送来

原创研究 通过将重组 Affibody 支架连接至靶向药物输送来避免蛋白冠抑制的策略

目的：修饰有功能性配体的纳米粒子 (NP) 是癌症诊断和治疗的有希望的候选物。然而，许多研究表明，NP 上化学偶联的靶向部分在生物环境中会失去靶向能力，因为它们被“蛋白质冠”屏蔽或覆盖。在此，我们构建了一个功能性磁小体，即使在存在蛋白质冠的情况下，它也能识别和靶向癌细胞。方法：从趋磁细菌 M. gryphiswaldense (MSR-1) 中提取磁小体 (BMP)，并通过亲和体 (RA) 和戊二醛 (GA) 修饰曲妥珠单抗 (TZ)。工程化的 BMP 被称为 BMP-RA-TZ 和 BMP-GA-TZ。通过 ELISA 检测它们结合 HER2 的能力，使用 LC-MS 分析血浆冠蛋白的数量。通过共聚焦激光扫描显微镜和流式细胞术证明了靶向 SK-BR-3 的效率。结果：两种工程化 BMP 每毫克 BMP 中含有高达约 0.2 毫克 TZ，而与 BMP-RA-TZ 结合的 HER2 数量是与 BMP-GA-TZ 结合的 HER2 数量三倍。与正常人血浆或补充有 IgG 的血浆孵育后，与含 RA-TZ 的 BMP 相比，含 GA-TZ 的 BMP 具有更大的水合半径和更多的表面蛋白。含 TZ 的 BMP 均可靶向并内化在 HER2 过表达的乳腺癌细胞系 SK-BR-3 中；然而，它们的靶向效率差异很大：含 RA-TZ 的 BMP 为 50-75%，含 GA-TZ 的 BMP 为 9-19%。将 BMP 与血浆 (100%) 和癌细胞孵育以模拟人类体内环境。在此环境下，SK-BR-3 对 BMP-RA-TZ 的摄取效率达到近 80%（略低于与 BMP-RA-TZ 直接相互作用），而 BMP-GA-TZ 的摄取效率为 <17%。结论：RA 支架的应用促进和定向靶向配体的排列，并降低冠蛋白的屏蔽作用。该策略提高了 NP 在模拟体内环境下的靶向能力和药物递送。关键词：亲和体、蛋白冠、磁小体、人表皮生长因子受体 2、HER2