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World File Search System荧光素
分子信标DNA探针用荧光素双氟菌
简介荧光DNA探针是用于定性和定量检测DNA和RNA的试剂试剂盒的一部分，它仍然是一种强大的研究和诊断工具[1-4]。这种探针最重要的应用领域之一是实时聚合酶链反应（RT-PCR）[5]。此方法用于对遗传物质的明确检测和半植物分析； RT-PCR的最常见用途是遗传性疾病，转基因生物，微生物和病毒病原体的分子诊断，例如HIV [6]和SARS-COV-2 [7]。在RT-PCR中，使用了各种类型的荧光DNA探针，它们与累积的PCR产物相互作用时能够增加荧光；由于两种染料的相互作用而实现了荧光作用，其中一种染料可以是非氟化物（quencher）[5，8]。对于荧光探针，正在研究染料类型与探针结构之间的关系[9]，新染料正在开发[10-12]，并具有两个残基的探针
基于荧光素的高级...
黄烷染料（包括荧光素）是一类众所周知的荧光染料，在天然科学中具有广泛的应用。荧光素衍生物是广泛用于检测和光学成像的重要荧光探针。荧光素衍生物通常是通过引入醛类基团或荧光素黄油环和苯基部分的酯化反应来制备的。当今的研究集中在将氨基组与荧光素单醛连接起来，因为这些衍生物显示出较高的活性，并且可以与分析物复合以增加或降低荧光强度。因此，本综述旨在总结不同的合成方法，光学特性，可能的机制和荧光素探针的应用。本文提供了筛查具有高灵敏度和有效生物学检测的荧光素探针的参考。它进一步增强了其在传感和检测分析物（尤其是生物成像）中的应用。关键词：荧光素，黄烷，荧光强度，生物成像，单醛
CRISPR-Cas9 工程化同源荧光素酶表达细胞系作为癌症研究的体外和体内模型
CRISPR-Cas9 系统为生物学基础研究和转化研究疾病模型的开发提供了强大的基因编辑工具。本研究的目的是利用包括 CRISPR-Cas9 和生物发光在内的先进技术来生成新的人类细胞系，用作癌症研究中的体外和体内模型。大约 50% 的黑色素瘤患者有 BRAF V600E 突变，并且通常在治疗几个月后对当前的 BRAF 抑制剂产生耐药性。KRAS G13D 是一种与对这些抑制剂的耐药性相关的获得性突变。在这项研究中，CRISPR-Cas9 用于将 KRAS G13D 点突变敲入 A375 恶性黑色素瘤细胞系，该细胞系也含有可靶向的 BRAF V600E 突变。由此产生的 KRAS G13D 突变同源系 A375 已在基因组、转录本和蛋白质生物功能水平上得到验证，在传统的 2D 和 3D 细胞培养中研究时，该突变系对 BRAF 抑制剂达拉非尼和维莫非尼表现出显著的抗性。基于上述体外模型，我们通过将稳定的荧光素酶报告基因引入同源 A375 和 KRAS G13D A375 细胞系，开发了用于活体动物生物发光成像的其他模型。对细胞内的相对和绝对生物发光信号进行了量化，发现发射 4.9 x 10 5 光子/细胞/秒（A375）和 3.5 x 10 5 光子/细胞/秒（KRAS G13D A375）。本研究采用皮下异种移植模型，并使用 Xenogen IVIS™ 成像系统量化体内活体生物发光信号，以将肿瘤生长与荧光素酶表达关联起来。A375-Luc2 和 KRAS G13D A375-Luc2 注射到裸鼠体内后均生长为皮下肿瘤，生物发光水平不断提高。此外，还开发了 5 对人类同源荧光素酶报告细胞系和 18 种人类和小鼠荧光素酶报告细胞系，用于研究各种癌症类型。总之，CRISPR-Cas9 技术和稳定的荧光素酶表达两种技术的结合可以生成同源荧光素酶表达细胞系，这些细胞系是阐明肿瘤发生机制和研究体外和体内药物反应的宝贵工具。
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基于荧光素合成的先进技术的综述...
包括荧光素在内的呫吨染料是一类在自然科学中有着广泛应用的荧光染料，荧光素衍生物是重要的荧光探针，广泛应用于各种物体的检测和光学成像。荧光素衍生物通常是在荧光素呫吨环和苯部分上引入醛基或通过酯化反应制备而成。目前的研究主要集中在将氨基与荧光素单醛连接起来，因为这些衍生物具有很高的活性，可以与分析物络合，从而增加或降低荧光强度。因此，本文旨在总结荧光素探针的不同合成方法、光学性质、可能的机理和应用，为筛选具有高灵敏度和有效生物检测的荧光素探针提供参考，进一步提高其在分析物传感检测，特别是在生物成像方面的应用。关键词: 荧光素, 呫吨, 荧光强度, 生物成像, 单醛