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通过外切酶融合改进 FnCas12a 基因组编辑 吴永强 1*、袁其晨 2*、朱玉峰 3、高翔 4、宋家宝 5、尹子如 6 1 河北科技大学基因编辑研究中心,河北石家庄 050018。2 美国莱斯大学化学与生物分子工程系,休斯顿,德克萨斯州 77005,美国。3 河北科技大学科技发展研究所,河北石家庄。4 河北科技大学环境科学与工程学院,河北石家庄 050018。5 河北科技大学生物科学与生物工程系,河北石家庄。 6 河北科技大学期刊出版社,河北石家庄 050018。 * 通讯作者:吴永强(wuyongqiang@hebust.edu.cn),袁其晨(yqc@rice.edu) 摘要 在目前报道的 Cas12a 直系同源物中,新凶手弗朗西斯菌 Cas12a (FnCas12a) 受原型间隔区相邻基序 (PAM) 的限制较少,这有助于靶向以前无法接近的基因组位点。然而,FnCas12a 核酸酶的活性相对较低或无法观察到,限制了其作为理想基因组工程工具的应用。在这里,我们描述了 TEXT(将 EXonuclease T5 与 FnCas12a 连接),这是一种融合策略,可显着提高 FnCas12a 在人类细胞中在三种不同细胞系中的多个基因组位点的敲除效率。 TEXT 在 18nt 至 23nt 不同间隔长度下均表现出比 FnCas12a 更高的插入和缺失效率,其中 18nt 的插入效率最高,比 FnCas12a 高出 11 倍。深度测序表明 TEXT 显著增加了目标位点的缺失频率和大小。总之,TEXT 增强了 FnCas12a 核酸酶的活性,拓展了其在人类细胞基因组工程中的应用。
通过外切酶融合改进 FnCas12a 基因组编辑 吴永强 1*,袁其晨 2*,朱玉峰 3,高翔 4,宋家宝 5,尹子如 6 1 河北科技大学基因编辑研究中心,河北石家庄 050018。2 美国莱斯大学化学与生物分子工程系,休斯顿,德克萨斯州 77005,美国。3 河北科技大学科技发展研究所,河北石家庄。4 河北科技大学环境科学与工程学院,河北石家庄 050018。5 河北科技大学生物科学与生物工程系,河北石家庄。 6 河北科技大学期刊出版社,河北石家庄 050018。 * 通讯作者:吴永强(wuyongqiang@hebust.edu.cn),袁其晨(yqc@rice.edu) 摘要 在目前报道的 Cas12a 直系同源物中,新凶手弗朗西斯菌 Cas12a (FnCas12a) 受原型间隔区相邻基序 (PAM) 的限制较少,这将有助于靶向以前无法接近的基因组位点。然而,FnCas12a 核酸酶的活性在人体细胞中相对较低或无法检测到,限制了其作为理想基因组工程工具的应用。在这里,我们描述了 TEXT(将 EXonuclease T5 与 FnCas12a 连接),这是一种融合策略,可显着提高人体细胞中 FnCas12a 在三种不同细胞系中的多个基因组位点的敲除效率。使用18nt至23nt的不同间隔长度,TEXT的插入和删除(indel)效率均高于FnCas12a,其中18nt的插入效率最高,比FnCas12a高出11倍。深度测序表明,TEXT显著增加了目标位点的删除频率和删除大小。TEXT增强了FnCas12a核酸酶的活性,拓展了其在人类细胞基因组工程中的应用。
一些中国公司的中文和英文名称并不相同。以下是知名公司中文名称的逐字翻译,方便非中文人士参考。TankeBlue:天科合达 SICC:山东天岳 Synlight:河北通光
1伊朗兹大学第一家附属医院妇产科,434023吉佐,荷西2号扬兹大学的附属医院,434023,河北,中国434023 434023 Jingzhou,Hubei ogicy 3 340,第434023位的Yangtze University Yangtze University of Yangtze University of Yangtze University of Yangtze University of Yangtze University of Yangtze University of Yangtze University of Yangtze University of Yangtze University of Yangzhou的妇产科和妇科科学系,第3403号。 Jingzhou,中国河北, *通信:cunjiany@163.com(cunjian yi); ivansblue@sina.com(fuyuan yang)†这些作者贡献了同样的贡献。
1) 中国科学院半导体研究所国家重点实验室,北京 912 信箱,100083 2) 中国科学院大学物理科学学院,北京 100049 3) 广州大学物理与电子工程学院,广州 510006 4) 广州大学先进信息材料研究中心,广州 510006 5) 河北医科大学医学影像学院医学物理教研室,河北石家庄 050017 6) 中国科学院大学材料科学与光电技术学院,北京 100049 7) 中国科学院微电子研究所微电子仪器与设备研究中心,北京 100029 8) 中国科学院大学微电子学院,北京 100049 9) 信息与通信工程协同创新中心中国科学技术大学量子信息与量子物理系,安徽合肥 230026
1 河北北方学院第一附属医院中心实验室,张家口,2 深圳大学总医院儿科,深圳,3 宾夕法尼亚大学,宾夕法尼亚州费城,4 中国科学院大学未来技术学院,北京,5 河北北方学院第一附属医院普通外科,张家口,6 广西中医药大学药理学系,广西南宁,7 中国科学院动物研究所干细胞与生殖生物学国家重点实验室,北京,8 中国科学院干细胞与再生研究所,北京,9 北京干细胞与再生医学研究所,北京,10 中国科学院国家干细胞资源中心,北京,11 深圳市第三人民医院和第二妇幼保健院国家传染病临床研究中心南方科技大学附属医院,深圳,中国
1 中国科学院高能物理研究所粒子天体物理重点实验室和实验物理研究部及计算中心,北京 100049 2 中国科学院大学,北京 100049 3 天府宇宙线研究中心,四川成都 610000 4 都柏林高等研究院,爱尔兰都柏林 2 号 Fitzwilliam Place 31 号 5 马克斯普朗克核物理研究所,德国海德堡 69029 信箱 103980 号 6 粒子探测与电子学国家重点实验室 7 中国科学技术大学,安徽合肥 230026 8 西南交通大学物质科学与技术学院、信息科学与技术学院,四川成都 610031 9 南京大学天文与空间科学学院,江苏南京 210023 10 广州大学天体物理中心,510006 广东广州,中国 11 河北师范大学,050024 河北石家庄,中国 12 中国科学院紫金山天文台暗物质与空间天文重点实验室 & 射电天文重点实验室,210023 江苏南京,中国
公园宗旨陈述“七湾州立公园是通往谢南多厄河谷中心的门户,其宗旨是提供水上和陆地户外娱乐和教育机会,同时保护和阐释弗吉尼亚州谢南多厄河北叉七湾地区壮观的景色和独特的地质、自然和历史资源。”简介七湾州立公园位于谢南多厄县中东部,靠近伍德斯托克镇。公园占地 1,066 英亩,位于谢南多厄河北叉地理独特的七湾地区。公园的大部分土地是捐赠的。伍德斯托克镇捐赠了近 85 英亩的原镇水库所在地。詹姆斯·R·迈尔斯博士捐赠了最大的一块地,约 674 英亩,毗邻水库。第三块土地,面积超过 306 英亩,被称为 Camp Lupton,是由州政府从马萨努滕军事学院购买的。
毛主席作报告一个多月后,党内最大的走资本主义道路的当权派,匆匆忙忙地到河北、河南、湖北、湖南、广东五省巡回演讲,到处唱着与毛主席相反的歌。四月份,他到上海,发表了《在上海党员干部代表大会上的讲话》。他在讲话中公然歪曲生产资料所有制社会主义改造基本完成以后的阶级斗争形势,大肆宣扬“阶级斗争熄灭论”,反对和取消社会主义革命,妄图把无产阶级专政变为资产阶级专政。