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图 1. CRISPR-Cas9 RNP 促进 C. higginsianum 中与供体 DNA 的同源重组。(a)CRISPR-Cas9 RNP 介导的 HDR 示意图。首先,将重组 Cas9 蛋白(橙色)和针对目的基因 (GOI) 的合成 gRNA(洋红色)在体外混合以形成 RNP。其次,用 RNP 和供体 DNA 转化 C. higginsianum 原生质体,其中供体 DNA 具有选择标记 NPTII,两侧是两个同源臂。最后,通过结合选择培养基和基于 PCR 的筛选来分离用选择盒替换 GOI 的菌株。(b)URA3 敲除的构建设计。供体 DNA 具有选择标记,即 NPTII 表达盒,两侧是 0.5 kb 的同源臂,以浅灰色框表示。箭头表示扩增 ura3 基因组中特异性存在的“片段 1”和“片段 2”的引物。(c)转化子数量和 URA3 敲除率。左图显示每板转化子数量,右图显示每板 URA3 敲除率(n =5)。“-gRNA”和“+gRNA”分别代表不含和含 gRNA 的结果。星号表示统计差异(p < 0.001,Welch t 检验)。通过 PCR 筛选评估 URA3 的敲除,如 (d) 所示。(d)ura3 突变体的 PCR 筛选。使用 (b) 中所示的引物组,在含有 500 µg/ml G418 的 MA 上使用每个菌落进行 PCR。显示了从 -gRNA 和 +gRNA 转化子中随机选择的七个菌落的结果。 C. higginsianum 肌动蛋白基因 (CH63R_04240) 的 238 bp 片段被指定为肌动蛋白。凝胶左侧的数字表示 DNA 大小标记 (bp) 的位置。
7.4.8。彗星P12/Pons-Brooks _________________ 106 7.4.9。世卫组织全球临床试验论坛__________ 106 7.4.10。Codex Alimentarius委员会(CAC)_____ 106 7.4.11。生物技术研究与创新委员会(BRIC)______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________1.12多。 U.S. Approves First CRISPR Based Gene Therapies ___________________________________________ 107 7.4.13. Ayushman Arogya Mandir(AAM)_________ 108 7.4.14。 Aarogya Maitri Aid Cube ________________ 108 7.4.15。 Aktocyte ________________________________ 108 7.4.16。 庞贝病____________________________ 108 7.4.17。 绿叶挥发物(GLV)______________ 108 7.4.18。 JT-60SA:实验性核融合反应堆______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________00 7.4.4.108 7.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.-1-1,。 炭疽菌_____________________________ 109 7.4.20。 遗产方案的氢___________ 109 7.4.21。 krutrim ______________________________ 109 8。 文化____________________________ 110生物技术研究与创新委员会(BRIC)______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________1.12多。U.S. Approves First CRISPR Based Gene Therapies ___________________________________________ 107 7.4.13.Ayushman Arogya Mandir(AAM)_________ 108 7.4.14。Aarogya Maitri Aid Cube ________________ 108 7.4.15。Aktocyte ________________________________ 108 7.4.16。 庞贝病____________________________ 108 7.4.17。 绿叶挥发物(GLV)______________ 108 7.4.18。 JT-60SA:实验性核融合反应堆______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________00 7.4.4.108 7.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.-1-1,。 炭疽菌_____________________________ 109 7.4.20。 遗产方案的氢___________ 109 7.4.21。 krutrim ______________________________ 109 8。 文化____________________________ 110Aktocyte ________________________________ 108 7.4.16。庞贝病____________________________ 108 7.4.17。绿叶挥发物(GLV)______________ 108 7.4.18。JT-60SA:实验性核融合反应堆______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________00 7.4.4.108 7.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.4.-1-1,。炭疽菌_____________________________ 109 7.4.20。遗产方案的氢___________ 109 7.4.21。krutrim ______________________________ 109 8。文化____________________________ 110
1. 2022. 优化从紫球藻生物质中获取提取物的工艺,以增加其营养潜力。拉丁美洲藻类和环境生物技术杂志13(2):71。第七届拉丁美洲藻类生物技术大会(CLABA)和第五届拉丁美洲环境与藻类生物技术学会大会(SOLABIAA)。 2. 2022. 紫球藻微藻生物质的营养特性。拉丁美洲藻类和环境生物技术杂志13(2):71。第七届拉丁美洲藻类生物技术大会(CLABA)和第五届拉丁美洲环境与藻类生物技术学会大会(SOLABIAA)。 3. 2022. 紫球藻微藻提取物的抗氧化活性和植物化学特征。第十届食品科学生物技术与安全大会摘要集。拉丁食品 2022. 4. 2022. 炭疽菌 (Colletotrichum truncatum) 的鉴定和致病性以及鸡蛋花属炭疽病的发生率和严重程度。位于墨西哥锡那罗亚州库利亚坎。墨西哥植物病理学杂志。第 40 卷,2022 年补充。ISSN-2007-8080。
多种细菌可以使用饮食营养物质或通过微生物交叉进食相互作用来定位动物肠道。对宿主衍生的营养物质在实现肠道细菌定植中的作用知之甚少。在这里,我们检查了蜜蜂(Apis Mellifera)和核心肠道微生物群Snodgrassella alvi之间进化古代共生中的代谢相互作用。这种蛋白菌无法代谢糖,但是在纯糖饮食的情况下将蜂蜜蜜蜂肠道化。使用比较代谢组学,13个C-跟踪剂和纳米级离子质谱法(纳米SIMS),我们在体内表明,S。alvi在宿主衍生的有机酸上生长,包括柠檬酸盐,甘油酸盐,甘油酸盐,3-羟基-3-羟基-3-羟基-3-甲基细胞酸盐,并在宿主中被派生为宿主,该宿主是托管的。s。alvi还通过将kynurenine转化为炭疽菌来调节肠道中的色氨酸代谢。这些结果表明,阿尔维(S. alvi)适用于蜜蜂肠道中的特定代谢生态位,该蜜蜂肠道取决于宿主衍生的营养资源。
本研究旨在通过多步骤工艺开发一种有效的生物制剂,以防止新鲜柑橘类水果采后真菌腐烂,该工艺包括从柑橘果皮中分离和鉴定乳酸菌 (LAB)、选择具有高抗真菌活性的 LAB 菌株、对无细胞上清液 (CFS) 进行化学表征、配制用 LAB 发酵物激活的柠檬皮粉状培养基 (LM)、对发酵 LM 进行化学表征以及评估新生物制剂对抗蓝霉菌的功效。从柑橘类水果皮中回收了 13 种 LAB,并通过肽质量指纹图谱法进行鉴定。使用双培养覆盖法和扩散琼脂测定法,分别测试了从柑橘类水果中分离的 LAB 以及从其液体培养物中获得的无细胞上清液 (CFS) 对抗多种植物病原真菌和卵菌的抗真菌活性。两个分离株被命名为 N3B2 和 M2B2,均被鉴定为植物乳杆菌,因其相关的抗真菌活性而被选中。这两个分离株都表现出广谱拮抗活性,包括柑橘果实的主要采后病原体,例如指状青霉菌和意大利青霉菌,分别是绿霉菌和蓝霉菌的病原体,链格孢菌,胶孢炭疽菌,喀斯特炭疽菌,柑橘腐霉菌和Ph. nic otianae。N3B2 和 M2B2 分离株被用作发酵剂,以发酵富含营养水溶液 (LM) 的柠檬皮粉培养基。通过使用 N3B2 和 M2B2 分离株发酵 LM 获得的两种制剂对用于初步筛选 LAB 的相同广泛病原体表现出强大的体外抑制活性。此外,这两种基于 LM 的配方降低了蓝霉感染的严重程度,并抑制了人工接种的柠檬果实上 P. italicum 的孢子形成。基于 LM 的生物配方的化学分析表明,它们的抗真菌活性很可能是由于乳酸菌衍生的酸性成分,包括乳酸、乙酸、DL-3-苯基乳酸、3-4-二羟基氢化肉桂酸、水杨酸香草酸。这些创新的基于 LM 的生物配方用乳酸菌衍生的抗真菌化合物激活,将被用作可食用和可生物降解的水果涂层,以延长新鲜柑橘水果的保质期并防止收获后腐烂。
本研究的主要目的是分离和形态学鉴定与大豆植株相关的真菌以及乌兹别克斯坦大豆种植田土壤层中的真菌。通过对从田间调查中采集的 160 个大豆植株部分进行真菌学研究,分离出 95 种腐生和植物病原真菌菌株,根据种类分配,其分布如下:链格孢属 3%、菊池尾孢 3%、毛霉属 3%、炭疽菌 3%、灰葡萄孢 3%、F. Heterosporum 4%、Penissulium spp. 7%、镰刀菌属。 8%、链格孢属9%、木霉属9%、黑曲霉10%、黄色镰刀菌11%、尖镰孢菌13%、镰刀菌14%。通过对土壤样品进行真菌学研究,共回收了40个真菌分离株,其种类分配如下:链格孢属、镰刀菌属、木霉属、尖镰孢菌、黄色镰刀菌、链格孢菌、镰刀菌、黑曲霉、Penissulium sp. 毛霉属。本研究获得的真菌分离株可用于促进乌兹别克斯坦大豆病害有效综合管理的发展。
控制这种疾病的方法是使用农用化学品。在巴拉那州,所用产品的有效成分包括甲氧基丙烯酸酯、二硫代氨基甲酸酯、三唑和有机锡。将这些杀菌剂与生物防治剂结合起来的研究很少。因此,本研究的目的是评估在连续使用杀菌剂、添加生物制剂和播种季节时分子的轮换对豆类炭疽病的防治效果。在第一阶段,晚播季节的 AACPI 和 AACPS 较高。处理 3(管理方案)显示豆荚发生率降低,比处理 2(化学处理)效果高出 20.46%。处理2和处理3的生产力均超过了对照,分别增加了15.82%和12.66%。第二阶段,有效成分为戊唑醇+肟菌酯和丙硫菌唑+肟菌酯的农药在添加木霉菌后,防治豆类炭疽病的效果得到增强。和枯草芽孢杆菌。关键词:炭疽菌,综合管理,杀菌剂,生物防治。摘要 炭疽病(Colletotrichum lindemuthianum)是影响普通豆类的主要疾病,可导致高达 100% 的产量损失,对粮食安全构成威胁,因为豆类是发展中国家低收入人群的主要蛋白质来源。控制这种疾病的主要方法是使用农用化学品。在巴拉那州,常用的活性成分包括甲氧基丙烯酸酯类、二硫代氨基甲酸酯类、三唑类和有机锡化合物。将这些杀菌剂与生物防治剂结合起来的研究很少。因此,本研究的目的是评估连续使用杀菌剂的分子轮换,结合生物制剂和种植时间对豆类炭疽病的治疗效果。在第一阶段,晚种植导致叶和茎炭疽病的AUDPC(病害进展曲线下面积)值更高。处理 3(综合管理方案)降低了豆荚发生率,比处理 2(化学处理)的效果高出 20.46%。处理2和处理3的产量优于对照,分别增产15.82%和12.66%。在第二阶段,含有有效成分戊唑醇+肟菌酯和丙硫菌唑+肟菌酯的农用化学品与木霉菌结合使用时对豆类炭疽病的防治效果增强。和枯草芽孢杆菌。关键词:炭疽菌,综合管理,杀菌剂,生物防治。摘要 炭疽病 (Colletotrichum lindemuthianum) 是影响豆类的主要疾病,可造成高达 100% 的产量损失,对粮食安全构成威胁,因为豆类是发展中国家低收入人群的基本蛋白质来源。控制这种疾病的主要方法是使用农用化学品。在巴拉那州,所使用的产品含有甲氧基丙烯酸酯、二硫代氨基甲酸酯、三唑和有机锡化合物作为活性成分。将这些杀菌剂与生物防治剂结合起来的研究很少。因此,本研究的目的是评估在连续使用杀菌剂、结合生物制剂和播种时间的情况下分子轮换对豆类炭疽病的防治效果。在第一阶段,晚种植导致叶片和茎秆炭疽病的AUDPC(病害进展曲线下面积)值更高。处理 3(综合管理方案)降低了豆荚中的发病率,比
Abang, MM、Green, KR、Wanyera, NW 和 Iloba, C. (2001) 胶孢炭疽病 Penz 的表征。来自尼日利亚的山药(Dioscorea spp.)。见:Akoroda, AO 和 Ngeve, JC(编辑)《21 世纪的根类作物》。国际热带块根作物协会非洲分会第七届三年一次的研讨会论文集(1998 年 10 月),贝宁科托努。尼日利亚伊巴丹:IITA,第 613-615 页。 Abang, MM、Winter, S.、Green, KR、Hoffmann, P.、Mignouna, HD 和 Wolf, GA (2002) 在尼日利亚引起山药炭疽病的胶孢炭疽病的分子鉴定。植物病理学,51,63–71。Abang, MM、Winter, S.、Mignouna, HD、Green, KR 和 Asiedu, R. (2003) 通过分子分类学、流行病学和群体遗传学方法了解山药炭疽病。非洲生物技术杂志,2,486–496。Aime, MC、Miller, AN、Aoki, T.、Bensch, K.、Cai, L.、Crous, PW 等人 (2021) 如何发布新的真菌物种或名称,版本 3.0。IMA 真菌,12,11。Akem, CN (1999) 尼日利亚山药带的山药枯萎病及其主要原因。巴基斯坦生物科学杂志,2,1106–1109。 Akem, CN (2006) 芒果炭疽病:现状及未来研究重点。《植物病理学杂志》,5,266-273。Akinnusi, OA、Oyeniran, JO 和 Sowunmi, O. (1987) 化学处理对改良山药仓中储存的山药的影响。《尼日利亚储存产品研究所报告》,技术报告,17,69-77。Alleyne, AT (2001) 东加勒比英语岛屿的山药炭疽病 - 疾病管理的成功和研究进展。《热带农业》,75,53-57。Almeida, R. 和 Allshire, RC (2005) RNA 沉默和基因组调控。《细胞生物学趋势》,15,251-258。 Amusa, NA (1997) 尼日利亚西南部山药(薯蓣属)炭疽病症状相关真菌及其在疾病严重程度中的作用。《作物研究》,13,177-183。Amusa, NA (2000) 利用炭疽菌属有毒代谢物筛选抗炭疽病的木薯和山药品种。《真菌病理学》,150,137-142。Amusa, NA、Adegbite, AA、Muhammed, S. 和 Baiyewu, RA (2003) 尼日利亚山药病害及其防治。《非洲生物技术杂志》,2,497-502。 Amusa, NA & Ayinla, MA (1997) 噻菌灵对山药腐烂病菌活性和山药发芽的影响。国际热带植物病害杂志,14,113-120。Amusa, NA、Ikotun, T. 和 Asiedu, R. (1993) 从感染炭疽菌的山药叶中提取植物毒性物质。国际热带植物病害杂志,128,161-162。Arya, RS、Sheela, MN、Jeeva, ML 和 Abhilash, PV (2019) 大山药(Dioscorea alata L.)宿主植物对炭疽病的抗性鉴定。国际当代微生物学与应用科学杂志,8,1690-1696。Azeteh, IN, Hanna, R., Njukeng, AP, Oresanya, AO, Sakwe, PN 和 Lava Kumar, P. (2019) 感染喀麦隆山药(薯蓣属)的病毒的分布和多样性。病毒病,30,526–537。de Bakker, MD, Raponi, M. 和 Arndr, GM (2002) 非致病性和致病性真菌中 RNA 介导的基因沉默。微生物学最新观点,5,323–329。
炭疽菌是一种革兰氏阳性细菌,可能导致包括人类在内的野生和家庭伴侣之间的危害威胁性疾病(1)。B.炭疽病可以形成孢子,在不利条件下实现长期生存。先前已经报道了从储存到60年的土壤中分离植物的息肉。 由于其致病性特征,炭疽芽孢杆菌被认为是用于进行生物果或生物恐怖主义的最严重和威胁性的药物之一(3,4)。 In our previous study, 3 of 24 soil samples collect- ed from a World War II (WWII) site in northeastern China (Appendix Figure 1; https://wwwnc.cdc.gov/ EID/article/30/12/23-1520-App1.pdf) tested positive for B. anthracis using RPA/CRISPR-Cas12a, real-time PCR, and metagenomic analysis ( 5 )。 值得注意的是,这些阳性样品是从731单元(45°36′55.940'n,126°38′33.738'e)的位点获得的,这是日本军队经营的前bacteria实验室(5)。 我们从距离第二次世界大战实验室遗迹的0.5 km,3 km和5 km内的12个收集地点中收集了24个样品(附录图2)。 但是,我们在新收集的样品中没有检测到炭疽芽孢杆菌的痕迹,这意味着我们以前发现的阳性样品可能不是源自局部自然来源。 Using polymyxin B-lysozyme-EDTA-thallous ac- etate agar and API 50CHB-API 50CH biochemical re- agents (BioMérieux, https://www.biomerieux.com), we successfully isolated and identified a B. anthracis strain (named BA20200413YY) from one of the soil samples. 形态学,溶血和生化先前已经报道了从储存到60年的土壤中分离植物的息肉。由于其致病性特征,炭疽芽孢杆菌被认为是用于进行生物果或生物恐怖主义的最严重和威胁性的药物之一(3,4)。In our previous study, 3 of 24 soil samples collect- ed from a World War II (WWII) site in northeastern China (Appendix Figure 1; https://wwwnc.cdc.gov/ EID/article/30/12/23-1520-App1.pdf) tested positive for B. anthracis using RPA/CRISPR-Cas12a, real-time PCR, and metagenomic analysis ( 5 )。值得注意的是,这些阳性样品是从731单元(45°36′55.940'n,126°38′33.738'e)的位点获得的,这是日本军队经营的前bacteria实验室(5)。我们从距离第二次世界大战实验室遗迹的0.5 km,3 km和5 km内的12个收集地点中收集了24个样品(附录图2)。但是,我们在新收集的样品中没有检测到炭疽芽孢杆菌的痕迹,这意味着我们以前发现的阳性样品可能不是源自局部自然来源。Using polymyxin B-lysozyme-EDTA-thallous ac- etate agar and API 50CHB-API 50CH biochemical re- agents (BioMérieux, https://www.biomerieux.com), we successfully isolated and identified a B. anthracis strain (named BA20200413YY) from one of the soil samples.形态学,溶血和生化