订单号 51028130 51028131 51028132 型号 IGS60 IGS100 IGS180 对流技术 重力对流 重力对流 重力对流 温度范围 (°C) 环境温度 +5 °C 至 75 °C 环境温度 +5 °C 至 75 °C 环境温度 +5 °C 至 75 °C 37°C 时的空间温度偏差 ± 0.6 °C ± 0.6 °C ± 0.6 °C 37°C 时随时间的温度偏差 ± 0.2 °C ± 0.2 °C ± 0.2 °C 占地面积 (m2 / sqft) 0.3 / 3.2 0.36 / 3.9 0.47 / 5.1 腔体容积 (L / cuft) 75 / 2.6 117 / 4.0 194 / 6.85 内部尺寸 (mm / 英寸(宽 x 高 x 深))
直接加热灭菌循环 – 140°C 下 120 分钟 – 确保消除每个培养箱表面的所有微生物和真菌孢子 (ANSI/AAMI/ISO 11134)。此声明已通过针对干热过程校准的枯草芽孢杆菌孢子悬浮液得到验证,因为这些孢子对干热灭菌具有最强的抵抗力,因此是推荐的指示生物(美国药典,第 1035 章)。在 140°C 下 120 分钟的灭菌循环后,施加到培养箱不同表面的所有孢子 – 腔壁(不锈钢)、门(玻璃)和门垫圈(钢化硅胶)都已可靠地消除。
DHD 自动流气套式自动 CO 2 培养箱型号:NU-5510/E 操作和维护手册 1.0 一般说明 NuAire DHD 自动流气套式自动 CO 2 培养箱旨在提供可靠受控的体外环境,以实现最佳组织细胞培养生长。该培养箱还提供了在接近体温的温度下储存和保存胚胎、配子和动物组织细胞培养物的环境。有五个参数有助于实现最佳生长条件。这些是: 1.湿度 2.精确的温度控制 3.精确的 CO 2 控制 4.无菌性 5.可靠性 与所有 NuAire 设备一样,该孵化器的设计旨在提供最高质量的性能标准,并配备匹配的计算机技术、精确的温度控制和 CO 2 气体控制系统,将最先进的技术与多年的设计、质量和制造经验相结合。为了实现上述目标,该孵化器具有以下特点: 1.1 孵化器室 DHD Autoflow 内室的设计和尺寸提供了大容量和易用性。培养箱壁由安装在培养箱侧面、底部、顶部和背面的物理箔加热元件直接加热,温度均匀性达到 +0.3 C。具有高“R”等级的太空时代高密度绝缘材料覆盖了培养箱内腔的整个外表面。1.2 培养箱鼓风机和 HEPA 过滤器 连续运转的风扇电机驱动上部空气室和侧壁管道系统内的鼓风机叶轮。空气在培养箱内不断循环,使每立方英寸的体积保持均匀的温度。这种气流分布均匀,速度非常低,不会影响培养物的生长。大型可更换 HEPA 滤芯不断过滤在培养箱内循环的空气。1.3 孵化器控制电子设备 NuAire 孵化器控制电子设备是一种先进的微计算机控制系统,专门设计用于满足培养室环境的精确控制要求,为培养物生长提供最佳的可编程条件。微计算机具有状态指示器、控制参数的 LED 显示屏和五个触摸控制键盘,方便操作员高效输入数据。EEPROM 可在断电或断电期间无限期存储这些值(电源容错)。微型计算机配有只读存储器 (ROM),其中包含可执行软件、随机存取存储器 (RAM) 用于临时存储,以及电子可擦除可编程只读存储器 (EEPROM) 用于控制设定点和参数。微型计算机包含一个完整的内部诊断软件包,允许对故障组件进行故障隔离检测。
直接加热灭菌循环 – 140°C 下 120 分钟 – 确保消除每个培养箱表面的所有微生物和真菌孢子 (ANSI/AAMI/ISO 11134)。此声明已通过针对干热过程校准的枯草芽孢杆菌孢子悬浮液得到验证,因为这些孢子对干热灭菌的抵抗力最强,因此是推荐的指示生物 (美国药典,ch.1035)。施加到培养箱不同表面的所有孢子 – 腔壁 (不锈钢)、门 (玻璃) 和门垫圈 (钢化硅胶),在 140°C 下 120 分钟的灭菌循环后已被可靠地消除。
1. 常见微生物实验室仪器的介绍、操作、注意事项和使用:(生物安全柜、高压灭菌器、培养箱、BOD 培养箱、热风炉、光学显微镜)。2. 不同培养基的制备和接种技术——营养琼脂、营养肉汤、麦康凯琼脂、EMB 琼脂、萨巴拉德氯霉素琼脂、YEPD 琼脂、BG-11。3. 在空气、土壤和水中取样并计数活体微生物。4. 通过划线法、涂布法、倾注平板法分离细菌纯培养物。5. 染色技术-[单染色、革兰氏染色、抗酸染色、荚膜染色、内孢子染色、负染色、真菌染色] 6. 用悬滴法观察细菌的运动性。7. 显微测量-千分尺(目镜和载物台)。
d. 将培养板放入 37 C 培养箱中并孵育 10 分钟。每 3-4 分钟轻轻摇晃培养板一次有助于完全分离细胞。 e. 加入 1 mL 含有 10 m M Y-27632 的 StemFit 培养基,并轻轻吹打细胞直至 iPSC 完全分离。 f. 计数细胞,并将 1.0 3 10 4 –1.5 3 10 4 个细胞接种到 iMatrix 涂层的 6 孔板中,该板含有 2 mL 含有 10 m M Y-27632 的 StemFit 培养基,如步骤 cg 中所述,将细胞在 37 C 的 CO 2 培养箱中孵育过夜。 h. 第二天,用 2 mL StemFit 培养基更换培养基。如果有很多死细胞漂浮,继续向培养基中添加 Y-27632,最终浓度为 10 m M。 i.培养期间每 2 天更换一次培养基。j. iPSC 在第 6-8 天将达到半汇合状态。切勿让它们过度汇合。“半汇合”是指 iPSC 菌落直径小于 2 毫米,并且 iPSC 菌落之间仍有一些间隙。生长速度取决于 iPSC 系,因此应通过实验确定半汇合时间。
1. DNA 测序仪和分析仪(3500 基因分析仪)- Applied Bio systems,型号:622-0010 2. 实时聚合酶链式反应机 - Applied Bio systems,型号:Step 1+ 实时 PCR 系统 3. 固体 4 分析仪 - Applied Bio-systems 4. 梯度热循环仪 (PCR) - Bio-Rad,型号:C 1000 5. ELISA 板读数仪(i MARK 微孔板读数仪)- Bio-Rad 6. 凝胶文档系统 - Bio-Rad 7. 快速蛋白质液相色谱纯化 (FPLC) 系统 Akta 纯化器 - GE BOX 900 8. UV-VIS 分光光度计 – Shimadzu,型号:UV-2450 9. 三目倒置显微镜 – Nikon,型号:ELWD0.3/OD 75 10. 台式冷冻离心机 - Thermo Scientific 11. 落地式冷冻离心机 - Beckman coulter 12. 二氧化碳培养箱 - New Brunswick 13. 垂直 -85˚C 深度冷冻机 - New Brunswick 14. 离心机 - Eppendorf,型号:5810 R 15. 寡核苷酸合成仪 Polyplex - Dig lab,型号:PPX019 16. BOD 培养箱 - IKON Instruments 17. 冷冻机(垂直 -20°C)- Vestfrost 18. 冷冻机(垂直 4°C) 19. 卧式冷冻机(2 个) 20. 冷冻机(垂直) 21. 水浴
项目 位置 Olympus 荧光显微镜 201B Biorad Biologic 紫外可见光检测器/馏分收集器 301D Biotek elx 800 微孔板读数仪 301D Thermo Sorvall legend X1R 冷冻离心机 301E Perkin elmer microbeta 2450 微孔板计数器 301D Thermos evolution 220 紫外可见光分光光度计 301D Sonics vibracell 301E 精密微处理器控制 280 水浴 (2) 301 & 301E ThermoSci Max Q6000 培养箱/振荡器 (2) 301 Isotemp 228 水浴 301 ThermoSci Heratherm 烤箱 301 Zeiss invertoskop 40c 显微镜 301 Beckman coulter optima L80k 超速离心机 301 Panasonic 高压灭菌器201、217、301、317 Eppendorf 5417R 离心机 301 Beckman 库尔特 Avanti J25 高速离心机(2) 301 & 217 Barnstead 实验室系列 MaxQ7000 水浴(2) 201 & 301 Beckman OptimaMax 台式超速离心机 301 组织培养生物安全柜 201C&D、301& 301H、317G Heracell 150 培养箱 201C&D、301& 301H、317G 缺氧室 CoyLab(Prentice 博士负责) 201D GE Nanovue 分光光度计 201G 3D 打印机 201H Eppendorf 真空泵 & Heto 冷阱 201 Beckman 库尔特 allegra离心机 317 Inotech 细胞采集器 301D New brunswick C76 水浴振荡器 217 New Brunswick Series 25 落地式振荡器(陆博士负责) 317 Thermo Stericycle 培养箱(2 台) 317G Beckman coulter optima L90k 超速离心机 217 Olympus BX41 显微镜 217F Eppendorf Centra CL5 离心机 217 Eppendorf mastercycler 热循环仪 217 Ultrospec 500 pro 分光光度计 217E BMG Labtech Polarstar omega 217D BioRad gene pulser x cell 317E Spectramax m5 217F Thermo Legend 21R Microfuge 301E Sorvall ST16 离心机 301H
图 S1. 皮升级孵化器阵列的制作方案。孵化器图案由 2D CAD 软件(DraftSight,法国 Dassault Systèmes SE)设计。孵化器的设计直径为 30 µm。首先将光刻胶(ZPN 1150-90,日本 Zeon 公司)以 2500 rpm 的转速旋涂在玻璃基板上 30 秒。然后,使用标准光刻工艺对光刻胶膜进行图案化。光刻胶膜的图案化残留物(高度约为 10 µm 的微柱)被用作孵化器阵列的模板。接下来,采用旋涂技术(旋转速度:4000 rpm)将氟惰性溶剂(CT-solv.180,AGC Inc.,日本)中的非晶态氟聚合物(Cytop CTX-809SP2,AGC Inc.,日本)沉积在模板上。之后,在涂有氟聚合物的基板上沉积 PDMS 薄膜。薄膜结构有助于抑制基板因内部应力而表现出的自弯曲现象。这意味着通过采用薄膜结构可以保持 PDMS 培养箱阵列和玻璃皿之间的界面粘附力。在这方面,我们采用旋涂沉积工艺来制备基于 PDMS 的培养箱阵列。将含有固化剂的 PDMS(Sylgard 184,陶氏化学公司,美国)的低聚物溶液旋涂在模板上并固化。 PDMS 膜的最终厚度约为 20 µm。然后,将完成的 PDMS 膜从模板上剥离。使用 LEXT OLS4100 激光扫描显微镜(日本奥林巴斯)确认 PDMS 膜的图案。