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表皮生长因子增强的新型转化生长因子：从非肿瘤组织中分离
摘要 表皮生长因子 (EGF) 可诱导非肿瘤大鼠肾成纤维细胞在细胞培养中发生转化表型，这些转化表型是从成年小鼠的许多非肿瘤组织（包括颌下腺、肾脏、肝脏、肌肉、心脏和大脑）中分离出来的。它们与之前描述的从肿瘤细胞中分离出来的转化生长因子 (TGF) 类似，具体如下：它们可通过酸/乙醇提取，并且是酸稳定的低分子量 (6000-10,000) 多肽，需要二硫键才能起作用，并且它们会导致非肿瘤指示细胞的锚定非依赖性生长，而这些细胞在没有它们的情况下不会在软琼脂中生长。从雄性小鼠的颌下腺中对这些 TGF 进行部分纯化，结果表明它们不同于 EGF。与之前描述的细胞外 TGF 不同，但与来自肿瘤细胞的某些细胞 TGF 一样，它们通过 EGF 增强其促进锚定非依赖性生长的能力。颌下腺 TGF 蛋白的等电点接近中性。在 Bio-Gel P-30 上进行色谱分析，然后进行高压液相色谱分析，总纯化率达到 22,000 倍。在 EGF 存在下进行测定时，最纯化的蛋白质在 1 ng/ml 的软琼脂中具有诱导生长的活性。这些数据进一步证明了肿瘤形成可能是由非肿瘤生化过程的定量而非定性改变引起的。我们最近描述了 (1) 从几种肿瘤小鼠组织（包括由莫洛尼肉瘤病毒 (MSV) 转化的成纤维细胞和最初由化学致癌物诱导的可移植膀胱癌）中分离和表征一组低分子量、酸稳定性多肽（称为转化生长因子 (TGF)）。这些多肽是可通过酸/乙醇提取的细胞内蛋白质。类似的细胞外转化多肽，称为肉瘤生长因子 (SGF)，是由 De Larco 和 Todaro (2) 从培养的 MSV 转化小鼠成纤维细胞的条件培养基中首次分离出来的。最近报道了几种其他细胞外转化多肽，它们来源于人类 (3) 和动物 (4) 来源的肿瘤细胞。所有这些多肽在应用于培养的未转化、非肿瘤指示细胞时都会引起以下一系列变化，这些变化为 TGF 提供了一个操作性定义：(i) 单层细胞密度依赖性生长抑制的丧失；(ii) 单层细胞过度生长；(iii) 细胞形状改变，导致指示细胞呈现肿瘤表型；(iv) 获得锚定独立性，从而能够在软琼脂中生长。未转化的非肿瘤细胞不会在软琼脂中形成逐渐生长的菌落，并且培养细胞的这种不依赖锚定的生长特性与体内肿瘤的生长具有特别高的相关性（5-7）。
执行摘要
执行摘要几丁质是真菌，植物和昆虫细胞壁的主要组成部分。壳聚糖是一种自然存在的多糖，通过甲壳质的去乙酰化获得。壳聚糖和几丁质 - 葡聚糖是允许的产品，可用于减少不良微生物，沉淀辅助物，抗氧化剂，抗氧化剂，铜和铁浓度的降低以及去除污染物。壳聚糖还可以控制不良酵母菌的生长，例如乳酸菌，乳酸菌，乳酸菌，卵球菌和pediocococcus以及乙酸乙酸等乙酸细菌的生长。壳聚糖对微生物的作用机理在酸性溶液中降低了其强阳离子电荷，并且该电荷与微生物细胞壁的阴离子成分结合，并在物理上剪切了细胞壁。这种离子相互作用杀死了微生物。几丁质的乙酰化度（DA）是影响生物学，物理化学和机械性能的重要参数，并且是确定其分类是否为壳蛋白还是壳聚糖的重要参数。Chitosan正在成为一种非常重要的原材料，用于综合用于食品，医疗，制药，医疗保健，农业，工业和环境污染保护的广泛产品。壳聚糖被用作制造葡萄酒，啤酒，苹果酒和烈酒的加工帮助。无论技术目的是什么，含壳聚糖的沉积物都可以从葡萄酒中除去，在治疗结束时必须通过物理分离过程（例如齿条，离心和/或过滤）进行治疗结束时的烈酒。由于壳聚糖在略有酸性至中性pH值以及水性和乙醇溶液中不溶于溶解，因此任何残留的壳聚糖不太可能保留在处理的产品中。高性能液相色谱分析已证实，最终产物没有壳聚糖。因此，从葡萄酒源中估计的壳聚糖的摄入量可以被认为可以忽略不计。的解决方案允许使用尼日尔曲霉和阿加里库斯·比斯波勒斯（Agaricus bisporus）作为罚款剂和污染物治疗的真菌壳聚糖（OIV/OENO 336A/2009; 337a/2009; 337a/2009; 338a/2009; 338a/2009; 338a/2009; 339a; 339a; 339a/2009; 6; oiv-11; oiv，2011年（OENO 336A/2009; 337A/2009; 337A/2009; 337a/2009; 337a/2009; 337a; 337a; 337a; 337a; 337a; 337a; 337a; 337a;还通过2009年7月的OIV大会的决定添加了一本针对真菌壳聚糖的专着，考虑到“ OEnological Products的专家规格”的作品（OIV/OENO 368/2009，附录7），但目前仅允许FSANZ使用Chiting A. A.作为OIV批准过程的一部分，他们确实评估了加工辅助工具的毒性和葡萄酒消费者的安全风险。在本应用中已发表并总结了许多关于贝类壳聚糖（和其他来源）安全性的动物，人类和体外研究。同样，在这种应用中，Chinova Bioworks证明了来自Agaricus Bisporus的类似壳聚糖与来自贝类和尼日尔A.的壳聚糖如何。此外，他们的产品Pinnacle Mycrobrio获得了GRAS身份，以用作酒精饮料制造的加工。在FSANZ应用程序A1077中，申请人展示了尼日尔曲霉与贝类壳聚糖的类似壳聚糖以及FSANZ对他们接受安全信息的所有数据的回顾，并且该数据适用于尼日尔壳聚糖，因为它与A. Niger a. Niger sake a. Niger sake a. Niger sake a. Niger sake a. Niger sake sake a. Niger sake a. niger sake a. niger a. niger Chitosan均适用于A. niger Chitosan。澳大利亚葡萄和葡萄酒以及新西兰葡萄酒生产商都支持此应用程序。