闪烁计

目前有几种技术用于将 RNA 分子退火到其互补的 DNA 序列。为了某些目的，RNA 和 DNA 都可以

目前有几种技术可用于将 RNA 分子与其互补的 DNA 序列退火。对于某些目的，RNA 和 DNA 都可以在溶液中，1'2 但将 DNA 固定在固体或半固体基质中，4 或附着在硝酸纤维素膜过滤器上往往更方便。5 通常在用核糖核酸酶处理以去除未杂交的 RNA 后，通过对放射性 RNA 进行闪烁计数来检测杂交体。RNA 与细胞学制剂中的 DNA 的杂交应表现出高度的空间定位，因为每种 RNA 只与其互补的序列杂交。细胞学杂交技术的一般原理并不难制定。染色体或细胞核应以尽可能逼真的方式固定；碱性蛋白质应被去除，因为它们会干扰杂交过程；5 应以不丢失细胞完整性的方式变性 DNA；杂交应使用具有极高比活度的放射性 RNA，因为在给定位点杂交的分子数很少；检测应通过氚放射自显影实现最大细胞学分辨率。本文介绍了一种适用于传统南瓜制剂的细胞学杂交技术。它以蟾蜍 Xenopus 卵母细胞中 rRNA 与染色体外 rDNA 的杂交为例。1968 年 12 月，在巴西贝洛奥里藏特举行的国际核生理学和分化研讨会上提交了该技术的初步报告。材料和方法。- 细胞学杂交技术结合了琼脂柱4 和过滤方法5 的某些特点。它应该普遍适用于任何可以作为南瓜或涂片检查的材料。制备图 1 中所示的制剂时采用以下步骤。（1）将新近变态的非洲爪蟾的卵巢在乙醇-乙酸（3:1）中固定几分钟。（2）将组织转移到显微镜载玻片上的一滴 45% 乙酸中，