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CRISPR/Cas9 介导的 SlATG5 诱变降低番茄果实对灰葡萄孢的抗性
摘要：番茄果实在贮藏期间极易受到主要病原菌灰葡萄孢（B. cinerea）的侵染。最近的研究表明，自噬在植物防御生物和非生物胁迫中至关重要。自噬相关基因5（ATG5）在自噬体的完成和成熟中起关键作用，并被灰葡萄孢菌快速诱导，但ATG5在番茄采后果实抗灰葡萄孢菌中的潜在机制尚不清楚。为了阐明SlATG5在番茄果实抗灰葡萄孢菌中的作用，本研究采用CRISPR/Cas9介导的SlATG5敲除技术。结果表明，slatg5突变体对灰葡萄孢菌的感染更加敏感，病害症状更加严重，抗病酶几丁质酶（CHI）、β-1,3-葡聚糖酶（GLU）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）、多酚氧化酶（PPO）等活性降低。此外，研究还观察到接种灰葡萄孢菌后，slatg5突变体中水杨酸（SA）信号相关基因SlPR1、SlEDS1、SlPAD4、SlNPR1的相对表达量高于WT，而茉莉酸（JA）信号相关基因SlLoxD和SlMYC2的相对表达量低于WT。这些结果表明，SlATG5 通过抑制 SA 信号通路和激活 JA 信号通路正向调控番茄果实对灰霉病菌的抗性反应。
龋齿疫苗引发的公共卫生问题
口腔健康在决定整体健康和生活质量方面起着根本性的作用。然而，龋齿是一种影响牙齿的传染性微生物疾病，它仍然是影响发达国家和发展中国家口腔健康的主要问题。世界卫生组织确认，龋齿患病率的上升是一个重大的全球健康问题。1 这封信强调了开发一种负担得起的龋齿疫苗的重要性，并必须由公共卫生部门以广泛的重点和长远的眼光将其纳入所有儿童的常规疫苗接种计划。由于龋齿是一种不可逆的牙齿微生物疾病，符合传染病的定义，因此开发龋齿疫苗的研究至关重要。龋齿疫苗的主要功能是起到保护和预防蛀牙的作用。众所周知，变形链球菌在蛀牙的病理生理学中起着重要作用，因为其细胞主要含有粘附素、葡萄糖基转移酶 (GTF)、葡聚糖结合蛋白 (GBP)、13 kDa 蛋白质抗原 (抗原 D)、39 kDa 蛋白质 (AgIII)、29 kDa 蛋白质抗原 (抗原 A)、190 kDa 蛋白质 (AgI/II) 和 70 kDa 蛋白质抗原 (抗原 C) 等物质。由于这些细胞物质被认为对生物体与宿主之间的相互作用至关重要，因此大多数龋齿疫苗试验都集中在这些物质上。2,3 建议采用口服、全身和牙龈唾液等各种给药途径，并通过主动和被动免疫的方式给药。一些有前景的疫苗，如 pGJA-P/VAX、LT 衍生物/Pi39 – 512、KFD2-rPAc 和 SBR/GBR-CMV-nirB 等最近已经开发出来并进行了动物试验。4
CRISPR/Cas9 介导大转基因整合至猪 CEP112 基因座
摘要 成簇的规律间隔短回文重复序列 (CRISPR) 相关蛋白 9 (Cas9) 是一种精确的基因组操作工具，可在各种细胞和生物体中产生靶向基因突变。尽管 CRISPR/Cas9 可以有效地产生基因敲除，但同源定向修复介导的基因敲入 (KI) 效率仍然很低，尤其是对于大片段整合。在本研究中，我们建立了一种有效的方法，用于 CRISPR/Cas9 介导的大型转基因盒整合，该盒携带唾液腺表达的多种消化酶 (20 kbp) 在猪胎儿成纤维细胞 (PFF) 的 CEP112 基因座中。我们的结果表明，使用具有短臂和长臂的最佳同源供体在 CEP112 基因座中产生了最好的 CRISPR/Cas9 介导的 KI 效率，并且 CEP112 基因座的靶向效率高于 ROSA26 基因座。CEP112 KI 细胞系被用作核供体，进行体细胞核移植以创建转基因猪。我们发现 KI 猪 (705) 在唾液腺中成功表达三种微生物酶 (b-葡聚糖酶、木聚糖酶和植酸酶)。这一发现表明 CEP112 基因座通过组织特异性启动子支持外源基因表达。总之，我们利用我们的最佳同源臂系统成功地在猪体内靶向 CEP112 基因座，并建立了一种改良的猪唾液中表达外来消化酶的模型。
通过肝...
肝脏轴轴在维持家禽的健康和生产力方面起着核心作用。此外，肝脏轴是消化，代谢，免疫和排毒的关键调节剂。肠道具有多样的菌群，是营养吸收和免疫调节的主要部位，而肝脏代谢营养素，排毒物质，并充当针对从肠道转移的病原体的前线防御。该相互联系的系统中的破坏，包括肠道营养不良或肝脏炎症，可能导致免疫力受损并降低生产率。这次迷你审查探讨了旨在优化肝脏轴以增强家禽性能的综合营养和免疫学策略。营养干预措施，例如使用霉菌素，维生素，氨基酸，微量营养素，益生菌，益生元和合成生物，已经证明了它们支持肝脏和肠道健康的潜力。饮食成分，例如植物添加剂，纤维和脂肪酸，进一步有助于免疫调节和全身健康。免疫学方法，例如β-葡聚糖和OVO刺激，包括先进的遗传技术在内，分子方法为改善疾病耐药性和器官功能提供了其他途径。尽管取得了显着进步，但挑战包括抗生素抗性，环境压力源和实施成本持续存在。诸如宏基因组学，代谢组学和精确育种等新兴技术提供了创新的解决方案，以增强肝脏相互作用。这篇评论强调了了解肝脏轴轴的最新进步，并呼吁制定改善可持续家禽生产的整体策略。未来的研究应整合这些方法，以提高家禽行业的弹性，生产力和可持续性。
阐明半纤维素热解的复杂性
首次，对关键生物量成分的热解的完整表征 - Xylan（基于戊糖基的硬木半纤维素的代表）和葡萄糖植物（基于己糖的软木半纤维素的代表）是通过基于tga（themogravimetric actalric forsy for for for for for for themogravimetroce for for themogravimetroce for for for for forsal actal finsiS for for for for for forsal forsy for forsal finsiS for for for forsal finsiS for for for forsal-ysiss），以前获得的代表。同时实现了左右的质量收益率，液相，液相的质量产物的质量收益率的详细量化，同时达到了质量平衡，从而提供了独特的动力学信息。热解测试也在固定床反应器中进行，以探索更大的尺度并验证基于TGA的方法。在两个尺度上，不同的分析技术（在线MS，离线GC-FID/MS，Karl Fischer滴定）和采样方案（冷冷凝器，吸引人陷阱，蒸气打印机，燃气袋）进行调整以实现质量平衡和严格的产品概况的调整。当纤维素的热解（选择为参考系统） - 最大化生物油的产生（主要是左旋葡聚糖），而Xylan的热解会导致固体，液体和气体相之间的均匀分布，并且在C 1 -C 9范围内均匀地跨越了固定的氧气。有趣的是，葡萄糖干在纤维素和Xylan之间显示出中间行为，反映了其中间化学结构。拉曼和对收集的炭样品的氧化分析表明，与纤维素相比，半纤维素的固体残留物的有序和灰分较高。使用最近的集团动力学模型的预测来基准针对半纤维素热解的先前艺术。新信息的丰富性和全面性显然出现并铺平了动力学建模底层的途径。
ISSN: 2320-5407 国际J. Adv. Res. 8(04), 150-159
治疗剂量的药物被输送到体内适当的位置并且维持特定的时间是由精心设计的药物系统控制的。许多药物输送系统对于实现可控和位点特异性药物输送的目标很有希望，其中之一就是磁性微球，这是一种新型药物输送系统。新型药物输送系统已经取得了进展，可以实现可控和靶向的药物输送，以满足治疗期间身体的需要。磁性微球是制药领域的一种较新的方法，它是磁控可释放的超分子粒子，其粒径范围为 1-1000 μm。一种使用工程“微载体”的磁性药物输送新方法克服了当前药物输送方法面临的许多限制。磁性微球药物输送系统被低于 1.0 特斯拉的磁场捕获在微血管中并被拖入邻近组织。磁性载体从用于磁性微球的壳聚糖、葡聚糖等掺入材料的磁场中接收磁响应。磁性微球中可以使用各种载体材料，其中最常用的是人血清白蛋白。因此，通过精心设计的受控药物输送系统可以克服常规治疗的问题。微球药物输送系统具有重要意义，因为它具有广泛的应用范围，从针对特定部位的药物到诊断特征的成像，以及使用抗癌药物靶向肿瘤。它比脂质体更稳定，具有优势。综述将包括定义、概念、类型、特征、优势以及制备中使用的方法和技术；它还将涉及磁性微球作为一种新型药物输送系统的各种应用和未来前景。
酵母β-葡萄糖1,3/1,6
抽象引入酵母β-葡聚糖（YBG）通过激活巨噬细胞增强免疫系统而被认可，这是一种关键的防御机制。鉴于上呼吸道感染（URTI）对生产力和医疗保健成本的全球患病率和影响，YBG已将有望作为反复呼吸道感染的潜在治疗和预防策略。然而，关于YBG在较低剂量下与URTI，疲劳，免疫反应和它们如何影响肠道菌群组成的不确定性有关的YBG的疗效知之甚少。方法和分析这个为期12周的随机，双盲，安慰剂控制，平行组临床试验旨在评估YBG 1,3/1,6对呼吸道感染，疲劳，免疫标记和肠道健康的疗效。这项研究涉及198名18-59岁年龄的成年人，其应力量表10（评分14-26）和患者健康问卷9（得分≥9）进行了评估；在过去的6个月中，使用杰克逊冷量表评估了普通感冒的症状。这些参与者将被随机分为三组，以120 mg，204 mg或安慰剂接收YBG 1,3/1,6。结果措施包括呼吸道感染症状，疲劳，情绪状态和使用威斯康星州上呼吸道症状量表评估的生活质量，多维疲劳清单，情绪状态的概况和Short Form Form 36健康调查调查问卷。此外，还将进行全血分析和免疫，炎症和氧化应激生物标志物的评估。次要结果包括使用16S rRNA测序的粪便样品进行肠道菌群分析。伦理和传播该研究的研究方案已由马来西亚大学研究伦理委员会审查和批准（UKM/PPI/111/8/JEP-2023-211）。这些发现将被传播给参与者，医疗保健专业人员
2022; 12(12): 5596-5614. doi: 10.7150/thno.73650 研究论文 姜黄衍生的纳米囊泡作为溃疡靶向治疗的新型纳米生物制剂
理论基础：溃疡性结肠炎 (UC) 是一种典型的炎症性肠病 (IBD)，是一种特发性慢性肠道炎症。传统治疗策略主要集中于促炎和抗炎细胞因子的重新平衡，而针对 UC 中受损的肠道屏障、失衡的肠道微生物群和失调的粘膜免疫反应仍然是一个巨大的挑战。本研究的目的是开发姜黄衍生的纳米囊泡 (TNV) 以缓解结肠炎并探究其潜在机制。方法：通过差速离心分离和纯化 TNV。通过 IVIS 成像系统评估对葡聚糖硫酸钠 (DSS) 诱导的小鼠模型的靶向能力。研究了在脂多糖 (LPS) 诱导的巨噬细胞和 DSS 诱导的急性和慢性结肠炎小鼠模型中的抗炎功效。此外，通过16S rRNA菌群序列研究TNVs对肠道菌群的影响，并用流式细胞术分析TNVs处理后巨噬细胞的极化情况。结果：分离得到TNVs，其为纳米尺寸的球体。IVIS成像实验表明，口服TNVs能够在结肠炎症部位聚集，并在体内外表现出良好的抗炎活性。16S rRNA测序提示TNVs在肠道菌群调控中发挥重要作用。此外，TNVs可以促进M1表型向M2巨噬细胞转化，修复受损的肠道上皮屏障，发挥抗结肠炎功效。结论：口服TNVs通过修复受损的肠道屏障、调节肠道菌群和重塑巨噬细胞表型表现出良好的抗炎功效。这项研究为天然外泌体样纳米囊泡在溃疡性结肠炎治疗中的应用提供了启示。
提高四级护理转诊中心外显子组测序的有效性：罕见神经遗传疾病中的新突变、临床表现和诊断挑战
摘要 背景 我们采用多模式方法，包括详细表型分析、全外显子组测序 (WES) 和候选基因过滤器，对三级神经病学中心转诊的个体进行罕见神经系统疾病诊断。方法 使用候选基因过滤器和严格的算法对 66 名患有神经遗传疾病的个体进行 WES，以评估序列变异。使用计算机预测工具、家族分离分析、先前的疾病关联出版物和相关生物学检测来解释致病或可能致病的错义变异。结果 39% (n=26) 的病例实现了分子诊断，其中包括 59% 的儿童期发病病例和 27% 的晚发型病例。总体而言，37% (10/27) 的肌病、41% (9/22) 的神经病变、22% (2/9) 的 MND 和 63% (5/8) 的复杂表型得到了基因诊断。已鉴定出 27 种与疾病相关的变异，包括 FBXO38、LAMA2、MFN2、MYH7、PNPLA6、SH3TC2 和 SPTLC1 中的 10 种新变异。单核苷酸变异 (n=10) 影响功能域内的保守残基和先前鉴定的突变热点。已确定的致病变异 (n=16) 表现出非典型特征，例如成人多聚葡聚糖体病的视神经病变、脑腱黄瘤病的面部畸形和骨骼异常、先天性肌无力综合征 10 的类固醇反应性虚弱。诊断出可能可治疗的罕见疾病，改善了部分患者的生活质量。结论 整合深度表型分析、基因过滤算法和生物检测提高了外显子组测序的诊断产量，发现了新的致病变异，并扩展了门诊环境中难以诊断的罕见神经遗传疾病的表型。
可持续水产养殖的替代益生菌-Munin
摘要：在耕作条件下，水生动物不断暴露于压力源，这会导致肠道健康的风险，导致营养不良。由于对抗生素在水产养殖中的频繁使用施加限制，因此对经济上可行，环境安全和可持续的替代品的需求正在出现，用于大量生产水产养殖物种。最近提出并广泛实践了有益的微生物作为益生菌的应用。bacteria和真菌是无处不在的微生物，可以在有机基质的各种环境中生长。富含营养，鱼的水生环境和胃肠道为微生物提供了有利的培养环境。然而，在培养物环境中或在胃肠道中，真菌和菌丝细菌的定殖和益生菌潜力较少。除了杆菌和乳酸菌，作为水产养殖中最常用的益生菌，许多研究都集中在其他有前途的替代方案上。属于王国“真菌”的各种酵母和霉菌的特征是它们在营养，免疫调节和预防疾病中的前瞻性作用。生物活性化合物，例如甘露糖 - 寡糖和β-葡聚糖被认为是真菌后生物学，可改善鱼类的先天免疫和抗病性。静脉细菌据称具有不同的水解酶和代表其益生菌属性的新型次生代谢产物。静脉细菌据称具有不同的水解酶和代表其益生菌属性的新型次生代谢产物。还探讨了这些组在水质改善中的应用。Thus, this paper presents an overview of the present status of knowledge pertaining to the effects of yeasts ( Candida , Cryptococcus , Debaryomyces , Geotrichum , Leucosporidium , Pichia , Rhodosporidium , Rhodotorula , Saccharomyces , Sporidiobolus , Sporobolomyces , Trichosporon and Yarrowialipolytica ), molds (曲霉属。）和静脉细菌（链霉菌）作为益生菌在最细节的水产养殖中，及其在细节的胃肠道中的发生。还讨论了对使用真菌和静脉细菌作为有希望的益生菌的益生菌机制，选择标准以及未来的观点。