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一种生成普通菜豆 (Phaseolus vulgaris L.) 转基因毛状根的全面、改进的方案及其在反向遗传学研究中的应用
生成转基因毛状根一直是菜豆 (Phaseolus vulgaris L.) 分子研究的首选策略，因为在该物种中生成稳定的敲除系具有挑战性。然而，按照 2007 年发表的原始方案产生毛状根的植物数量通常很少，这阻碍了进展。自首次发表以来，原始方案已被广泛修改，但这些修改尚未得到充分或系统的报道，因此很难评估该方法的可重复性。这里介绍的方案是对原始方法的更新和扩展。重要的是，它包括生成转基因毛状根并将其用于基于反向遗传学方法的分子分析的新的关键步骤。使用该方案，大约 30% 的转化植物中两种不同基因的表达（用作示例）显著增加或减少。此外，还观察到了给定基因的启动子活性，并成功监测了转基因毛状根中根瘤菌的感染过程。因此，该改进的协议可用于上调、下调普通菜豆转基因毛状根中各种基因的启动子活性分析以及追踪根瘤菌感染。
