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50 毫升毛细血管血样(n = 295)在现场保存在液氮中,随后储存在 -20°C 下,用于在自动化 QIASymphony 平台(Qiagen)上使用 QIAsymphony DNA Investigator 试剂盒(德国希尔登 Qiagen)提取寄生虫 DNA。最终 DNA 洗脱体积为 100 µL。使用基于 SYBR Green 的属特异性定量 PCR 进行疟疾分子筛查。引物对(PCBF,5'-ATG CTT TAT TAT GGA TTG GAT GTC-3' 和 PCBR,5'-CAG ACC GTA AGG TTA TAA TTA TGT-3')靶向人类感染疟原虫的细胞色素b(cytb)基因的保守序列(21),检测阈值为每微升 0.2 个扩增子拷贝(相当于每毫升约 4 个疟原虫,假设每个单核血液阶段疟原虫平均有 50 个线粒体基因组拷贝)。20 微升反应体系含有 5 微升 DNA 溶液、7.5 微升

临床上无症状的间日疟原虫感染。......

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