图1:A。本研究中使用的颗粒和实验方案的特征。从上到下:VLP HIV,像人免疫缺陷病毒的粒子一样; MLV,鼠白血病病毒; HBV,肝素B病毒; AAV,Adeno相关病毒(血清型8和9);电动汽车,细胞外囊泡。需要荧光标记颗粒:可以通过基因组修饰(HIV和MLV的GFP标记)或直接通过在样品中添加荧光团(AAV和HBV的Yoyo-1,EVS的DIO)来实现。潜在的细胞DNA在VLP HIV和EV中以红色表示,MLV中的粉红色病毒RNA和HBV和AAV中的紫色病毒DNA表示。然后将样品稀释。大小由NTA确定HIV,MLV和EVS,以及AAV 37和HBV 38的冷冻EM重建。B.零模式波导设置,用于通过纳米孔转移的颗粒。顺式腔室包含荧光标记的颗粒。在施加压力时,颗粒在跨室中的孔中推动,并在孔末端越过evanevencent的田地区域时照亮。一旦他们离开了毛孔,他们就没有专心和漂白。C.事件的荧光演变是时间和粒子出口快照的函数。归一化强度表示为AAV时间的函数(紫罗兰和红点,平均在n = 50事件上)。通过最大强度分配强度获得归一化强度。时间在事件开始时被重新缩放至零,红点与事件发生前的强度相对应。指数衰减以蓝色表示。孔径400 nm,施加压力为0.5 mbar。帧速率:112 fps。插图:图像尺寸= 10 µm。
(未经同行评审认证)是作者/资助者。保留所有权利。未经许可不得重复使用。此预印本的版权所有者此版本于 2025 年 1 月 24 日发布。;https://doi.org/10.1101/2025.01.22.634193 doi:bioRxiv preprint
与其他细胞内贩运途径相比,生物合成分泌途径的调查尤其具有挑战性,因为它的代表性不足。在这里,我们使用选择性钩(Rush)与CRISPR-CAS9基因编辑方法(ERUSH)合并了保留率,并将Rab7-Harboring囊泡鉴定为Neosynthised Translrin受体(TFR)的Golgi – Plasmambrane转运的重要中间室。这些囊泡没有表现出降解性能,也不与Rab6a-Harboring囊泡有关。rab7a与含有新合成TFR的后加尔基囊泡瞬时相关,但在与质膜融合之前解离。一起,我们的研究揭示了Rab7在TFR的生物合成分泌途径中的作用,强调了分泌囊泡性质的多样性。
致谢该项目是通过大学在纽约州布法罗大学的支持和罗斯威尔公园综合癌症中心流量和图像细胞仪共享资源而实现的。如果没有Maggie Vogel-Cryan,LVT和Beth Palka的出色技术支持,这些研究就无法完成。我们承认将生物者用于人物设计。
随着围产期护理的持续改善,可行的早产儿的数量正在逐渐增加,以及早产相关疾病的增加,例如坏死性小肠结肠炎,支气管肺发育异常,围产期脑脑损伤,预性脑病,预性过早以及SEPIS。由于早产儿的独特病理生理学,诊断和治疗这些疾病变得尤为具有挑战性,显着影响其生存率和长期生活质量。细胞外囊泡(EV)作为细胞间交流的关键介体,在这些疾病的病理生理学中起着重要的调节作用。由于其生物学特征,电动汽车可以作为早产相关疾病的生物标志物和潜在的治疗剂。本综述总结了电动汽车的生物学特性,它们与早产相关疾病的关系及其诊断和治疗的前景。evs面临临床应用的独特挑战和机会。
摘要:细胞外囊泡的分泌,EVS,是原核生物和真核细胞的常见过程,用于细胞间交流,生存和发病机理。先前的研究表明,来自细菌纯培养物的上清液中的EV存在,包括革兰氏阳性和革兰氏阴性的聚糖降解肠道分子。但是,复杂微生物群落分泌的电动汽车的隔离和表征尚未清楚地报告。在最近的一篇论文中,我们表明,木材衍生的复杂β -mannan与常规饮食纤维具有结构性相似,可用于调节猪肠道肠道菌群的组成和活性。在本文中,我们研究了24小时在复合β -Mannan富集后,猪粪便菌群分泌的EV的产生,大小,组成和蛋白质组。使用透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析,我们以165 nm的平均大小识别电动汽车。我们利用猪蛋白的基于质谱的元蛋白质蛋白基于猪蛋白的数据库,并从猪群中鉴定出355个元基因组组装的基因组(MAG),从而鉴定出303蛋白。对于从β -mannan生长的培养物中分离出来的EV,大多数蛋白质映射到两个MAGS MAG53和MAG272,分别属于梭菌和细菌。此外,具有第三次蛋白质的MAG为MAG 343,属于肠杆菌阶。在β -Mannan EV蛋白质组中检测到的最丰富的蛋白质参与了翻译,能量产生,氨基酸和碳水化合物转运以及代谢。总体而言,这项概念验证研究表明,从复杂的微生物群落中释放出的电动汽车的成功隔离。此外,电动汽车的蛋白质含量反映了特定微生物对可用碳水化合物源的响应。
保留所有权利。未经许可就不允许重复使用。永久性。预印本(未经同行评审证明)是作者/资助者,他已授予Medrxiv的许可证,以在2025年2月6日发布的此版本中在版权所有者中显示预印本。 https://doi.org/10.1101/2025.02.05.25321729 doi:medrxiv preprint
大自然是科学家取之不尽的灵感源泉。仿生方法的发展目标是重现生物体所表现出的特定特征,以实现目标功能。合成生物学从生物系统中汲取灵感,目的是重新设计它们,甚至构想出具有特定能力的新型人工生物系统。这种自下而上的方法导致了人工细胞和组织的制造 1-4 。这种方法不仅有利于开发有前景的生物医学或制药应用,而且对基础研究也很有价值。人工细胞的操作适用于研究细胞特性或细胞机制,由于其固有的复杂性或多因素性 5-7 ,使用活细胞来解决这些问题具有挑战性。在这种背景下,人们开发出了多种简化的仿生人工细胞,其复杂程度降低。虽然这些细胞模型在结构上可以多种多样(液滴、凝聚层、脂质体、聚合物囊泡 1,8 ),但巨型单层囊泡 (GUV) 是最相关的仿生原型之一 9 。GUV 由磷脂半透性双层构成。生化膜成分可以通过使用特定的脂质混合物和加入膜蛋白来随意丰富。然而,GUV 是还原论的细胞模型,因为它们是被动物体,不能主动移动、交换,也不能表现出机械转导机制、繁殖或死亡。囊泡是软物体,其膜弯曲模量约为
3 3干细胞和发育生物学系,罗扬干细胞生物学研究中心,伊朗德黑兰的ACECR干细胞生物学与技术研究所,4个微生物学系,生物科学学院,北德黑兰分公司,伊斯兰阿萨德大学,伊斯兰教大学,伊朗,伊朗伊斯兰大学,伊斯兰教室,伊斯兰教室,伊斯兰教室,伊斯兰教和科学技术学系。伊斯法罕,伊朗,伊朗,6个细胞和分子研究中心,QOM医学科学大学,伊朗QOM,伊朗,7神经系统干细胞研究中心,semnan医学科学大学,伊朗Semnan,伊朗8号,医学微生物学系8医院,伊朗凯尔曼哈3干细胞和发育生物学系,罗扬干细胞生物学研究中心,伊朗德黑兰的ACECR干细胞生物学与技术研究所,4个微生物学系,生物科学学院,北德黑兰分公司,伊斯兰阿萨德大学,伊斯兰教大学,伊朗,伊朗伊斯兰大学,伊斯兰教室,伊斯兰教室,伊斯兰教室,伊斯兰教和科学技术学系。伊斯法罕,伊朗,伊朗,6个细胞和分子研究中心,QOM医学科学大学,伊朗QOM,伊朗,7神经系统干细胞研究中心,semnan医学科学大学,伊朗Semnan,伊朗8号,医学微生物学系8医院,伊朗凯尔曼哈
摘要在全球范围内,估计在2000 - 2022年期间避免了21亿疟疾病例和1,170万疟疾死亡。明显地,尽管有效的控制测量值,但在2022年,在85个疟疾 - 流行国家中估计有2.49亿个疟疾病例,与2021年相比增加了500万例。进一步了解人类疟疾的生物学,流行病学和发病机理对于实现疟疾消除至关重要。细胞外囊泡(EV)是膜封闭的纳米颗粒,在细胞间通信中关键,并由所有细胞类型分泌。在这里,我们将回顾有关疟疾中电动汽车的目前所知,从生物发生和货物到病理生理学的分子见解。相关性,蛋白质组学货物的荟萃分析以及体外和体内人类研究之间的比较揭示了患者报道的少数研究的差异。因此,表明需要严格的方法论和过渡到人类感染以阐明其生理作用。我们最后关注诊断和疫苗开发的转化方面,并突出疟疾研究中电动汽车知识的关键差距。
