 万个诱导点突变。这个结果代表了 373 Mb 组装水稻基因组中每 146 kb 基因组序列中有一个突变。这些点突变均匀分布于整个水稻基因组中，超过 70,000 个点突变位于编码序列内。尽管该突变体文库规模较小，但近 61% 的所有注释水稻基因中均发现了非同义突变，8.6%（3248 个基因）的点突变对基因功能有较大影响，例如获得终止密码子或丢失起始密码子。WGS 表明使用水稻受精卵细胞的 MNU 诱变可有效诱导突变，适用于构建用于计算机突变体筛选系统的突变体文库。扩展该突变体文库及其数据库将提供一种有用的计算机筛选工具，以促进功能基因组学研究，特别是针对水稻。关键词：水稻突变体文库、N-甲基-N-亚硝脲 (MNU)、单核苷酸变体 (SNV)、NGS、计算机 TILLING、水稻、全基因组测序、遗传资源