EBV 病毒 (EBV) 感染了全球 90% 以上的人类,并通过在潜伏感染和裂解感染之间切换在宿主体内建立终身感染。EBV 潜伏期可在适当条件下重新激活,导致病毒裂解基因表达并产生感染性子代病毒。EBV 重新激活涉及各种因子和信号通路之间的串扰,随后复杂的病毒-宿主相互作用决定了 EBV 是否继续传播。然而,这些过程背后的详细机制仍不清楚。在这篇综述中,我们总结了调节 EBV 重新激活的关键因素及其相关机制。这包括立即早期 (IE) 基因的转录和转录后调控、病毒因子对病毒 DNA 复制和子代病毒产生的功能、病毒蛋白破坏和抑制宿主先天免疫反应的机制以及调节 EBV 重新激活的宿主因素。最后,我们探讨了新技术在研究 EBV 再激活中的潜在应用,为研究 EBV 再激活机制和开发抗 EBV 治疗策略提供了新的见解。
摘要:(1)背景:马α疱疹病毒-1(EHV-1)是一种在全球大多数马群中流行的高度传染性病毒病原体。CRISPR/Cas9 等基因组编辑技术已成为精准 RNA 引导基因组修饰的有力工具;(2)方法:设计了单向导 RNA(sgRNA)以靶向三个必需基因(ORF30、ORF31 和 ORF7)和一个非必需基因(ORF74),并确定其对体外病毒复制动力学的影响;(3)结果:我们证明靶向必需溶解基因的 sgRNA 降低了 EHV-1 复制,而靶向 ORF74 的 sgRNA 的影响可忽略不计。靶向 ORF30 的 sgRNA 对抑制 EHV-1 复制表现出最强的效果,病毒基因组拷贝数和传染性子代病毒产量均有所减少。下一代测序鉴定出选择性sgRNA特定切割位点缺失的变异体,并评估了不同sgRNA之间的组合,发现靶向ORF30和ORF7的sgRNA双重组合与使用单个sgRNA相比,能显著抑制病毒复制至较低水平,表明存在协同效应;(4)结论:数据表明sgRNA引导的CRISPR/Cas9可用于体外抑制EHV-1复制,表明这种可编程技术可用于开发一种新颖、安全、有效的EHV-1治疗和预防方法。