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使用合成 RNA 作为 RNA 直接测序中 poly(A) 长度推断的基准
多聚腺苷酸化是一个动态过程，在细胞生理学中非常重要。Oxford Nanopore Technologies 的直接 RNA 测序提供了一种对全长 RNA 分子进行测序以及对转录组和表观转录组进行分析的策略。目前有几种可用于 poly(A) 尾长估计的工具，包括 tailfindr 和 nanopolish 等成熟工具，以及两种较新的深度学习模型：Dorado 和 BoostNano。然而，这些工具的准确性与金标准数据集的基准测试有限。在本文中，我们使用合成 RNA 标准（Sequins）评估了四种 poly(A) 估计工具，这些标准具有已知的 poly(A) 尾长，并提供了一种衡量 poly(A) 尾长估计准确性的有效方法。所有四种工具生成的平均尾长估计值都在正确值的 12% 以内。总体而言，由于 Dorado 运行时间相对较快、变异系数低并且易于使用且可与碱基调用集成，因此被推荐作为首选方法。
产品表HK-Crispr-Nup188-MEGFP细胞| 300657
亚培养物从粘附细胞中去除旧培养基，并用缺乏钙和镁的PBS洗涤它们。对于T25烧瓶，使用3-5毫升PBS，对于T75烧瓶，使用5-10毫升。然后，使用1-2 mL对T25烧瓶完全覆盖细胞，T75烧瓶2.5 mL。让细胞在室温下孵育8-10分钟以将其分离。孵育后，将细胞与10 ml培养基轻轻混合以重悬于它们，然后以300xg离心3分钟。丢弃上清液，将细胞重悬于新鲜培养基中，然后将其转移到已经包含新鲜培养基的新瓶中。
产品表CélulasT406 | 300361 产品表CélulasNIH-3T3-RAS | 400100 产品表Cellule U2OS-CRISPR-NUP96-HALO | 300448 产品表Komórkiu2os-crispr-nup96-snap 产品表célulasasb-xiv | 400120 产品表HK-Crispr-CAP-H-MEGFP细胞| 301568
亚培养物从粘附细胞中去除旧培养基，并用缺乏钙和镁的PBS洗涤它们。对于T25烧瓶，使用3-5毫升PBS，对于T75烧瓶，使用5-10毫升。然后，使用1-2 mL对T25烧瓶完全覆盖细胞，T75烧瓶2.5 mL。让细胞在室温下孵育8-10分钟以将其分离。孵育后，将细胞与10 ml培养基轻轻混合以重悬于它们，然后以300xg离心3分钟。丢弃上清液，将细胞重悬于新鲜培养基中，然后将其转移到已经包含新鲜培养基的新瓶中。
产品表HK-2XCRISPR-CAP-D2-MEGFP-CELLEN
亚培养从粘附细胞中去除旧培养基，并用无钙和镁的PBS洗涤它们。使用3-5毫升PBS进行T25瓶，T75瓶子使用5-10毫升。然后用电池完全覆盖电池，用1-2 mL盖住T25瓶，T75瓶的2.5毫升。让细胞在室温下产生8-10分钟，以松开它们。孵育后，将细胞与10 ml培养基仔细混合，以重悬于它们，然后以300xg离心3分钟。扔掉上清液，将细胞重悬于新鲜培养基中，然后将其转移到已经包含新鲜培养基的新瓶中。
产品表BHK-21克隆13个细胞| 603126
亚培养物从粘附细胞中去除旧培养基，并用缺乏钙和镁的PBS洗涤它们。对于T25烧瓶，使用3-5毫升PBS，对于T75烧瓶，使用5-10毫升。然后，使用1-2 mL对T25烧瓶完全覆盖细胞，T75烧瓶2.5 mL。让细胞在室温下孵育8-10分钟以将其分离。孵育后，将细胞与10 ml培养基轻轻混合以重悬于它们，然后以300xg离心3分钟。丢弃上清液，将细胞重悬于新鲜培养基中，然后将其转移到已经包含新鲜培养基的新瓶中。
柔韧的方法 - 核心部分。 ...
1。将婴儿越过垂悬到母亲的胸部。助产士随后有助于将婴儿定位为直接皮肤接触皮肤，并用毛巾干燥并干燥。2。通过抛弃垂悬的手术窗口，将婴儿在垂垂下方。助产士或女人本人伸手去拿婴儿，并在母亲的乳房之间定下婴儿的头，腿在蛙的腹部顶部处于青蛙腿的位置。然后将额外的无菌垂体（请参阅附录B）置于手术区域以维持无菌性。这种方法的优点是婴儿在母亲的胸部采用更自然和舒适的位置，而不是像选项1一样向下滑向脖子。
产品表HK-Crispr-CAP-H2-MEGFP No.67Células
亚培养物从粘附细胞中去除旧培养基，并用缺乏钙和镁的PBS洗涤它们。对于T25烧瓶，使用3-5毫升PBS，对于T75烧瓶，使用5-10毫升。然后，使用1-2 mL对T25烧瓶完全覆盖细胞，T75烧瓶2.5 mL。让细胞在室温下孵育8-10分钟以将其分离。孵育后，将细胞与10 ml培养基轻轻混合以重悬于它们，然后以300xg离心3分钟。丢弃上清液，将细胞重悬于新鲜培养基中，然后将其转移到已经包含新鲜培养基的新瓶中。
产品表HK-Crispr-CAP-D3-MEGFP细胞| 301573
亚培养物从粘附细胞中去除旧培养基，并用缺乏钙和镁的PBS洗涤它们。对于T25烧瓶，使用3-5毫升PBS，对于T75烧瓶，使用5-10毫升。然后，使用1-2 mL对T25烧瓶完全覆盖细胞，T75烧瓶2.5 mL。让细胞在室温下孵育8-10分钟以将其分离。孵育后，将细胞与10 ml培养基轻轻混合以重悬于它们，然后以300xg离心3分钟。丢弃上清液，将细胞重悬于新鲜培养基中，然后将其转移到已经包含新鲜培养基的新瓶中。
产品表HK-Crispr-Nup188-MEGFP Cellen | 300657 产品表CélulasHCC78 | 302156 产品表CélulasNeuro-2a | 400394 产品表CélulasT406 | 300361 产品表CélulasNIH-3T3-RAS | 400100 产品表Cellule U2OS-CRISPR-NUP96-HALO | 300448 产品表Komórkiu2os-crispr-nup96-snap 产品表célulasasb-xiv | 400120 产品表HK-Crispr-CAP-H-MEGFP细胞| 301568
亚培养从粘附细胞中去除旧培养基，并用无钙和镁的PBS洗涤它们。使用3-5毫升PBS进行T25瓶，T75瓶子使用5-10毫升。然后用电池完全覆盖电池，用1-2 mL盖住T25瓶，T75瓶的2.5毫升。让细胞在室温下产生8-10分钟，以松开它们。孵育后，将细胞与10 ml培养基仔细混合，以重悬于它们，然后以300xg离心3分钟。扔掉上清液，将细胞重悬于新鲜培养基中，然后将其转移到已经包含新鲜培养基的新瓶中。