I. 简介 AAVpro CRISPR/SaCas9 系统用于制备腺相关病毒 (AAV) 载体,以将编码 CRISPR/SaCas9 介导的基因组编辑所需成分的基因 [即单向导 RNA (sgRNA) 和 SaCas9 核酸酶] 递送至哺乳动物细胞。这种基于 AAV 的单载体系统使用来自金黄色葡萄球菌的 Cas9 (SaCas9),其编辑效果与更常用的化脓性链球菌 Cas9 (SpCas9) 相似,但短约 1 kb。通过使用较小的 SaCas9,可以将 SaCas9 和 sgRNA 序列装入单个载体中,并在体外和体内对多种哺乳动物细胞实现有效的基因组修饰。 AAVpro CRISPR/SaCas9 无辅助系统 (AAV2)(货号 632619)是一个完整的系统,包含用于构建定制设计的 sgRNA 表达质粒和制备 AAV 颗粒的试剂。AAVpro CRISPR/SaCas9 载体系统(货号 632618)包含与货号 632619 相同的组件(包装系统除外);详细信息在第 II 部分“组件列表”中列出。
本研究旨在分析印度尼西亚货运转货行业的战略联盟和竞争优势的环境不确定性和不确定性的影响。测量方法研究了使用SMARTPLS技术和结构方程建模(SEM)分析在内的变量,包括环境不确定性,不确定性和战略联盟。问卷是使用5点李克特量表创建的。通过一个简单的随机选择程序,研究参与者选择了货运代理公司。有效性,可靠性和显着性测试(通常与假设检验一起)都包含在顺序数据分析中。该研究已经根据数据处理的评估确定了以下关系:战略联盟受到环境不确定性的积极影响,Incoterm受环境不确定性的积极影响,Incoterm受到竞争优势的积极影响,战略联盟会受到竞争优势的影响。这项研究的新颖性是环境不确定性和不确定性对印度尼西亚货运转货行业战略联盟和竞争优势的影响。理论含义支持以前关于环境不确定性和不确定性的理论,以通过战略联盟来提高竞争优势。实际的含义是管理货运公司的管理,以扫描物流环境的不确定性,并实施正确的不合情机,以鼓励战略联盟鼓励竞争优势。这项研究为科学原则的发展做出了重大贡献,尤其是在战略管理领域。此外,它为未来的研究提供了宝贵的参考和比较材料,重点是环境不确定性和不确定性对印度尼西亚运费远期工业中战略联盟和竞争优势的影响。
1.取下疫苗瓶和稀释剂瓶的封条和瓶塞。将稀释剂瓶的全部内容物倒入疫苗瓶中,插入瓶塞,摇匀。疫苗已准备好使用,应在两小时内使用。2.抓住每只鸟,展开翅膀,使下侧朝上。将双叉翼网涂抹器浸入疫苗中,使凹槽充满液体,每只鸟注射 0.01 毫升。3.将双叉涂抹器插入翅的翼部,避开血管、肌肉和骨头 4.接种疫苗后七到十天,观察几只鸡是否有“感染”的迹象,包括注射部位肿胀和/或结痂。
MADRID玛格丽塔·萨拉斯生物学研究中心(CIB-CSIC)的完整性实验室Rodrigo Bermejo小组致力于理解复制叉保护机制的功能结构。DNA复制是一个引人入胜的过程,对生命和有机体的发育至关重要,但发生在脆弱的结构(复制叉)上,必须协商硬重复的位点,容易崩溃并引起突变和染色体异常,从而促进癌症。为了了解关键重置因子如何与其他关键的染色体过程协调复制以保护受到挑战的叉子,我们采用了一种多学科方法,结合了链特异性基因组学,分子遗传学和基于AI的蛋白质相互作用预测在萌芽的酵母模型中。
图 2. CTS Cas9 的 TCR 敲除效率高于供应商 A Cas9。将每个 Cas9 (7.5 pmol) 和靶向 alpha 和 beta T 细胞受体基因 (TRAC 和 TRBC) 区域的 Invitrogen ™ TrueGuide ™ 合成 sgRNA (7.5 pmol) 混合以创建 Cas9-RNP 复合物。每个 Cas9-RNP 复合物用于使用 Neon 转染系统 (货号 MPK5000) 转染 500,000 个 T 细胞。 72 小时后收获细胞,用 Invitrogen ™ eBioscience ™ 可固定活力染料 (FVD) 紫罗兰 (货号 65-0863-14) 和 eBioscience ™ 抗 TCR a/b 抗体 (货号 12- 9986-42) 染色,然后在 Invitrogen ™ Attune ™ NxT 流式细胞仪上进行分析,并使用基于 NGS 的 TAV 进行基因分型。 (A) TCR KO 效率的流式细胞术数据示例。与供应商 A Cas9 相比,CTS Cas9 的 KO 效率超过 88.7%,而供应商 A Cas9 的 KO 效率为 61.7%。 (B) 基于 NGS 的 TAV 的平均 KO 效率。与供应商 A Cas9 相比,CTS Cas9 在各种目标上实现了更高的平均 KO 效率。所有反应均重复进行三次 (** P < 0.01)。