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配方条件对脂质纳米颗粒特性和 CRISPR RNP 基因敲除和校正功能传递的影响
摘要：CRISPR-Cas9 系统是一种新兴的治疗工具，具有纠正多种遗传疾病的潜力。然而，对于基因治疗应用，需要一种有效的运载工具，能够将 CRISPR-Cas9 成分运送到目标细胞群的细胞溶胶中。在本研究中，我们优化了脂质纳米颗粒 (LNP) 的配方条件，以运送现成的 CRISPR-Cas9 核糖核酸蛋白 (RNP)。复合过程中的缓冲液组成和相对 DOTAP 浓度因 LNP 封装内部生产的 Cas9 RNP 或 Cas9 RNP 与用于基因校正的额外模板 DNA 而不同。通过不对称流场流分馏 (AF4) 对 LNP 的尺寸、表面电荷和等离子体相互作用进行了表征。在荧光报告细胞系上对粒子进行了功能筛选，以进行基因敲除和基因校正。这揭示了 RNP 与柠檬酸盐缓冲液和 PBS 的不相容性。我们证明了用于基因敲除的 LNP 不一定需要 DOTAP，而用于基因校正的 LNP 仅在低浓度的 DOTAP 下才有效。AF4 研究还表明 LNP 与血浆相互作用，但保持稳定，而 HDR 模板似乎有利于 LNP 的稳定性。在最佳配方条件下，我们在纳摩尔浓度的 CRISPR-Cas9 RNP 下分别实现了高达 80% 和 20% 的基因敲除和基因校正效率。
煤油供给对氮化铝微细电火花加工性能的影响
摘要 随着人们对高性能陶瓷氮化铝 (AlN) 的兴趣迅速增加，许多研究人员研究了对其进行加工的可能性。由于 AlN 被归类为难切削材料，使用辅助电极的电火花加工 (EDM) 工艺正在成为一种有效的加工方法。煤油作为介电流体，在工件表面形成连续的导电碳层以诱导和维持放电方面起着重要作用。大多数以前的方法使用管状电极将介电流体稳定地输送通过其中心孔。然而，在微细电火花加工的情况下，非常小的电极直径使得难以在电极上制造通孔，并且非常窄的间隙会阻止介电流体的流动。为了克服微细电火花加工中介质液流动问题，本研究介绍了两种促进流动的方法：一是采用D形固体电极获得较宽的非对称流道，二是采用O形固体电极加石墨粉混合煤油（GPMK）在相对较宽的放电间隙下流动。流动模拟结果表明两种方法均能促进煤油流动，实验结果也显示出类似的结果。当采用D形截面时，材料去除率增加，但刀具磨损增加。与传统方法相比，对于GPMK，金属去除率提高了64％，相对磨损率降低了73％。通过电压调度，在不牺牲可加工性的前提下，解决了采用O形固体电极GPMK配置进行深孔钻削时出现的精度下降问题。
全绝热压缩空气存储系统具有面向应用的设计轴向流压缩机
中型和长期储能系统有望在朝着由可再生能源提供动力的电网的过渡中起关键作用。ACAE是一种有前途的解决方案，能够分别处理数百个MW和MWH的功率和能量等级。ACAE的一个挑战是在随着空气储存的压力发生变化时，在系统中遇到的条件范围内实现了压缩机中所需的高效操作。在本文中，设计了面向应用程序的轴向流压缩机，旨在在整个操作范围内有效地操作，同时还将性能预测与实用的压缩机几何形状相关联。已经实现了基于Inviscid的两步设计方法，已实现了轴对称流条件，导致流track，叶片行几何形状和压缩机性能图。压缩机模型被整合到ACAES模型中，包括两个压缩线轴，两个具有预热的膨胀阶段，恒定体积的高压存储在5.5至7.7 MPa之间以及两个独立的热量储能单元。现有的ACAE文献要么忽略瞬态外部设计操作或使用通用数值相关性（与特定几何相关），但本文的关键新颖性是将涡轮机械设计详细的设计方法应用于ACAE。最后，建议对其他组件进行类似的审查（即扩展器，热交换器和TES单位），请记住ACAE的独特操作要求。结果表明，设计的压缩机需要在两个线轴上进行33个阶段，并且能够在存储压力范围内有效地操作，这表明，如果将面向应用的设计程序应用于压缩机，则不会阻止ACAES达到70％的圆形效率，从而输出35MW的35MW，以达到约15 h。重要的是，通过减少中冷器的数量来满足在较高温度下保存热量的特定ACAE要求。这项工作是消除普遍误解的重要一步，即可以在典型的ACAE设计中轻松地使用现成的组件。
使用Chacha20
教育协会的机构小组，印度海得拉巴摘要电子邮件通讯在现代社会中起着至关重要的作用，促进了个人和专业互动。但是，确保通过电子邮件交换的敏感信息的安全性和机密性仍然是一个重大问题。此项目使用CHACHA20加密算法介绍了电子邮件过滤器的开发和实施。chacha20是由丹尼尔·J·伯恩斯坦（Daniel J. Bernstein）设计的对称流密封算法。它通常用于加密协议和应用程序，尤其是在确保互联网流量的情况下。它以其速度和安全性而闻名，它是TLS（传输层安全性）协议套件的一部分，以及其他应用程序。chacha20在64个字节块上运行，使用256位的密钥大小。它被认为是非常安全的，并且在各种安全敏感的应用程序中都广泛采用。可能会发生加密之前，需要生成一个加密密钥。对于Chacha20，通常会生成一个安全的随机键。密钥应保密，仅在发件人和预期的接收者之间共享。为了最大程度的安全性，通常将电子邮件中的CHACHA20加密作为端到端加密方案的一部分实现。这意味着电子邮件的内容已在发件人的设备上加密，并且只能由预期的收件人解密，而没有中介（包括电子邮件服务提供商）可以访问明文。但是，有担保的电子邮件信件现在仍然是一个很大的问题，因为数据泄露和网络威胁到一天的上升。总的来说，Chacha20通过加密消息的内容来确保电子邮件通信的机密性，从而保护其免受未经授权的访问或拦截，从而发挥着至关重要的作用。关键字：CHACHA20，加密，解密，电子邮件安全性，端到端口（E2EE），我们所居住的数字时代的身份验证和完整性，电子邮件通信对生活的个人和业务领域至关重要。chacha20：一种新的加密算法，同时安全有效，非常适合提高电子邮件的机密性。这种选择使用CHACHA20进行电子邮件加密的选择是因为Chacha20确保通过不安全渠道发送数据的用户的内容隐私不会受到损害，并且以可靠有效的方式保持安全。在许多健康和癌性皮肤的例子的程序中，这些程序可以学会识别