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World File Search System黑曲霉
利用黑曲霉真菌合成氧化锌纳米粒子以实现可持续
本研究调查了使用黑曲霉培养滤液生产氧化锌纳米粒子 (ZnO NPs) 作为一种可持续且环保的方法，将其与碳酸锌溶液结合。使用透射电子显微镜 (TEM)、能量色散 X 射线衍射 (EDX)、扫描电子显微镜 (SEM) 和傅里叶变换红外光谱 (FT-IR) 检查生产的 ZnO 纳米粒子。表征数据验证了高度结晶的 ZnO NPs 的产生，平均尺寸范围为 27 至 40 纳米。研究了 ZnO NPs 在理想温度下对赭曲霉和黑曲霉生长的影响。在剂量分别为 0.25%、0.5% 和 1% 时，黑曲霉和赭曲霉分别导致 56%、81% 和 87% 的真菌生长抑制和 64%、71% 和 86% 的真菌生长抑制。在最高 ZnO NPs 浓度下，观察到最大抑制率。这项研究凸显了黑曲霉作为生物工厂生产 ZnO 纳米颗粒的潜力，这些纳米颗粒在农业和其他领域具有广阔的应用前景。环保的合成方法，加上合成的 ZnO 纳米颗粒的抗真菌特性，为植物病害管理提供了一种可持续且环保的传统杀菌剂替代品。
基于 CRISPR/Cas9 的多拷贝整合系统用于黑曲霉中的蛋白质生产
丝状真菌黑曲霉因其高蛋白质分泌能力而闻名，是同源和异源蛋白质生产的首选宿主。为了进一步提高黑曲霉的蛋白质生产能力，我们制备了一组专用的蛋白质生产菌株，其在基因组的预定位置包含多达 10 个葡糖淀粉酶着陆位点 (GLS)。这些 GLS 取代了编码大量存在或编码不需要的功能的酶的基因。每个 GLS 都包含葡糖淀粉酶基因 (glaA) 的启动子和终止子区域，该基因是黑曲霉中表达最高的基因之一。整合多个基因拷贝（通常通过随机整合实现）可提高蛋白质产量。在我们的方法中，GLS 允许使用 CRISPR/Cas9 介导的基因组编辑快速进行靶向基因替换。通过在每个 GLS 中引入相同或不同的独特 DNA 序列（称为 KORE 序列）并设计 Cas9 兼容的单向导 RNA，人们能够选择目标基因在哪个 GLS 整合。通过这种方式，可以轻松快速地制备一组具有不同目的基因拷贝数的相同菌株，以比较蛋白质生产水平。为了说明其潜力，我们成功地利用表达平台生成多拷贝 A. niger 菌株，该菌株产生 Penicillium expansum PatE::6xHis 蛋白，催化棒曲霉素生物合成的最后一步。表达 10 个拷贝 patE::6xHis 表达盒的 A. niger 菌株在培养基中产生约 70 lg mL 1 PatE 蛋白，纯度略低于 90%。
利用比较基因组学鉴定黑曲霉中的新型生物合成基因簇
摘要：之前，DNA 微阵列分析表明，在与枯草芽孢杆菌共培养中，锚定在黑曲霉非核糖体肽合成酶上的生物合成基因簇被下调。基于系统发育和同源性分析，我们发现这个基因簇 NRRL3_00036-NRRL3_00042 包含预测编码非核糖体肽合成酶、含 FAD 结合结构域的蛋白质、未知蛋白质、转运蛋白、细胞色素 P450 蛋白、含 NAD(P) 结合结构域的蛋白质和转录因子的基因。我们过表达了簇内转录因子基因 NRRL3_00042 。过表达菌株 NRRL3_00042 OE 表现出生长速度降低和黄色色素产生减少，质谱分析显示黄色色素对应于两种化合物，质量分别为 409.1384 和 425.1331。我们删除了 NRRL3_00042 OE 菌株中编码 NRRL3_00036 非核糖体肽合成酶的基因。所得菌株恢复为野生型表型。这些结果表明，由 NRRL3_00036 非核糖体肽合成酶基因锚定的生物合成基因簇受簇内转录调控基因 NRRL3_00042 调控，并且它参与了两种以前未表征的化合物的生产。
使用基于过滤器的试剂盒和冷却方法对黑曲霉 DNA 进行质量和数量分离 Renatasya Silviana Herningtyas、Muhammad Taufiq Qur
提交日期：2023 年 11 月 13 日 修订日期：2024 年 4 月 6 日 接受日期：2024 年 6 月 22 日 摘要 聚合酶链式反应 (PCR) 是提高检测真菌感染（例如由黑曲霉引起的感染）灵敏度的重要技术。纯 DNA 和 DNA 分离技术的可用性是实施 PCR 的重要因素。本研究旨在比较使用基于过滤器的试剂盒方法和冷却分离黑曲霉 DNA 的质量和数量。实验研究设计使用琼脂糖凝胶电泳 (1.5%) 对 DNA 分离物进行定性测试，使用紫外可见分光光度计 (波长为 260 nm 和 280 nm) 进行定量 DNA 测试。数据分析比较了两种方法分离的 DNA 的定性和定量结果。结果表明，两种分离方法中都存在 DNA 带，基于过滤器的试剂盒方法中的带较粗使用基于过滤器的试剂盒分离后的 DNA 平均浓度 (6,478 ng/μl) 高于冷却方法 (5,994 ng/μl)。基于过滤器的试剂盒中的 DNA 纯度 (1.7) 也高于冷却方法 (1.1)。基于过滤器的试剂盒方法含有支持成功分离 DNA 的化学成分。可以得出结论，基于过滤器的试剂盒方法比冷却方法产生的黑曲霉 DNA 分离物质量更好、数量更多。这些发现意味着基于过滤器的试剂盒可能是实验室应用中分离黑曲霉 DNA 的更好选择。关键词：黑曲霉；冷却方法；基于过滤器的试剂盒 1. 简介
Ryan AS 等。黑曲霉通过深层和固态发酵生产柠檬酸：概述。Int J Biochem Physiol 2024, 9(1): 000242。
目前，柠檬酸是通过微生物发酵生产的，使用各种微生物，有三种不同的技术，即深层发酵 (SmF)、固态发酵 (SSF) 和液体表面发酵 (LSF)。目前，柠檬酸的大部分商业化生产是通过深层发酵，使用 A. niger 作为糖工业副产品的底物。然而，最近，固态发酵的开发已显示出一些前景，有望成为柠檬酸商业化生产深层发酵的替代品。为了找到一种比现有发酵技术更有效、更省油、更省力、更经济的柠檬酸生产替代发酵技术，本综述对固态发酵和深层发酵进行了比较。
大豆病原真菌的土壤田分析
本研究的主要目的是分离和形态学鉴定与大豆植株相关的真菌以及乌兹别克斯坦大豆种植田土壤层中的真菌。通过对从田间调查中采集的 160 个大豆植株部分进行真菌学研究，分离出 95 种腐生和植物病原真菌菌株，根据种类分配，其分布如下：链格孢属 3%、菊池尾孢 3%、毛霉属 3%、炭疽菌 3%、灰葡萄孢 3%、F. Heterosporum 4%、Penissulium spp. 7%、镰刀菌属。 8%、链格孢属9%、木霉属9%、黑曲霉10%、黄色镰刀菌11%、尖镰孢菌13%、镰刀菌14%。通过对土壤样品进行真菌学研究，共回收了40个真菌分离株，其种类分配如下：链格孢属、镰刀菌属、木霉属、尖镰孢菌、黄色镰刀菌、链格孢菌、镰刀菌、黑曲霉、Penissulium sp. 毛霉属。本研究获得的真菌分离株可用于促进乌兹别克斯坦大豆病害有效综合管理的发展。
银离子过滤器
*1 [检测机构] 北里环境科学研究中心 [检测报告] 编号 2020_0408 [检测病毒] 大肠杆菌噬菌体 Qbeta NBRC 20012（1 种） [检测方法] 根据纺织品抗病毒检测方法（JIS L 1922） [检测结果] 24 小时内抑制率至少为 99%。 未进行预防 SARS-CoV-2 传播的检测。 *2 [试验机构] 北里环境科学研究中心 [试验报告] 编号 2020_0409 [试验菌] 大肠杆菌 NBRC 3972（1 种） [试验方法] 基于纺织品抗菌活性和功效的判定（JIS L 1902） [试验结果] 经过 24 小时试验，试验菌的生长受到抑制 *3 [试验机构] 北里环境科学研究中心 [试验报告] 编号 2020_0410 [试验真菌] 黑曲霉 NBRC 105649 等真菌（3 种） [试验方法] 基于抗真菌试验（JIS Z 2911）
酵母麦芽 HiVegTM 琼脂/肉汤 MV424/MV425
粉末外观 浅黄色，可能略带绿色，均匀，自由流动的粉末。 凝胶 坚固，与 MV424 的 2.0% 琼脂凝胶相当。 颜色和透明度 浅琥珀色，在培养皿中形成非常微乳白色的凝胶，在试管中形成非常微乳白色的溶液。 反应 4.1% w/v 的 MV424 或 2.1% w/v 的 MV425 水溶液在 25°C 下的反应为 pH 6.2 ± 0.2。 培养反应 在 25-30°C 下孵育 40 -72 小时后观察到的培养特征。生物体 (ATCC) 生长 pH 3.4 时生长 pH 6.2 时黑曲霉 (16404) 良好-茂盛 良好-茂盛 白色念珠菌 (10231) 良好-茂盛 良好-茂盛 酿酒酵母 (9763) 良好-茂盛 良好-茂盛 莱希曼乳杆菌 (4797) 较差 良好-茂盛 大肠杆菌 (25922) 受抑制 良好-茂盛
垃圾场微生物（真菌）调查
本研究旨在调查和鉴定与哈科特港 Rumuolumeni 的 Eagle 水泥垃圾场相关的真菌。在两个垃圾场的不同地点采集土壤样本。将土壤样本放入不同的干净尼龙袋中，并在无菌和新鲜制备的平板计数琼脂 (PCA) 上进行培养。所有技术均按照制造商说明的标准实验室条件进行。接种重复三次，并记录为土壤样本中的平均总可行真菌数。从 Eagle 水泥垃圾场分离、表征和鉴定了四 (4) 种真菌。在调查期间分离的所有生物中，鉴定的真菌有黄曲霉、黑曲霉、青霉菌和镰刀菌。黄曲霉菌种的出现率最高，为 36.3%，青霉菌和镰刀菌种的出现率最低（18.2%）。共记录到真菌数量 9.89 × 10 7 ，平均数量为 3.29 × 10 7 。