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通过创新推进 qPCR
研究人员从具有增强的热均匀性和更新的光学检测系统的仪器中获得一致且精确的 qPCR 数据。
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技术亮点 | 文章通过创新推动 qPCR 的发展
研究人员从具有增强的热均匀性和更新的光学检测系统的仪器中获得一致且精确的 qPCR 数据。
世界各地的科学家使用定量实时 PCR (qPCR) 来测量样本中特定核酸序列的数量。 虽然这种技术快速、灵敏且经济，但他们使用的仪器直接影响其数据的可靠性和准确性。
在 qPCR 系统中，反应块在加热和冷却之间快速切换，以获得核苷酸变性、引物退火和聚合酶介导的延伸所需的精确温度。但是，反应块温度变化的速度不仅会影响实验的持续时间，还会影响反应块的热均匀性。1 此外，许多反应块的边缘散热更快，导致样品孔之间的温度变化和数据错误。
反应块的热均匀性 1虽然 qPCR 仪器中通常使用固定光源，但它们会在反应块的各个孔之间产生不同的光路长度，从而导致数据出现差异。科学家可以通过将目标特异性荧光信号标准化为被动染料（例如 ROX 荧光染料）的信号来校正孔之间的光路差异。但是，这会减少他们使用多路复用可以同时检测的序列数量。
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