数字液滴 PCR (ddPCR)：简介、原理、步骤、仪器和相对于 qPCR 的优势

在分子生物学领域，准确定量核酸的能力是从基础研究到临床诊断等众多应用的基础。虽然传统的定量 PCR (qPCR) 一直是核酸定量最有用的技术，但最近的进展促成了一项突破性技术的出现：数字液滴聚合酶链式反应 (ddPCR)。ddPCR 提供无与伦比的精度、灵敏度和绝对定量能力，彻底改变了核酸分析的格局。

数字液滴 PCR (ddPCR) 代表了核酸定量的突破性进步，提供无与伦比的精度、灵敏度和绝对定量能力。ddPCR 的核心是先进的仪器，旨在将样本分成离散的液滴，从而实现对目标 DNA 或 RNA 分子的精确定量。

什么是 ddPCR？

什么是 ddPCR？

数字液滴 PCR (ddPCR) 是核酸定量创新的巅峰。 ddPCR 本质上是传统 PCR 的高级迭代，采用将样本分割成数千个微小液滴的新策略，每个液滴都充当独立的反应室。这种分割可以对目标 DNA 或 RNA 分子进行绝对定量，这是传统 PCR 方法无法实现的。

传统 PCR

ddPCR 的步骤

ddPCR 的步骤

ddPCR 过程通过以下步骤进行：

样本分割：

样本分割：

使用水油乳液或微流体对样本进行分割，在不同液滴内产生大量单独的反应。

扩增：

扩增：

在每个液滴内，PCR 扩增进行，通过引入 PCR 试剂（例如引物、核苷酸和 DNA 聚合酶）来实现。

终点分析：

终点分析：

数字量化：

数字量化：

数据分析：

数据分析：

ddPCR 的工作流程

原则