N. Takeda、Takafumi Hiramoto、Satoshi Tasaka、Hisato Hirano、Takeshi Tokuyama、Hideki Uosaki、Soh Ishiguro、Madina Kagieva、Hiroyuki Yamano、Yuki Ozaki、Daisuke Motooka、Hideto Mori、Yuhei Kirita、Yoshiaki Kise、Yuzuru Itoh、Satoaki Matoba、Hiroyuki Aburatani、Nozomu Yachie、Tautvydas Karvelis、Virginijus Siksnys、Tsukasa Ohmori**、Atsushi Hoshino** 和 Osamu Nureki** (*第一作者,**通讯作者) 〈DOI〉10.1016/j.cell.2023.08.031 〈 URL 〉https://doi.org/10.1016/j.cell.2023.08.031
44* 规格绝缘材料由 Raychem 公司专门制造,是其标准 44 规格(辐射交联聚烯烃/聚偏氟乙烯)绝缘材料的改良版,其中聚烯烃和聚偏氟乙烯基础材料均经过重新配制,以提高其同时承受超高真空、高温和电离辐射的能力。Novathene 绝缘材料是一种复合材料,其添加剂由 Raychem 专门合成,用于太空。Rayolin-N* 绝缘材料由 Raychem 专门制造,是其标准 Rayolin-N(辐射、改性、聚烯烃)绝缘材料的改良版,其中阻燃剂
c1 抑制剂活性 7 天 冷纤维蛋白原(定性试验) 7 天 因子 II 活性 7 天 因子 V 活性 7 天 因子 VII 活性 7 天 因子 VIII 活性 1 天 因子 IX 活性 7 天 因子 X 活性 7 天 因子 XI 活性 7 天 因子 XII 活性 7 天 因子 XIII 活性 7 天 前激肽释放酶活性)3 个月 高分子量激肽原 (HMWK) 活性 3 个月 因子 VIII 活性(显色法) 14 天 因子 IX 活性(显色法)3 个月 因子 VIII 抑制剂(Bethesda Nijmegen 改良版)2 天 因子 IX 抑制剂(Bethesda Nijmegen 改良版)2 天 D-二聚体(定量试验)1 天 纤溶酶原活性 3 个月 α2-抗纤溶酶活性 3 个月PAI-1 3个月 抗凝血酶活性 1天 蛋白C活性(显色法) 1天 抗活化蛋白C 7天 游离蛋白S 水平 1天 总蛋白S 浓度 3个月 总蛋白S 活性 3个月 蛋白C 活性(显色法)抗凝血酶活性(遇凝血酶)3天
此类疫苗含有与导致 COVID-19 的病毒不同的改良版病毒。改良病毒的外壳内含有导致 COVID-19 的病毒的物质。这被称为“病毒载体”。一旦病毒载体进入我们的细胞,遗传物质就会向细胞发出指令,制造一种 COVID-19 病毒独有的蛋白质。使用这些指令,我们的细胞会复制该蛋白质。这会促使我们的身体生成 T 淋巴细胞和 B 淋巴细胞,如果我们将来被感染,它们会记住如何对抗该病毒。
周六,在 Shea 体育馆举行的改良版陆军战斗体能测试和团队建设活动中,莱昂纳德伍德堡第 2 营第 10 步兵团的训练军士和干部帮助伍德小学四五年级学生表演担架抬举。这些学生均就读于学校的健身俱乐部,他们有机会尝试短跑拖拽抬举、投球和壶铃深蹲等项目,然后分成小组,使用担架和绷带进行模拟救生程序。活动期间的更多照片可在莱昂纳德伍德堡 Flickr 页面上找到。
病毒载体是将货物 DNA 运送到目标细胞的有效机制,人们已经投入了大量资源来开发和制造用于基因治疗和疫苗应用的病毒载体。近年来,已经开发了几种用于对抗埃博拉病毒的病毒载体疫苗,包括 Zabdeno®、ERVEBO® 和 Mvabea®。病毒载体对疫苗特别有用,因为它们可以在不需要佐剂的情况下诱导对外来或病毒感染细胞的强烈免疫反应。腺病毒的改良版本是疫苗中最常用的病毒载体,但改良的麻疹和痘苗病毒也已用于疫苗。随着抗击 COVID-19 的病毒载体疫苗的成功开发,全球对此类产品的需求预计将增长。
图表列表 图 1.1:限制性酶的发现时间表及一般历史里程碑……………………………………………………………………………………………………… 2 图 1.2:中心法则图…………………………………………………………………… 4 图 1.3:不同类型的限制性酶;ZFN 和 TALEN 序列特异性分别与特定三联体或有限特定 bp 序列有关。粉红色高亮表示所示限制性酶或内切酶的结合位点。粗线表示切割位点………………………………………………………… 5 图 1.4:CRISPR-Cas9 系统的功能组件(Bortesi, L. 和 Fischer, R.,2014 年)。面板 (a) 显示了 Cas9 正常发挥功能所必需的各个 RNA 组件。图 (b) 显示 RNA 成分连接在一起形成 sgRNA 序列。……………………………………………………………………...… 8 图 3.1:设计引物的 Lambda DNA 凝胶电泳(目标大小 1000bp)。孔 1 显示大小标准(以“M 表示),孔 2 和 3 显示成功 PCR …………………………………………………………………………………..... 20 图 3.2:基于 Origene 的 CRISPR-Cas9 方案的凝胶电泳。含有梯状物的孔标记为“L”。含有未切割的 PCR 产物储备孔标记为“P”。标签 2/3、1X 和 4X 表示反应中使用的 DNA 浓度。标准浓度为 1X。孔 2-4、6-8、10-12、14-16、18 和 19 显示 CRISPR/Cas9 反应产物 .……………………………….…….….… 21 图 3.3:基于 Origene 的改良版 CRISPR-Cas9 方案的凝胶电泳图,其中模板 DNA 浓度和 Cas9 试剂浓度均增加。含有梯度的孔标记为“L”。含有未切割的 PCR 产物原料孔标记为“P”。孔 3-6、7、8、10-13、14 和 15 含有 CRISPR/Cas9 反应产物。所有反应均含有 10uL 模板 DNA .…………………………………………………..……………………..……...…. 22 图 3.4:基于 IDT 的改良版 CRISPR-Cas9 方案的凝胶电泳图。含有梯状物的孔标有“L”。含有未切割的 PCR 原液产物的孔标有“P”。孔 2 不含任何产物。孔 3-6、7-10 和 11-14 含有 CRISPR/Cas9 反应产物。所有反应均含有 tracrRNA。孔 11-14 含有 3 倍量(uL)的模板 DNA……… ...
原理和解释 蛋黄酱、类似蛋黄酱的熟淀粉基调料和可倒出的调料是可用的沙拉酱类型。沙拉酱中的微生物来自生产设备的成分和空气。导致沙拉酱变质的微生物群似乎非常有限,由少数乳酸杆菌、酿酒酵母和接合酵母组成。APHA (1) 推荐的改良 MRS 琼脂(乳酸杆菌异型筛选琼脂)用于从沙拉酱中分离和培养乳酸杆菌种(2)。改良 MRS 琼脂是 deMan 等人的 MRS 培养基的改良版(3)。蛋白胨和葡萄糖提供乳酸杆菌生长所必需的氮、碳和其他元素。聚山梨醇酯 80 是一种油酸酯混合物,可提供乳酸杆菌所需的脂肪酸。柠檬酸铵、乙酸钠、2-苯乙醇和环己酰亚胺可抑制革兰氏阴性菌、霉菌和某些革兰氏阳性菌。某些酵母菌也因环己酰亚胺的存在而受到抑制。溴甲酚绿是 pH 指示剂,在酸性条件下,颜色会从绿色变为黄色。
纳米机器人体现了思维系统与纳米尺度具体化的纠缠、复杂和偶然的融合 1 。它们将前几章讨论过的更广泛的人工智能、仿生机器人和纳米技术领域的炒作、希望和不满融入到一个单一的人工制品中,并肩负着彻底改变生物医学和医疗保健的单一总体承诺。通过自主前往难以进入的体内部位,纳米机器人有望对药物进行成像和输送、消灭癌细胞,甚至进行手术切口。这就是 1966 年好莱坞大片《神奇旅程》中预见性地拍摄的纳米机器人的前景,近四十年后,2002 年迈克尔·克莱顿的惊悚片《猎物》将其妖魔化。然而,纳米机器人既不是《神奇旅程》中的乌托邦,外科医生可以缩小到微观尺度,乘坐微型潜艇穿越人体血液,也不是克莱顿笔下寄生纳米机器人群以人类为食的反乌托邦。事实上,一个改良版的乌托邦是可以实现的,即自主纳米机器人(而不是缩小的人类)提供有针对性的治疗,或者至少这是过去三十年来全球为实现这一目标而投入数百万美元的希望(WIPO,2015 年)。同时,人们普遍认为,如果不对人类、生物和数字的这种融合所带来的前所未有的风险进行明确的考虑、描述和缓解,这一承诺就不可能实现。因此,除了纳米机器人对生物医学和医疗保健的前景的炒作和希望之外,我们在此探讨的问题是,将这些人工制品常规化到临床实践中需要什么?
Law360(2022 年 3 月 15 日,美国东部时间下午 5:26)——匹兹堡生物科技公司 PeriphaGen Inc. 达成和解,结束了指控其前实验室合作伙伴 Krystal Biotech Inc. 抄袭其基因治疗技术的诉讼,该交易价值至少 2500 万美元,最高可达 7500 万美元,Krystal 周一宣布。根据宾夕法尼亚州联邦法院的一份文件和 Krystal 的一份新闻稿,两家公司签署了一份具有约束力的条款清单,以解决诉讼中的所有索赔。Krystal 表示,根据该协议,它将支付 2500 万美元并在最终和解协议完成后 10 天内收到“PeriphaGen 的所有生物材料和皮肤资产”。 Krystal 表示,一旦 Krystal 的首款产品获得美国食品药品管理局 (FDA) 批准,该公司将额外支付 1250 万美元,如果累计总销售额达到 1 亿美元、累计总销售额达到 2 亿美元和累计总销售额达到 3 亿美元,则可能再支付三笔 1250 万美元的款项。Krystal Biotech Inc. 董事长兼首席执行官 Krish S. Krishnan 在一份声明中表示:“我们对结果感到满意,在摆脱这种干扰后,我们期待继续利用我们专有的可重复基因治疗平台和相关技术取得运营进展。”PeriphaGen 在 2020 年的一份投诉中表示,它在 2016 年与 Krystal 分享了有关其技术的信息,该技术使用改良版的单纯疱疹 1 病毒将遗传物质传递给患者,以便 Krystal 可以探索潜在的治疗方法。但诉讼称,Krystal 在没有通知 PeriphaGen 的情况下使用并申请了该技术的专利,并在其产品线上筹集了数百万美元的投资。PeriphaGen 指控 Krystal 侵犯了州和联邦法律规定的商业机密、违反合同、不正当竞争、虚假描述原产地和更正发明人身份,以及帮助和教唆 Krystal 高管 Suma Krishnan 和 Krish Krishnan。该公司寻求禁止使用其技术、对 Krystal 已申请专利的技术进行授权,并分享 Krystal 使用该技术筹集的资金。PeriphaGen 表示,它已与 Krystal 的创始人达成了各种“材料转让协议”,以分享其部分信息、不同的病毒以及从 2016 年开始制造更多病毒所需的细胞,以及其他协议,以共享匹兹堡的实验室空间,以便 Krystal 可以探索将基因疗法应用于皮肤病。