医学上重要的 Androctonus 物种毒液的酶学表征和蛋白质组学分析

医学上重要的 Androctonus 物种毒液的酶学表征和蛋白质组学分析摘要 Androctonus 属(Buthidae)的埃及蝎子由于其神经毒性毒液而产生危及生命的蜇伤。然而,它们的毒液的成分和酶活性仍然知之甚少:我们使用电泳分析了从三个 Androctonus 物种(Androctonus amoreuxi、Androctonus australis 和 Androctonus bicolor)收集的毒液的蛋白质成分。进行质谱分析来表征这些毒液中存在的肽。检查毒液的磷脂酶 A2 (PLA2)、透明质酸酶和蛋白酶活性,以评估它们对毒液毒性的潜在贡献。最后,评估了毒液的抗菌和溶血活性。三种毒液的电泳图谱显示出每个物种特有的特征,在 75、74、67、48、46、40 和 28 kDa 处观察到不同的蛋白质条带,以及在 15 kDa 标记上方的显着条带。通过液相色谱/质谱分析,分别检测了 A. amoreuxi、A. australis 和 A. bicolor 的毒液中是否存在 369、324 和 351 种分子量在 500–10,000 Da 范围内的成分。富含二硫键的肽(三个二硫桥)很丰富,但在所有毒液样本中也检测到不含二硫键的肽。所有三种毒液均表现出透明质酸酶活性

来源:Arácnido

埃及蝎子(Androctonus 属)(Buthidae 科)因其具有神经毒性的毒液而产生危及生命的蜇伤。然而,对其毒液的成分和酶活性仍知之甚少:我们使用电泳分析了从三个安德罗克托斯物种(Androctonus amoreuxi、Androctonus australis 和 Androctonus bicolor)收集的毒液的蛋白质成分。进行质谱分析来表征这些毒液中存在的肽。检查毒液的磷脂酶 A 2 (PLA 2)、透明质酸酶和蛋白酶活性,以评估它们对毒液毒性的潜在贡献。最后,评估了毒液的抗菌和溶血活性。三种毒液的电泳图谱显示出每个物种特有的特征,在 75、74、67、48、46、40 和 28 kDa 处观察到不同的蛋白质条带,以及在 15 kDa 标记上方的显着条带。使用液相色谱/质谱分析检测 A. amoreuxi,A. 毒液中是否存在分子量在 500–10,000 Da 范围内的 369、324 和 351 种成分。分别是 australis 和 A. bicolor。富含二硫键的肽(三个二硫桥)很丰富,但在所有毒液样本中也检测到不含二硫键的肽。所有三种毒液均表现出透明质酸酶活性,而蛋白酶和 PLA 2 活性要么很弱(1 µg 和 10 µg),要么无法检测到,即使在较高浓度(高达 20 µg)下也是如此。所有测定均使用按干重标准化的毒液进行,以确保蛋白质含量一致。 A. amoreuxi 和 A. australis 的粗毒液对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌 (5–10 µg) 具有抗菌活性,而 A. bicolor 则需要 10 µg。单独的 A. australis 的疏水部分(40-55 分钟)保留了这种活性。这项工作加深了我们对 Androctonus 毒液的酶和肽组成的了解,揭示了它们在药物输送方面的潜力