细胞活力测定试剂盒,绿色/红色荧光提供了一种方便而健壮的方法,可以通过使用两种荧光染料,钙调钙钙钙钙蛋白盐AM和碘化丙啶,从而确定细胞活力,从而可以同时检测和区分可行的和不可行的细胞。作为荧光染料,钙软糖AM最初是非荧光的。被动地进入细胞后,仅存在于活细胞中的细胞内酯酶,将小钙蛋白AM水解为钙调钙蛋白(Bratosin等人)。绿色荧光的强度与酯酶活性量成正比,因此可以与活细胞的数量相关。碘化丙啶是第二种氟化染料;但是,与钙软糖不同,它只能越过死亡细胞的受损膜。进入死细胞后,碘化丙啶在与DNA结合时会产生红色。该试剂盒中的染料非常适合与荧光显微镜或荧光微孔板读取器一起使用,该板板读取器能够在FITC(适用于钙调蛋白)和TRITC(用于碘化丙啶)通道中检测。该测定法可以检测和量化粘附或悬浮培养物中的细胞增殖,或将其纳入体外细胞毒性测定法。
共形唑唑是一种由两个活性原理组成的抗菌药物,磺胺甲恶唑和甲氧苄啶。磺胺甲恶唑是二氢蛋白酶合成酶的竞争抑制剂。磺胺甲恶唑竞争性地抑制para-氨基苯甲酸(PABA)在通过细菌细胞合成二氢叶酸中的利用,从而导致抑菌性细胞。三甲苄啶可逆地抑制细菌二氢叶酸还原酶(DHFR),这是一种活跃于叶酸代谢途径中的酶,将二氢叶酸转化为四氢叶酸。取决于效果可能是杀菌性的。因此,三甲氧苄啶和磺胺甲恶唑在嘌呤的生物合成中连续两步,因此对许多细菌必不可少的核酸。此作用在两种药物之间产生体外活性的明显增强。
醋酸钙 IF001-00 醋酸地塞米松 IF002-00 醋酸地塞米松乳膏 EF001-00 醋酸氢化可的松 IF003-00 醋酸甲羟孕酮 IF004-01 醋酸钠 IF005-00 乙酰唑胺 IF006-00 乙酰半胱氨酸 IF007-00 N-乙酰-L-蛋氨酸 IF008-00 阿昔洛韦 IF009-00 阿昔洛韦片 EF002-00 阿昔洛韦乳膏 EF003-00 乙酰水杨酸 IF010-01 乙酰水杨酸片 EF004-00 抗坏血酸IF011-01 抗坏血酸片 EF005-00 抗坏血酸注射液 EF006-00 苯甲酸 IF012-01 硼酸 IF013-00 柠檬酸 IF014-00 脱氢胆酸 IF015-00 硬脂酸 IF016-00 叶酸 IF017-00 叶酸片 EF007-00 磷酸 IF018-00 乳酸 IF019-00 甲芬那酸 IF020-01 萘啶酸 IF021-00 萘啶酸片 EF008-00 萘啶酸口服混悬液 EF009-00烟酸 IF022-01 对氨基苯甲酸 IF023-00 水杨酸 IF024-01 山梨酸 IF025-00 三氯乙酸 IF026-00 十一烯酸 IF027-00 腺苷 IF028-01 琼脂 IF029-00 灌溉用无菌水 IF030-00 注射用水 IF031-00 纯净水 IF032-00
补充图 4:用 0.45 μM(JURKAT)和 0.72 μM(P12-ICHIKAWA)5Z7O 孵育 48 小时的 JURKAT 和 P12-ICHIWAKA 细胞的 DNA 含量分析。碘化丙啶 (PI) 染色的流式细胞术分析。
摘要:由于抗药性的不断出现和蚊媒的适应性,疟疾的管理和控制仍然具有挑战性。这需要不断发现有效的抗疟药物。恶性疟原虫的乳酸脱氢酶 (Pf LDH) 是寄生虫能量产生的重要催化剂。Pf LDH 是抗疟药物设计和发现的重要靶点,因为抑制它会导致寄生虫死亡。在本研究中,通过分子对接筛选了 15 种对氯喹敏感和氯喹抗性的恶性疟原虫菌株有效的 10-脒基苯并萘啶分子,以找到 Pf LDH 的主要抑制剂。化合物的结合亲和力范围为 -5.5 至 -7.8kcal/mol。对结合亲和力最高的化合物进行修饰,设计了九种新型 10-脒基苯并萘啶。设计的化合物对靶标具有更好的结合亲和力,范围从 -7.8 到 -8.8kcal/mol,其中四种化合物的结合亲和力优于 10-脒基苯并萘啶抗疟药 Pyronaridine。此外,通过计算机模拟预测了设计化合物的 ADME 特性,并使用 Lipinski 的五规则和 Veber 的二规则研究了它们的药物相似性。根据这些规则,化合物 D1、D2、D3、D4、D5 和 D8 是潜在的口服候选药物。化合物 D2、D3 和 D8 具有良好的结合亲和力和 ADME 特性,因此可以开发成针对 Pf LDH 的强效抗疟药。这项工作的结果可用于开发能够抑制 Pf LDH 的活性抗疟药。关键词:分子对接,10-脒基苯并萘啶,恶性疟原虫乳酸脱氢酶,ADME 特性,计算机药物设计 1. 简介 疟疾是世界热带和亚热带地区常见的一种传染病,在非洲很流行,2022 年全球 94% 的病例都发生在非洲 [1]。该地区疟疾负担最重的原因可能是卫生条件差,导致媒介(雌性按蚊)繁殖,从而将寄生虫(疟原虫)在人与人之间传播。根据世卫组织 2023 年世界疟疾报告,尼日利亚占全球疟疾病例和死亡人数的 27% 和 31%,是世界上疟疾病例和死亡人数最多的国家 [1]。恶性疟原虫
图 1. 最佳条件基于细胞存活率和靶向敲除率。根据上述方案,每次电穿孔用含有靶向人 CD19 的 crRNA 的 RNP(从针对不同 B 细胞系中细胞内和细胞外标志物的 30 多种 crRNA 筛选中选择)转染 100 万个 Ramos 细胞。(A)电穿孔后的第二天,用 2.5 μg/mL 碘化丙啶(BioLegend,产品目录号 421301)对部分细胞染色,并通过流式细胞术进行分析。(B)电穿孔五天后,用 2.5 μg/mL Alexa Fluor ® 647 抗人 CD19(BioLegend,产品目录号 302220,克隆 HIB19)加碘化丙啶对部分细胞染色,并通过流式细胞术进行分析。对照 = 未经电穿孔的细胞:RNP 混合物。数据由德国弗莱堡大学的 Marco Cavallari 博士提供。
结果:根据CRA方法,发现150NFGN细菌分离株中有71个(47.33%)是生物膜阳性的。根据ST方法,使用Crystal Violet染料的ST方法,发现分离株的57(38%)是生物膜阳性,根据MP方法为61(40.7%)。65(43.3%)使用SAFRANINE染料根据ST方法检测到生物膜阳性,分别根据MP方法检测到83(55.3%)。确定生物膜阳性抗体抗体菌株对阿莫西林 - 克拉烷酸的抗性为88.89%和甲氧苄啶 - 磺胺甲氧唑87.04%。确定生物膜阳性铜绿假单胞菌菌株对阿莫西林 - 克拉维拉酸的抗性为82.86%,对甲氧苄啶 - 磺胺甲氧唑的抗性为85.72%。表明,除了结肠癌和头孢唑酮 - 磺胺硫酸链霉菌外,头菌芽孢杆菌分离株对所有抗菌药物表现出100%耐药性。
图 1:动态 BH3 分析可预测不同 RMS 细胞系的化疗敏感性。(A)CW9019 细胞与治疗剂孵育 36 小时后 DBP 测定的结果。以 ∆% priming 表示的结果表示与对照细胞相比引发的增加。(B)CW9019 细胞与化疗剂孵育 96 小时后 Annexin V 和碘化丙啶/DAPI 染色和 FACS 分析导致细胞死亡。(C)RD 和 RH4 细胞与治疗剂孵育 36 小时后 DBP 测定的结果。以 ∆% priming 表示的结果表示与对照细胞相比引发的增加。(D)RD 和 RH4 细胞与化疗剂孵育 96 小时后 Annexin V 和碘化丙啶/DAPI 染色和 FACS 分析导致细胞死亡。 (E) 左图显示 36 小时时 ∆% 启动和 96 小时时 % 细胞死亡之间的相关性。右侧显示接收者操作特征曲线分析。值表示至少三次独立实验的平均值 ± SEM。** p<0.01 和 * p<0.05。
Allegra 1 1 比沙可啶灌肠剂 2 ChewQ 辅酶 Q10 10 1 希爱力 3 氯米芬 1 Cyto-B7 2 Yes Dexa Plus 胶囊 1 Dyrenium 1 Enemeez Mini 灌肠剂 4 红霉素复合剂 1 Glytactin Build 1 Glytactin Complete 15 1 Glytactin Restore 1 戈舍瑞林 (Zoladex) 1 1 Humatin (硫酸巴龙霉素) 2
