作为男性父母,事件E1,E2和E5的相对种子集效率分别为37.89%,61.82%和83.76%(表1和补充图。9)。这些发现进一步表明,Accenh3的敲低影响了种子集。差异种子集可能是在相互交叉中观察到的转基因偏置隔离变形的原因之一。我们的观察结果
共聚焦显微镜。根据大脑的尺寸(图像尺寸:775 µm x 775 µm; z-stack size = 10 µm;步骤尺寸= 0.5 µm),从背外侧和内侧纹状体以20倍放大倍率拍摄一到两个图像。为每个图像应用了相同的采集设置。免疫组织化学图像与Neun染色的图像进行比较以可视化缺血核,并排除了缺血性核心外部区域的图像。使用斐济开源图像分析软件(45)的面积分数测量工具(45)对血管化参数和BBB泄漏的量化进行定量。面积密度表示为总图像面积的PDXL和CD13的百分比。通过计算共定位
几个世纪以来,棘皮动物(海洋无脊椎动物门)因其发育和胚胎后现象而吸引着科学家。对它们的卵子和胚胎进行的实验尤其为基础科学进步做出了贡献。然而,强大的分子遗传学研究仅限于胚胎发育阶段,这些阶段可通过向受精卵微注射试剂来产生遗传扰动。这代表了研究胚胎后过程的重大瓶颈,在胚胎后过程中,基因的最早功能必须保持完整。因此,我们寻求为这些物种建立一种时空可转动的基因编辑工具。在这里,我们使用海星 Patiria miniata 作为模型,引入了一种化学诱导的 Tet-ON 基因表达系统。将这个 Tet-ON 系统与 CRISPR 介导的基因改变技术相结合,我们首次在棘皮动物生物学中展示了在海星转基因细胞群中进行可诱导基因编辑的原理验证。我们在此展示的方法可以适用于其他棘皮动物物种,并且还将极大地扩展实验的可能性。
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