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其缺陷主要有:(1)对DNA片段浓度要求较高,尤其对于一些细胞膜致密的菌株,由于摄取效率低,进入细胞的DNA量往往达不到同源重组的最低标准,导致基因敲除失败。而且电转化会造成大量细胞死亡,而剩余的细胞达不到所需浓度,导致敲除失败。(2)Red系统需要从菌体中消除重组酶表达载体,以便后续引入另一个表达FLP重组酶的载体,该载体需要再次消除,最终产生无标记突变体。总之,这种基于λ-Red重组的方法
在视觉研究所内的概况,这是世界领导者之一,研究了视力和病理的研究,光子学系正在努力开发技术,这将有助于明天的生物学和诊断特征的工具。“ 3D显微镜”团队包括3个(教师 - )永久研究人员,自2017年以来已在视力研究所安装。初级教授是一名培训物理学家,在仪器光学,物理光学和显微镜方面具有丰富的经验,将开发高级的研究活动,以开发敏感,特异性且无标记允许3D成像或检测生物学或人造物体。短期或中期,所指的应用将与视力研究所的生物学和临床主题有关。
摘要 抗药抗体 (ADA) 的形成是治疗 X 连锁出血性疾病血友病 B(凝血因子 IX,FIX 缺乏)的主要并发症。当前的临床免疫耐受方案通常由于并发症(例如对 FIX 的过敏反应)而无效。基于植物的口服耐受诱导可能会解决这一问题,正如最近首次通过口服植物细胞治疗花生过敏的监管批准所表明的那样。我们之前的研究表明,口服表达与叶绿体中的透粘膜载体 CTB(霍乱毒素亚基 B)融合的 FIX 的植物细胞可抑制患有血友病 B 的动物的 ADA。我们在此报告了在没有抗生素抗性基因的情况下创建的第一个表达凝血因子的莴苣转塑性系。在 T1 和 T2 代无标记植物中,CTB-FIX 基因和同质性(每个细胞中转化约 10,000 个拷贝)的稳定整合得以维持。在 T1 和 T2 无标记植物的冻干叶中,CTB-FIX 表达为 1.0 – 1.5 mg/g 干重,证实标记切除不会影响抗原水平。以 0.25、1 或 2.5 mg/kg 的剂量给 Sprague Dawley 大鼠口服 CTB-FIX 不会产生明显的不良反应或毒性。大鼠单次口服给药的无可见不良反应水平 (NOAEL) 至少为 2.5 mg/kg。以 0.3 或 1.47 mg/kg 的剂量给比格犬口服 CTB-FIX(混合在食物中或作为口服混悬液)不会产生任何可观察到的毒性。这些毒理学研究应有助于提交监管部门批准文件和对乙型血友病患者的评估。
在我们的实验室中,我们致力于开发用于检测蛋白质和核酸的电子生物传感器。这些传感器由基于功能化导电纳米碳材料(例如原子级厚度的石墨烯或碳纳米管)的场效应晶体管 (FET) 器件制成。纳米碳 FET 是一种用于定量检测生物标志物的有前途的技术,具有简单、低成本制造和无标记实时电读数等独特优势。本次实习的目标是优化生物分子和石墨烯器件之间的表面相互作用,结合使用纳米传感器的电测量、高分辨率表面显微镜和/或计算方法。这些实验将用于优化这些传感器检测癌症生物标志物的灵敏度指标。
在本信中,我们介绍了基于五叠自组装 InAs/InAlGaAs 量子点作为活性介质的长波长微盘激光器,这些量子点通过固体源分子束外延在 InP(001)衬底上生长。直径为 8.4 lm 的量子点微盘激光器在脉冲光泵浦条件下在室温下工作。实现了 1.6 lm 的多波长激光发射,低激光阈值为 30 lm W,品质因数为 1336。通过收集到的近场强度分布的“S”形 L-L 曲线、线宽变窄效应和强散斑图案验证了激光行为。所展示的具有低阈值和超紧凑占地面积的长波长激光器可以在集成气体检测和高度局部化的无标记生物和生化传感中找到潜在的应用。
光遗传学领域促进了光学神经接口的发展,将光传送到大脑中[1–6],神经活动的基因编码荧光指示剂(GEI)的出现使得特定细胞类型化学化合物的监测成为可能,包括Ca 2 + [7–9]和几种神经递质,包括谷氨酸[10–13],γ -氨基丁酸(GABA),[14]血清素,[15]多巴胺,[16,17]乙酰胆碱[18]和去甲肾上腺素[19]。这些报告基因在揭示神经递质动力学、突触分辨率[20,21]和神经探针装置方面取得了相当大的成功。[22–25]然而,使用外源性报告基因仍然是一种间接的研究生物系统的方式,这增加了额外的复杂性,甚至改变了系统的天然状态。 [26,27] 因此,神经科学领域将从无标记方法光学探测神经递质动力学中受益匪浅。[28,29]
摘要:无标记直接光学生物传感器(如表面等离子体共振 (SPR) 光谱)已成为集中实验室生化分析的黄金标准。基于光子集成电路 (PIC) 的生物传感器基于相同的物理传感机制:衰减场传感。如果能够克服从研究实验室转移到工业应用的挑战,基于 PIC 的生物传感器可以在医疗保健中发挥重要作用,尤其是对于即时诊断。研究正处于这一门槛,这为卫生和环境领域的创新现场分析提供了巨大的机会。通过将创新的 PIC 技术与成熟的 SPR 光谱进行比较,可以更深入地了解它。在本文中,我们简要介绍了这两种技术,并揭示了它们的异同。此外,我们回顾了一些最新进展,并从表面功能化和传感器性能方面比较了这两种技术。
植物细菌病原体的诊断经历了从基于文化的策略到无文化检测的跨越发展。常规诊断,这种基于PCR的方法和基于PCR的方法非常敏感,可以在后期鉴定自然感染的农作物中富含富集的病原体。然而,它们遭受了与速度,信号强度以及实际植物提取物中灵敏度显着降低有关的缺点。通过开发标记和未标记的光谱法,已经取得了进展来解决这些挑战。特别是微拉曼光谱可以在单细胞水平上快速,无标记和无创的病原体歧视。全面的光谱数据库始终是识别的先决条件,但是这些基于光谱的方法不足以检测以前未知的植物病原体。单细胞测序和合成生物学的进步开始解决这些关键问题,并用于相关的实际应用中。成功将继续在学科之间的接口上找到。
具有无标记红外量子显微镜的成像可以打开检测肿瘤的新方法。与红外范围内的常规方法相反,此处的检测原理基于所谓的非检测光,在该光中,样品与红外光相互作用,但是在可见的表格范围内检测非常敏感。Quancer项目是将该技术与专业显微镜系统相结合的第一步,并在大学医院的临床实践中对其进行测试。Leibniz IPHT与Friedrich Schiller大学,Fraunhofer Iof,Rapp OptoelectRonic GmbH和其他知名机构一起参与了该项目。目标:更精确和有效的肿瘤诊断。在五年内预算为670万欧元,由BMBF作为灯塔项目资助,Quancer承诺在医疗成像方面取得重大进展,并可以改善对癌症的早期发现。