XiaoMi-AI文件搜索系统
World File Search System供体细胞
GFP转基因恒河猴的克隆和碱基编辑...
我们报告了通过体细胞核移植 (SCNT) 和胚胎碱基编辑克隆了一只 12 岁的转基因绿色荧光蛋白 (GFP) 猴，同时对腺嘌呤碱基编辑器 (ABE) 进行了安全性评估。我们首先展示了 ABEmax 通过在 293T 细胞中对 GFP 序列进行 A 到 G 编辑来沉默 GFP 的能力。随后，使用表达 GFP 的猴子的供体细胞，我们成功生成了 207 个 ABEmax 编辑 (SCNT-ABE) 和 87 个野生型 (SCNT) 胚胎，用于胚胎移植、基因分型以及基因组和转录组分析。使用一种名为 OA-SCNT 的新方法，对 SCNT-ABE 和 SCNT 胚胎进行比较以进行脱靶分析，而无需遗传变异的干扰。在编辑的猴胚胎中，ABEmax 不会诱导明显的脱靶 DNA 突变，但会诱导广泛的脱靶 RNA 突变，其中 35% 是外显子。研究结果为ABE的临床应用提供了重要参考。
通过细胞外囊泡调节幼稚的间充质干/基质细胞成产生胰岛素的细胞：共培养条件的优化
第一个且最研究的类别是外泌体。这些外泌体是通过入侵内体膜形成多个物体（MVB）来得出的，后者包围了许多腔内囊泡。MVB与质膜融合后释放为外泌体，大小为50–150 nm。第二个主要类型的囊泡是微泡（MV），其大于外泌体，大小为100–1000 nm。evs通过直接向外萌芽和质膜的裂变释放。第三类EV是由经历编程细胞死亡并变成碎片的细胞形成的凋亡人物。这些囊泡较大，范围从500 nm到几微米的大小[11]。evs携带蛋白质，脂质和不同类型的RNA货物，可以从供体细胞转移到受体细胞[12,13]。开创性研究表明，电动汽车货物中的功能性信使RNA（mRNA）转移到受体细胞中，可以转化为蛋白质[14,15]。这个概念得到了各种研究人员的支持[16-19]。evs还可以将microRNA（miRNA），蛋白质和脂质转移到靶细胞[20,21]。先前的研究表明，源自替代β细胞的EV可以将幼稚的MSC调节到IPC中[22]。这项研究的目的是优化源自替代β细胞和幼稚MSC的EV的共培养条件。评估了细胞/EV的比率和共培养的持续时间。
使用基因编辑方法微调免疫系统
基因组编辑技术不仅提供了研究基本细胞系统功能的前所未有的机会，而且还可以改善几种临床应用的结果。在这篇综述中，我们分析了从基础研究和临床角度来调查免疫系统的各种基因编辑技术。我们讨论了可编程核酸酶开发的最新进展，例如锌 - 纤维核酸酶（ZFN），转录激活剂样效应核酸酶（TALEN）和定期间隔的短距离短palindromic重复（CRISPR） - cas-cas相关核酶。我们还讨论了可编程核酸酶及其衍生试剂的使用，例如通过基因破坏，插入和重写T细胞和其他免疫成分的基础编辑工具来设计免疫细胞，例如天然杀手（NKS）和造血干细胞和祖细胞（HSPCS）。此外，关于嵌合抗原受体（CAR），我们描述了不同的基因编辑工具如何使健康的供体细胞可用于CAR T疗法，而不是自体细胞，而无需危害移植物抗旋转疾病或拒绝，从而导致收养细胞治疗成本降低，并立即治疗患者。我们特别注意将治疗性转基因（例如汽车）的递送到内源性基因座，以防止附带损害并提高治疗有效性。最后，我们审查了包括免疫系统重新利用在内的创新创新，这些创新促进了临床癌症免疫疗法框架内的安全和有效的基因组手术。
使用剪接切换反义寡核苷酸的视网膜炎色素炎11的精确治疗方法，以恢复PRPF31的开放阅读框架
摘要：色素性视网膜炎11是一种不可治疗的，主要遗传的视网膜疾病，由MRNA加工因子31 PRPF31中的杂合突变引起。PRPF31的表达水平与受影响家庭的不完全渗透有关；具有较高PRPF31表达的突变载体可以无症状。当前的研究探讨了反义寡核苷酸外显子跳过策略，以治疗由PRPF31外显子12中截断突变引起的RP11，因为它似乎没有编码PRPF31蛋白质功能所必需的任何域。细胞源自携带PRPF31 1205C>的患者，研究了废话突变。由1205C> A编码的PRPF31转录本由于胡说八道介导的mRNA衰变而无法检测到，相对于健康的供体细胞，PRPF31 mRNA降低了46％。反义寡核苷酸诱导的外显子12的跳过，拯救了开放式阅读框，因此在RP11患者成纤维细胞中，prpf31 mRNA上调为1.7倍。PRPF31上调的水平达到了具有相同突变的非探针载体家族成员推断出的预测的表达阈值。这项研究表明，诱导PRPF31同工型的PRPF31表达和核易位能力的保留增加。未来的研究应评估诱导的PRPF31蛋白在视网膜细胞中MRNA剪接上的功能，以验证可依延RP11引起的突变的治疗方法。
细胞外囊泡及其治疗应用
摘要：细胞外囊泡（EV）已成为分子生物学研究的迷人研究领域，具有不同的治疗应用。这些小膜结合的结构，由细胞释放到细胞外空间中，在细胞间通信中起着至关重要的作用，并具有推进医疗治疗的巨大潜力。这项研究的目的是对电动汽车的使用和治疗应用进行叙述性综述。他们独特的CHAR技术，包括稳定性，生物相容性以及遍历生物学障碍的能力，使它们成为有前途的靶向药物递送工具。通过工程电动汽车封装特定的货物分子，例如治疗蛋白，小型干扰RNA（siRNA）或抗癌药物，研究人员可以增强药物稳定性并改善对所需细胞或组织的靶向递送。这种方法可以最大程度地减少脱靶效应并提高治疗功效。基于我们的文献搜索，我们发现电动汽车可以用作预测疾病的生物标志物。尽管在理解外泌体的生物学和功能方面取得了很多进展，但仍有未解决的问题需要进一步研究。这包括确定大量生产外泌体的适当且安全的技术，确定哪种类型的细胞适合用于治疗目的的外泌体供体细胞，并研究人类研究中外泌体的安全性。总体而言，在临床上使用外泌体需要对分子信号传导级联和外泌体曲线以及生物标志物和药物递送方法的特异性和灵敏度有深入的了解。
癌症治疗转化博士学位
•每年23,000英镑的非税收年度津贴•家庭状况的学费。没有用于海外学费的额外增长资金。关于造血细胞移植（HCT）的项目是一种治疗疗法，用于多种血液癌和其他非恶性血液疾病。然而，尽管移植选择和匹配方面取得了进步，但大约40％的患者仍死于HCT后并发症。大约四分之一的人患有毁灭性疾病，称为移植物与宿主疾病（GVHD）是供体细胞攻击宿主的炎症状况。当前对GVHD的治疗主要是类固醇疗法，其比例为一定比例，但不是全部。临床前和临床研究表明，间充质基质细胞（MSC）具有减少炎症并改善类固醇难治性GVHD患者GVHD症状的能力[1]。但是，由于临床试验的结果混合在一起，因此它们的全部潜力尚未在临床上实现。MSC已被证明是非免疫原性和免疫抑制性的，可以促进组织修复和造血。已经提出了几种作用机制，即MSC可以发挥免疫调节作用的可能性。其中大多数都归因于MSC分泌的大量分子，包括IDO1，几个白介素，PGE2，PD-LS和HLA-G（HLA-G5）的可溶性形式（HLA-G5）。尽管在体外结果非常好，但患者中MSC的免疫抑制能力还是好坏参半。我们认为，通过了解MSC发挥其影响的基本机制，我们可以为临床应用生产更好的细胞产品。此外，我们将努力集中在源自脐带的MSC上，我们认为这是细胞的出色来源，因为它们的特征，生长模式以及采购它们的事实对捐助者没有任何风险。
通过精准胚胎介导的基因组编辑生产浅色、低吸热的荷斯坦弗里斯牛
背景 . 基因组编辑能够在一代内将有益的序列变异引入具有高遗传价值的动物的基因组中。这可以通过将变异引入原代细胞，然后通过体细胞核移植克隆从这些细胞中产生活体动物来实现。后一步与效率低下和由于供体细胞错误重编程而导致的发育问题有关，从而引起动物福利问题。直接编辑受精的单细胞胚胎可以规避这个问题，并且可能更好地与行业实施的基因改良策略相结合。方法 . 体外受精的合子被注射 TALEN 编辑器和修复模板，以在 PMEL 基因中引入已知的毛色稀释突变。在将经过验证的胚胎转移到受体体内发育至足月之前，通过聚合酶链反应和测序筛选注射胚胎的胚胎活检样本以查找预期的双等位基因编辑。对小牛进行基因分型，并用可见光和高光谱相机扫描其皮毛以评估热能吸收情况。主要结果 . 生产了多头具有精确编辑基因型的非嵌合型小牛，包括来自高遗传价值父母的小牛。与对照组相比，经过编辑的小牛显示出明显的毛色稀释，这与较低的热能吸收率有关。 结论 . 虽然活检筛查并不绝对准确，但可以通过胚胎介导的编辑轻松生产出非嵌合型、精确编辑的小牛。 PMEL 突变导致的较浅的毛色可以降低辐射热增益，这可能有助于减少热应激。 意义 . 该研究验证了推定的致病序列变异，以使放牧牛快速适应不断变化的环境条件。
临床政策：供体淋巴细胞输注（Medicare）
有关重要的监管和法律信息，请参阅本政策结束时的重要提醒。描述供体淋巴细胞输注（DLI）是一种免疫治疗方法，可降低同种异性造血干细胞移植（HSCT）后许多血液学恶性肿瘤的复发风险（HSCT），或者将患者混合在供体嵌合体中，供体和受体的供体细胞和受体干细胞coex coex coex coexisist Issist。在此过程中，将原始干细胞供体的供体淋巴细胞注入患者中，以引起免疫介导的移植物与肿瘤反应。由DLI治疗的血液系统恶性肿瘤可以包括但不限于慢性髓样白血病（CML），急性髓细胞性白血病（AML），急性淋巴细胞性白血病（ALL），淋巴瘤，多发性脊髓瘤和脊髓骨气发育症。本政策描述了供体淋巴细胞输注（DLI）的医疗必要性要求。标准来自国家综合癌症网络（NCCN）指南1,2,3,4,5和系统评价的组合。6,7,8,9这项政策允许DLI后HSCT降低血液系统恶性肿瘤复发的风险。在完全嵌合的情况下，不建议使用DLI产生额外的好处。dli不应用于增加供体嵌合体的唯一目的，而没有因不确定的益处加重移植物与宿主疾病（GVHD）的风险而复发的风险。10此外，处理供体淋巴细胞移植物（例如，富集，耗尽，激活）的各种技术以增强移植物与肿瘤（GVT）效应或降低GVHD正在进行研究。8不建议在临床试验之外使用这些技术，因为没有建立益处，因为要超过风险，需要进一步的研究才能广泛用于DLI。
自适应免疫和SLE
全身性红斑狼疮（SLE）是一种无法治愈的自动Mune B细胞疾病，部分是由于核抗原的无效清除和TLR途径的激活。抗体分泌细胞（ASC）的毛囊外（EF）途径被认为在小鼠和人类的致病性抗体中起着重要作用。例如，在小鼠（年龄相关的B细胞）和人（DN2细胞）中鉴定出的CD21 LO CD11C + B细胞的新型种群被认为是自动反应性EF ASC的主要来源。但是，EF ASC的发育动力学和细胞来源仍未开发。为了跟踪B细胞破裂和EF ASC生成的早期事件，建立了一种收养转移系统，其中WT B细胞被转移到富含核抗原的富含核抗原的自动反应性BCR BCR转基因564IGI宿主中。通过引入WT和TLR7缺陷B细胞的竞争种群，我们证明了EF ASC的分化需要TLR7。检查自动反应性B细胞增殖和EF ASC分化的动力学，使用了细胞跟踪标记方法。我们发现，供体B细胞至少需要7个分区才能区分EF ASC，并且TLR7缺乏的B细胞在每个分裂的WT逐渐胜过。相关地，CD21 LO CD23 -B细胞高度增殖，表达CD11C，并且对TLR7缺陷敏感。我们的解释是它们可能是EF ASC的直接发展前代。CD21的损失是通过受体阻滞而反转的，并直接与供体细胞增殖联系起来。这些发现提高了我们目前对EF衍生自动抗体产生细胞背后基本生物电路的理解，并有可能指向未来的治疗发展途径。
“以中心”和“排除”生物继承的概念
发现DNA是95年前细菌中的转化原理，几乎立即导致1）反驳旧且存在激烈的争议，因为这将需要通过环境因素来重写“生命之书”，而依靠营养，压力和2）与生存的存在，而不是存在于dna和2），而dna和2）的存在与dna的存在不同。In this opinion paper, it is intended to overcome this narrowing by the re-consideration of other cellular constituents, i.e., plasma membranes (PMs) and organelles as well as the previously identified extracellular vesicles (EVs) and micelle-like complexes, which may operate as vehicles of the transfer of so-called M(E)Ls from donor to acceptor cells, from parental to offspring有机体，作为生物遗传的非DNA问题。m（e）ls代表整合和周围膜蛋白，糖基 - 磷酸 - 磷酸磷酸蛋白质蛋白质蛋白（GPI-APS）以及与胆固醇和（糖）磷脂的结构的结构和室外构型和toplogy-exolodic and Ortologicatival and tocoluction and tocoluction and tocoluction和功能，并将其与胆固醇和（Glyco）结合在一起。无知。最近的实验研究表明，在从供体细胞中释放出来并通过受体细胞中的自组织机制（而不是自组装）转移并复制后，这些MEL会诱导新的代谢表型，例如刺激脂质和糖原合成。最关键的是，在大鼠和人类中，MEL的结构易受环境因素，例如机械扭曲，营养，这可能有助于表型可塑性和获得性特征的遗传。显然不是基于DNA和与DNA相关蛋白的修饰的那些表观遗传机制，迄今尚未在有关常见复杂疾病的发病机理的研究中得到解决。提出的意见旨在最初的鼓励，以识别和表征一些（最重要的）原因