转染的 Bge 细胞以评估 Cas9 的表达(图 1b)。使用两对引物进行 PCR,以对照或 pCas-BgAIFx4 转染的 Bge 细胞的 cDNA 作为模板,一对引物针对 Cas9,另一对针对 BgActin,后者是 B. glabrata 的肌动蛋白基因,用作参考基因(图 1b、c)。转染后 24 小时检测到瞬时 pCas-BgAIFx4 转染的 Bge 细胞中编码 Cas9 的转录本,并在测定的 9 天内保持表达。在 pCas-BgAIFx4 转染的细胞中观察到 Cas9 mRNA(277 bp)的特异性扩增子,但在未转染的细胞中没有观察到(图 1c)。我们的研究结果支持了先前的研究结果,即揭示了 Bge 细胞中由荧光素酶驱动的 CMV 启动子 [60]。对照参考 BgActin 的表达在 214