7. 注意事项 1)参加投标人员必备的资格 A. 不属于《预算、结算和会计法》(1947 年帝国法令第 165 号)第 70 条规定的人员。此外,未成年人、被监护人或受协助人,已取得订立合同所必需的同意,也属于同一条款内有特殊原因的情形。 (一)不属于预算会计审计法第七十一条规定情形的。 (c)在各省厅统一资格申请中,拥有第2项“参赛资格”等级,且具备北海道地区参赛资格的人员。 (投标时须提交资格审查结果通知书副本)e)申请人目前没有受到合同官员或其他此类人员的暂停投标处罚。 严格遵守《投标及合同指南》的人员。 (c)不属于附录1“暂停采购设备等和服务的提名”所列人员。
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2020年3月15日 — 正常时间(经由鸟取高速公路及志度坂峠道)。绕行时间(经由国道53号及国道429号)。出处:H27全国道路交通调查 *计算旅行时间的速度为高峰时段的旅行速度。
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基因组 PCR 是分子生物学的基础,包括两个关键步骤:DNA 提取和扩增。酵母 DNA 提取的主要挑战是细胞壁的破坏,这直接影响提取效率。在本研究中,我们使用了文献中报道的几种酵母基因组提取方法,例如玻璃珠法 [7] 、LiAc [8] 和 NaOH 法 [9] 。NaOH 法利用强碱性环境溶解和变性蛋白质,破坏细胞和核膜,并使核酸酶失活,从而无需影响其一级结构即可释放 DNA。另一方面,LiAc 法使用 LiAc 和 SDS 暂时透化酵母细胞,使 DNA 自由通过。SDS 是一种阴离子洗涤剂,可去除污染蛋白质,而乙醇可沉淀和浓缩 DNA。LiCl 遵循与 LiAc 类似的原理。玻璃珠法是一种物理方法,通过高速摇晃过程中的机械摩擦破坏细胞壁。本研究还测试了一种能够水解真菌细胞壁的酶 Lyticase,并优化了直接基因组提取的方案。
泥炭地是次优土地,其质量可以得到改善,以便用于农业种植。其中一种方法就是利用赤泥和生物肥料。赤泥是铝土矿加工产生的废弃物,在西加里曼丹储量丰富。赤泥的pH值高、电导率高、可交换性钠高、碱饱和度高。生物肥料是含有精选微生物的产品,可以帮助促进植物生长和产量。本研究旨在确定赤泥和生物肥料对改善泥炭质量的效果以及对杂交玉米生长和产量的影响。该实验采用双因素随机区组设计(RBD)。第一个因素是赤泥,有三种剂量水平:对照(l 0 )、6吨/公顷(l 1 )和12吨/公顷(l 2 )。第二个因素是生物肥料,有三种类型:对照(p 0)、Mycofer 高达 10 g/plant(p 1)和 Provibio 高达 10 ml/l(p 2)。研究结果表明,12吨/公顷剂量的赤泥显著提高了土壤pH值、土壤电导率、植物生长和杂交玉米产量。 12吨/公顷赤泥与Provibio生物肥料的相互作用显著提高了钠的含量,并实现了磷、钾、钙和镁的最高吸收。关键字:
Komagataella phaffii (K. phaffii) (Pichia pastoris),也称为生物技术酵母,是一种在生物技术和制药行业中具有多种应用的酵母菌种。这种甲基营养酵母作为重组蛋白的生产平台引起了人们的极大兴趣。它具有许多优点,包括有效的分泌表达,便于纯化异源蛋白,细胞密度高,生长迅速,翻译后变化,以及整合到基因组中的稳定基因表达。在过去的三十年里,K. phaffii 还被精炼为一个适应性强的细胞工厂,可以在实验室环境和工业规模上生产数百种生物分子。事实上,迄今为止,使用 K. phaffii 表达方法已经生成了 5000 多种重组蛋白,占细胞总蛋白的 30% 或总释放蛋白的 80%。除了已获得许可的 300 多种工业工艺外,K. phaffii 还用于制造 70 多种商业产品。其中包括对工业生物技术有用的酶,包括木聚糖酶、甘露聚糖酶、脂肪酶和植酸酶。其他是生物制药,包括人血清白蛋白、胰岛素、乙肝表面抗原和表皮生长因子。与其他表达系统相比,这种酵母还被认为是合成亚单位疫苗的特殊宿主,而亚单位疫苗最近已被替代疫苗类型所取代,例如灭活/杀死和减毒活疫苗。此外,通过多层次优化方法,如密码子偏好、基因剂量、启动子、信号肽和环境因素,可以实现重组蛋白的高效生产。因此,尽管 K. phaffii 表达系统高效、简单且工艺流程明确,但仍需确定理想条件,因为这些条件会根据目标蛋白而变化,以确保最高的重组蛋白生成量。本综述介绍了 K. phaffii 表达系统、其在工业和生物制药蛋白质生产中的重要性,以及一些高效蛋白质生产的生物加工和遗传改造策略。K. phaffii 最终将继续作为一种强大的表达系统在研究领域和工业应用中做出贡献。