补充材料S1。DNA提取和RT-PCR基因组DNA。然后在双链taqman QPCR中运行基因组DNA,该QPCR放大了T. cruzi rDNA基因2的24S alpha亚基的175bp序列。根据制造商的说明,使用FastStart Universal Probe Master(Roche)在CFX384触摸实时PCR循环仪(Bio-Rad)上进行定量实时PCR。所有反应的反应混合物包括10μl快速概要探针主,0.25μlHEX标记的探针,0.15μl家族标记的探针,1.8μlD75B引物,1.8μLD76BD76B DY76B Primer,3μL水,3μl水,和3μl植物瘤DNA。样品以阴性和阳性对照的重复运行。循环条件在95°C下的初始步骤为10分钟,在95°C下循环30s和60°C,持续1分钟。T。cruzi,量化周期(C Q)值为31.1和31.3;而阳性对照的C值为25和29.58(图s1)。这些值表明在测定中检测到目标序列的循环数量,总体而言,37岁以下的C Q值被认为是阳性的。