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基于单细胞打印技术和乳液偶联分析对 CRISPR/Cas9 RANKL 敲除间充质干细胞克隆进行表征，作为单细胞克隆的低细胞工作流程
基因改造单细胞的同质性对于许多应用（例如细胞系开发、基因治疗和组织工程，尤其是再生医学应用）而言是必需的。缺乏有效分离和表征 CRISPR/Cas9 工程细胞的工具被认为是这些应用中的一个重大瓶颈。尤其是蛋白质检测技术不兼容，无法在没有先决条件大规模克隆扩增的情况下确认蛋白质表达变化，这在许多应用中造成了僵局。为了改善工程细胞的表征，我们提出了一种改进的工作流程，包括基于高产量荧光特性的单细胞打印/分离技术、基因组编辑筛选（测量测定）、评估改变的基因表达的 mRNA rtPCR 和一种称为乳化偶联的多功能蛋白质检测工具，以提供高含量、统一的单细胞工作流程。该工作流程以 RANKL 敲除永生化间充质干细胞的工程和功能验证为例，这些细胞的骨形成能力发生了改变。由此产生的工作流程经济实惠，无需大规模克隆扩增细胞，整体克隆效率高于 CRISPR/Cas9 编辑细胞的 30%。尽管如此，由于单细胞克隆在细胞发育的早期高度并行阶段得到全面表征，包括 DNA、RNA 和蛋白质水平，因此该工作流程可提供更多成功编辑的细胞以供进一步表征，从而降低开发过程中后期失败的可能性。
单细胞的转录分析揭示了新型的Rab13+内皮亚群和纤维性间充质细胞中的熟悉人骨髓
纳瓦拉（Navarra），纳瓦拉（Navarra），西班牙。。Sanitialias de Navarra（西班牙Idiwdna。4 Centro 4 Centro 4。马德里，西班牙。。6纳瓦拉的医院，西班牙帕姆普洛纳。 西班牙纳瓦拉。 9 克莱尼卡纳瓦拉大学。 西班牙西班牙。 。6纳瓦拉的医院，西班牙帕姆普洛纳。西班牙纳瓦拉。9克莱尼卡纳瓦拉大学。西班牙西班牙。。
使用脂肪组织衍生的间充质基质细胞和辛伐他汀
所有的努力都是为了最大程度地减少苦难，同时还最大程度地减少了使用的动物数量。60只动物接受了缺血/再灌注手术程序（如下所述）。大鼠分为六组。对照组（C组，n = 15）接受了手术程序，但没有接受任何治疗干预措施，因为它们被DMEM-F12（Dulbecco修饰的Eagle Medium/ Mudientrient Mediument/ Dutrient Medient Cimbure FIF-12）接种了无菌输注（Gibco™Invitrogen Corporation，USA，USA，USA）。此外，一组被用作对照，旨在研究NGAL作为IRI生物标志物的准确性的潜在使用。健康组（H组，n = 15）保持在相同的条件下，但未提交手术程序或接受任何治疗。在其余三组中，进行缺血/再灌注手术程序，以及辛伐他汀（操纵，Viaflora，butitiba，curitiba）和/或ADSC输注，口服Simvastatin（S，n = 15），ADSC Infusion（SC，n = 15），ADSC Infusion + 1 SCC + SC + SC + SC + SC + SSC + SC + SC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC + SCSSSC，
心血管疾病的预处理方法和间充质干细胞治疗的新方法
1 法国图卢兹 31059 图卢兹大学医院 CARDIOMET 研究所心脏病学系；dr.anthonymatta@hotmail.com (AM)；nader.e.vanessa@gmail.com (VN)；lebrin.m@chu-toulouse.fr (ML)；gross.f@chu-toulouse.fr (FG)； galinier.m@chu-toulouse.fr (MG) 2 卡斯里克圣灵大学医学院，卡斯里克 446，黎巴嫩 3 卡斯特尔-马扎梅跨社区医院中心心脏病学系，81100 卡斯特尔，法国 4 黎巴嫩大学药学院，贝鲁特 6573/14，黎巴嫩 5 CIC-生物疗法，图卢兹大学医院，31059 图卢兹，法国 6 INSERM I2MC—UMR1297，31432 图卢兹，法国；anne-catherine.prats@inserm.fr (A.-CP)；daniel.cussac@inserm.fr (DC) * 通信地址：roncalli.j@chu-toulouse.fr；电话：+33-56-132-3334；传真：+33-56-132-2246
脂肪衍生的间充质干细胞对大鼠腹肌腹肌肌皮瓣的生存能力的影响
简介：腹肌腹肌肌皮（TRAM）皮瓣用于乳房重建，但涉及坏死的风险。脂肪组织衍生的间充质干细胞（ADSC）可用于刺激新血管形成并降低TRAM瓣坏死的风险。AIM：确定ADSC对大鼠的TRAM瓣生存力的影响。方法：将二十四个Wistar-Epm大鼠分布成三组（n = 8）。在所有动物中均进行右尾部的小束瓣，并且是小组电车进行的唯一手术。分别在α -MEM和α -MEM -SC组中分别进行了皮内注射α -MEM培养基和含有荧光标记的ADSC的α -MEM的α -MEM的其他程序。确定了皮瓣坏死的百分比，并分别使用免疫组织化学分析和荧光显微镜评估了TRAM皮瓣中干细胞中干细胞的分布水平。结果：在α -MEM -SC组中观察到的坏死百分比低于在组和α -MEM中观察到的，分别为23.36％和50.42％和53.57％（p <0.05）。在皮瓣的IV区中，α -MEM -SC组中血管数量的数量大于其他组（p <0.05）。多个干细胞。在组TRAM或α -MEM中观察到没有干细胞。结论：ADSC提高了TRAM襟翼生存力和大鼠皮瓣IV区的血管数量。
同种异体间充质基质细胞的可接受性 -
免疫调节，9个血管生成支持，10和抗纤维性效应，11这些细胞控制再生所需的组织修复的关键第一步骤。12这些效果解释了在许多病理生理学中使用MSC的普及，特别是在免疫调节环境中使用脂肪组织（ASC）的同种异体MSC。7，13迄今为止，据报道，使用MSC进行了300多次临床试验，该试验已在ClinicalTrials.gov中完成，其中只有大约20个在第三阶段中。MSC的临床使用似乎仍然是安全的，MSC治疗与急性毒性，死亡，感染，器官系统性衰竭或恶性肿瘤之间没有关联。14 - 16然而，如果MSC的血管内/内部注射似乎是安全的，并且对某些疾病的治疗疗法，则由于对目标部位不足的归宿，可能会限制17个治疗效用。18对于许多ARD组织缺陷，同种异体MSC的局部给药适合通过原位旁分泌因子递送来支持组织修复。18此外，组织工程研究强调了支持3D生物力学在MSC促进活动中的材料的重要性，并增强了MSC的保留和存活。18，19的确，据报道，在适当的生物材料载体中提供的MSC交付，例如血小板液压凝胶，据报道在多个级别上发挥作用，包括外科凝结，新生血管造成的纤维凝块维护，新生血管造成的，免疫调节，免疫调节和导致内在幼虫的招募。20 - 23这样的载体和ASC的关联是由欧洲药品局将其分类为合并的晚期治疗医学产品。
凋亡性间充质基质细胞支持骨质核层生成，同时抑制多核巨细胞在体外形成
是由间充质基质细胞（MSC）和磷酸钙（CAP）材料组合诱导的骨再生中的，破骨细胞会作为关键细胞连接炎症和骨形成。 尽管短期植入了植入的MSC，但仍观察到有利的结果，突出了它们的主要旁分泌功能以及细胞死亡在调节其分泌物中的可能影响。 在这项工作中，我们专注于从MSC到整骨细胞的通信。 MSC播种在帽生物材料或经历诱导的凋亡中的 MSC产生了有条件的培养基，该培养基有利于人类CD14+单核细胞的破骨细胞的发展。 相反，MSC的凋亡分泌抑制了IL-4刺激后形成的炎症性多核巨细胞的发展。 使用基于质谱的定量蛋白质组学和主要细胞因子的补充免疫测定法比较了MSC在凋亡应激之前和之后MSC分泌的成分。 CXCR-1和CXCR-2配体，主要是IL-8/CXCL-8，但也建议由生长调节的蛋白CXCL-1，-2或-3作为MSC的主要塑性效应。 这些发现支持以下假设：破骨细胞是骨骼再生的关键参与者，并表明凋亡在MSC的有效性中起着重要作用。，破骨细胞会作为关键细胞连接炎症和骨形成。有利的结果，突出了它们的主要旁分泌功能以及细胞死亡在调节其分泌物中的可能影响。在这项工作中，我们专注于从MSC到整骨细胞的通信。MSC播种在帽生物材料或经历诱导的凋亡中的 MSC产生了有条件的培养基，该培养基有利于人类CD14+单核细胞的破骨细胞的发展。 相反，MSC的凋亡分泌抑制了IL-4刺激后形成的炎症性多核巨细胞的发展。 使用基于质谱的定量蛋白质组学和主要细胞因子的补充免疫测定法比较了MSC在凋亡应激之前和之后MSC分泌的成分。 CXCR-1和CXCR-2配体，主要是IL-8/CXCL-8，但也建议由生长调节的蛋白CXCL-1，-2或-3作为MSC的主要塑性效应。 这些发现支持以下假设：破骨细胞是骨骼再生的关键参与者，并表明凋亡在MSC的有效性中起着重要作用。MSC产生了有条件的培养基，该培养基有利于人类CD14+单核细胞的破骨细胞的发展。相反，MSC的凋亡分泌抑制了IL-4刺激后形成的炎症性多核巨细胞的发展。使用基于质谱的定量蛋白质组学和主要细胞因子的补充免疫测定法比较了MSC在凋亡应激之前和之后MSC分泌的成分。CXCR-1和CXCR-2配体，主要是IL-8/CXCL-8，但也建议由生长调节的蛋白CXCL-1，-2或-3作为MSC的主要塑性效应。这些发现支持以下假设：破骨细胞是骨骼再生的关键参与者，并表明凋亡在MSC的有效性中起着重要作用。
基于间充质干细胞的神经性疼痛细胞治疗的进展和挑战
神经性疼痛（NPP）是由对体感神经系统损害引起的。其突出的症状是自发疼痛，痛觉过敏和异常疼痛。这种疼痛是持久且难以忍受的，严重影响了患者的生活质量。目前，止痛药对NPP的临床治疗效果仍然不理想，它也无法修复受损的神经并获得长期治疗结果。近年来，细胞疗法在疼痛领域的应用产生了令人鼓舞的结果，包括临床前研究和临床试验。间充质干细胞（MSC）是源自中学的多能祖细胞。他们具有自我更新和分化为多种细胞类型的能力，并已被广泛研究和应用于神经增生医学领域。MSC通过调节靶细胞中的多个过程，包括免疫调节，抗炎性特性，促进轴突再生，再生髓鞘再生，促进血管生成以及促进神经亲子性因素。此外，MSC还可以释放外泌体，这可能是其镇痛作用的一部分。从MSC得出的外泌体也具有母细胞的功能特性，并且具有通过促进细胞增殖，调节炎症反应，减少细胞死亡，促进轴突再生和血管生成的治疗潜力来治疗NPP。因此，在本文中，我们讨论了NPP的当前治疗策略，并探讨了MSC在NPP治疗中的功能和机制。我们还分析了MSC在NPP临床试验中的应用中的当前问题和挑战。
间充质基质细胞的治疗潜力 -
Alexandre Sitbon，Pierre-Romain Delmotte，Claire Goumard，CéliaTurco，JérémieGautheron等。间充质基质细胞衍生的细胞外囊泡在肝衰竭和边缘肝移植康复中的治疗潜力：范围审查。Minerva Anestesiologica，2023，89（7-8），10.23736/S0375-9393.23.17265-8。hal-04385821
脐带衍生的间充质基质细胞疗法...
低出生体重（LBW）增加了神经发育障碍（NDDS）的风险，例如注意力缺陷/多活化障碍和自闭症谱系障碍，以及脑瘫，不存在预防性措施。胎儿和新生儿中的神经炎症在NDD中起着主要的致病作用。同时，脐带衍生的间充质基质细胞（UC-MSC）具有免疫调节特性。因此，我们假设在产后早期的全身服用UC-MSC可能会减弱神经炎症，从而阻止NDD的出现。受到轻度子宫内灌注不足的大坝所生的LBW幼崽在单突触反应中表现出明显降低，并且从产后第4天（P4）到P6的刺激频率增加，从而提高了静脉内治疗性，这提示了人类UC-MSSC（1 c-M-Scs）的不良细胞（提示）。在青春期的三座社交测试表明，只有LBW雄性表现出令人不安的社交能力，这往往可以通过UC-MSC治疗来改善。其他参数，包括通过开放式测试确定的参数，并未通过UC-MSC处理可显着改善。血清或脑脊液水平的促炎细胞因子的水平未升高，而LBW幼崽中的血清或脑脊液水平并未升高，UC-MSC治疗不会降低这些水平。总而言之，尽管UC-MSC治疗可防止LBW幼犬过度兴奋，但对NDD的有益效果是边缘的。