在鸡中,原始生殖细胞 (PGC) 是基因敲入等高级基因组编辑的有效靶点。尽管已经建立了鸡 PGC 的长期培养系统,但仍有必要选择一种高效、精确的基因编辑工具来编辑 PGC 基因组,同时保持其对生殖系统的贡献能力。与传统用于生成敲入鸡的同源重组方法相比,成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR)/CRISPR 相关蛋白 9 (Cas9) 和 CRISPR 介导的精确整合到目标染色体 (CRIS-PITCh) 方法更胜一筹,因为供体载体更易于构建、基因组编辑效率高,并且不会选择目标细胞。在本研究中,我们利用 CRIS-PITCh 方法将荧光蛋白基因盒作为融合蛋白整合到鸡 PGC 的鸡血管同源物 ( CVH ) 基因座中,从而设计了敲入鸡 PGC。敲入 PGC 在体内和体外均表达荧光蛋白,便于对 PGC 进行追踪。此外,我们还表征了设计双敲入细胞系的效率。通过有限稀释获得敲入细胞克隆,并通过基因分型确认设计双敲入细胞系的效率。我们发现 82% 的分析克隆都成功敲入了两个等位基因。我们认为,从敲入 PGC 中生产模型鸡可用于各种研究,例如阐明鸡的生殖细胞命运和性别决定。
Kai Mulcock。 第四年,物理学。 作为我所做的生物实验室工作的第一个工作,这是一个很好的介绍! ,让同学带领上课很有帮助,因为我对询问和了解不同主题的自信和自信(尽管不知道超出水平的任何生物背景)。 ,由于我不是生物学专业的学生,所以我谈论的理论太多了,看到物理学的某些事情的应用也非常有趣! 它为帮助我知道这是否是我想探索的领域提供了一个有用的必要步骤,同时还向我展示了我可以作为非生物学生填补的何种利基!Kai Mulcock。第四年,物理学。作为我所做的生物实验室工作的第一个工作,这是一个很好的介绍!,让同学带领上课很有帮助,因为我对询问和了解不同主题的自信和自信(尽管不知道超出水平的任何生物背景)。,由于我不是生物学专业的学生,所以我谈论的理论太多了,看到物理学的某些事情的应用也非常有趣!它为帮助我知道这是否是我想探索的领域提供了一个有用的必要步骤,同时还向我展示了我可以作为非生物学生填补的何种利基!
摘要:开发了一种自发荧光技术来表征实时/在线的聚合进展,该技术在单体或聚合物上没有典型的荧光基团的情况下起作用。单体双环戊二烯和聚合物聚环戊二烯是缺乏传统的荧光光谱官能团的碳氢化合物。在这里,利用了芳族催化环的元置聚合(ROMP)在含有该单体和聚合物的配方的自发荧光进行反应监测。光漂白后的荧光恢复(FRAP)和此处开发的荧光寿命恢复(FLRAP)在这些天然系统中的聚合进展(FLRAP)(FLRAP)不需要外源性荧光团。(自动)聚合过程中荧光寿命的恢复变化线性与治疗程度相关,从而提供了与反应进度的定量联系。这些变化的信号还提供了背景聚合的相对速率,从而可以比较10种不同的催化剂 - 抑制剂稳定的配方。多孔分析证明了对热固性制剂的未来高通量评估的适用性。组合自动荧光和FLRAP/FRAP方法的中心概念可能扩展到监测以前由于缺乏明显的荧光手柄而被忽视的其他聚合反应。
图 2:在 K-562 细胞中通过电穿孔优化 HDR 介导的报告基因敲入。A. LMNA -EGFP 供体质粒单独电穿孔,浓度增加,显示非特异性 EGFP 表达量较低。Cas9 蛋白:crRNA:tracrRNA 电穿孔,LMNA -EGFP 供体质粒浓度增加,显示 EGFP 表达相关增加。B. 放大倍数增加后,HDR 介导的敲入样本中 EGFP 表达的定位与 LMNA 的预期一致,位于细胞核中,并与 Hoechst 染色共定位。C. HDR 介导的敲入细胞群的流式细胞术分析显示,随着 DNA 供体质粒数量的增加,EGFP 表达增加高达 32%。单独 DNA 供体质粒对照的相应分析显示所有剂量的 EGFP 表达均低于 0.5%(未显示数据)。
光的本质或有时是显微镜的设计,在图像采集过程中引入了偏见和系统错误。取决于分析的类型,因此有必要通过产生与不同荧光团同时标记的探针和/或产生颜色交换的探针(两组交换荧光团的探针)来评估诸如色差等误差(请参阅第3.4.5节)。这比简单地对安装介质中的荧光标记的珠子进行想象更准确,因为对照和实际实验环境之间的光路相同。在基于划痕的探针的情况下,可以用不同的荧光团标记一个探针的1.2-1.7 kb片段,即在6-碎片场景和3色鱼实验中,一种碎片1和4的颜色,另一种用于片段2和5的颜色,另一种颜色再次用于片段3和6。对于寡头,可以使用与主要的荧光团标记的次级寡聚。[图1附近]
Verlo仪器显着扩展了温和的台式微流体细胞分类的能力。带有两种激光和九种颜色,再加上3个无标签参数,它可以保持简单的工作流程,用于散装分类或单细胞分配到带有集成细胞分配器的96或384孔板中。这种灵活性以及双重激体细胞仪和成像的其他能力使其非常适合在许多不同的研究领域和应用领域使用,例如干细胞,单细胞基因组学,细胞系发育,基因编辑,抗体发现,抗体发现,免疫学,不良疾病等。
荧光光谱可用于医学和环境应用中的诊断。利用荧光发射的许多方面来提高诊断的准确性。构建了基于氮激光或染料激光激发和光学多通道检测的荧光检测系统。并记录了来自各种来源的人类恶性肿瘤的荧光光谱。使用外源性发色团以及内源性组织荧光观察肿瘤边界。特别是。发现 8-氨基乙酰丙酸可提供非常好的肿瘤边界。开发了一种能够同时记录选定波长的四个荧光图像的多色成像系统。基于四个子图像,显示了恶性肿瘤的处理图像示例。此外,还提供了人类恶性肿瘤光动力治疗的数据。发现人类动脉粥样硬化主动脉和动脉粥样硬化冠状动脉段切除物的自发荧光光谱与非病变血管的自发荧光光谱不同。此外,发现动脉粥样硬化样本的荧光衰减曲线与非病变样本的荧光衰减曲线不同。结论是,应同时利用光谱和时间信息来增强分界。讨论了获取不受血液干扰的荧光数据的方法,以及在动脉粥样硬化体内激光血管成形术中的应用。光学多通道系统和多色成像系统与最初用于环境测量的遥感系统集成,以获得距离最远 100 米的植物的荧光光谱以及荧光图像。发现受到环境压力或衰老植物的荧光数据与健康植被的荧光数据不同。
主要的抑郁症(MDD)是全球最经济和社会繁重的疾病之一(Friedrich,2017),涉及情绪,动机,引人入胜和认知的明显变化(Otte等人,2016年)。MDD是所有医疗状况中慢性疾病负担的第二大贡献者,这是通过“残疾人生活”来衡量的(James等,2018),每年都会影响全球成人人群的6%(Brests等,2011)。对MDD的一线治疗通常涉及药物疗法,可能会或可能不会与心理治疗相结合。最广泛使用的MDD药物是选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIS)和5-羟色胺 - 氯肾上腺素再摄取抑制剂(SNRIS)。与较旧的副作用相比,羟色胺再摄取抑制剂(SRIS)通常具有更大的耐受能力,但副作用是common(Cipriani等,2009)。此外,它们并不引起所有患者的反应(Cipriani等,2018)。因此,需要新的有效治疗选择。经典的迷幻药物psilocybin最近被研究为MDD的可能替代治疗选择。psilocybin通过5-羟色胺2A受体的激动剂(5-HT 2A R),据信通过增加心理和神经生物学灵活性
背景:荧光盲木,也称为白细胞,阴道或白血病,是从非血液中分泌的液体的名称。病理荧光阿不素可能是由于下生殖器的感染或更近端的区域引起的。这项研究旨在确定在印度尼西亚Palembang的Mohammad Hoesin综合医院引起病理荧光的微生物模式。方法:这项研究是一项描述性观察性研究,并使用了印度尼西亚Palembang Mohammad Hoesin General Hospital博士的妇产科和妇科多诊所的研究对象的直接研究。共有63名研究对象参加了这项研究。使用SPSS软件单变量对微生物模式进行分析。结果:大多数引起病理荧光症状的微生物是阴道的gardnerella。与此同时,在荧光阿不属的非病理条件下,大多数病因微生物都是大肠杆菌。结论:阴道加德纳菌是印度尼西亚Palembang的Mohammad Hoesin General Hospital博士最常见的病理荧光症状疾病的微生物。
在聚合物机械化学领域 [10,11],OFP [12,13] 可以实现光学可视化,并监测不同材料体系(从传统的热固性材料和热塑性材料 [14–18] 到蛋白质)内不同长度尺度上的机械诱导事件。[19–23] 在机械生物学领域也可以找到类似的概念。[24–27] 在施加力时,OFP 会发生构象、构型或组成键异构化反应,从而改变其在吸收、荧光或化学发光方面的光学性质。[28] 材料科学中高分辨率显微镜技术的出现甚至使我们能够追踪亚微米尺度的宏观材料损伤。[29–37] 因此,OFP 有助于开发具有改进性能的材料方法。 [38] 尽管 OFP 已成功用于研究合成和生物大分子材料的损伤,但令人惊讶的是,尚未使用 OFP 研究粘合剂的失效。现有的研究粘合剂疲劳和断裂的方法[39]包括目视检查、[40] X 射线光电子能谱、[41,42] 质谱 (MS)、[43,44] 傅里叶变换红外光谱、[42,45] 和接触角测量。[42] 然而,这些技术都无法对胶水成分的机械状态提供空间分辨的光学反馈。我们在此报道了一种由阳离子力响应蛋白 FRET 对和阴离子芳香族表面活性剂的静电共聚形成的生物胶。[46,47] 因此,我们将 FRET 供体荧光团连接到力响应的 FRET 受体荧光蛋白。在机械测试过程中,施加力会改变 FRET 效率,从而改变发射光谱以及供体荧光寿命。我们使用这些蛋白质粘合剂粘合高能和低能表面,以对其断裂行为进行详细的光学分析。机械损伤
