1 美国芝加哥大学医学中心医学系;2 韩国首尔蔚山大学医学院峨山医学中心肿瘤学系;3 美国罗切斯特梅奥诊所综合癌症中心肿瘤内科;4 韩国水原天主教大学圣文森特医院肿瘤内科;5 首尔三星医疗中心血液学和肿瘤学;6 韩国首尔首尔国立大学医院内科、首尔国立大学医学院癌症研究所、首尔国立大学研究生院创新医学科学综合专业;7 费尔法克斯弗吉尼亚癌症专家研究所;8 俄克拉荷马大学健康科学中心和斯蒂芬森癌症中心,俄克拉荷马城;9 林肯内布拉斯加州血液肿瘤学中心血液学和肿瘤学分部;10 新不伦瑞克新泽西州罗格斯癌症研究所肿瘤内科; 11 美国杜阿尔特希望之城综合癌症中心肿瘤内科与治疗学研究系;12 韩国首尔延世大学医学院延世癌症中心肿瘤内科;13 佛罗里达癌症专家中心肿瘤内科;14 美国波士顿麻省总医院癌症中心;15 城南市首尔国立大学医学院盆唐首尔国立大学医院内科;16 韩国首尔高丽大学九老医院肿瘤科;17 休斯顿肿瘤顾问中心肿瘤内科;18 美国菲尼克斯梅奥诊所癌症中心内科;19 北京大学肿瘤医院暨研究所癌变及转化研究教育部重点实验室胃肠道肿瘤科;20 德国美因茨约翰内斯古腾堡大学; 21 MacroGenics, Inc.,罗克维尔;22 美国圣路易斯华盛顿大学医学院医学系
Justin Adams (Tropical Forest Alliance, World Economic Forum), Géraldine Ang (Organisation for Economic Cooperation and Development), Ulrich Apel (Global Environment Facility), Marco Arlaud (UNDP Biodiversity Finance Initiative), Mohamed Imam Bakarr (Global Environment Facility), Larry Band (Independent Consultant), Andrea Barrios (Rockefeller Foundation), Rafaello Cervigni (The世界银行),格蕾琴每日(斯坦福大学),尼克·迪克斯(生态系统投资伙伴),马法尔达·杜阿尔特(Mafalda Duarte)(气候投资基金,世界银行),Yasha Feferholtz(联合国生物多样性公约)(Monica Filkova公约),Charlotte Kaiser(Kaiser natural)(KEER),KATER,KATEN(KEREND) (彭博),肖恩·肾(Sean Newney)(气候债券倡议),琳达·克鲁格(Linda Krueger)(自然保护协会),吉玛·劳伦斯(Gemma Lawrence)(贷款市场协会),理查德·劳伦斯(Richard Lawrence),理查德·劳伦斯(Richard Lawrence),温索(Overlook Investments),温索·李(Winsor J.Matthews(英格兰养老院委员会),汤姆·米切尔(剑桥大学),詹·莫尔纳(Jen Molnar)(大自然保护协会),斯特凡诺·帕吉奥拉(Stefano Pagiola),爱德华·佩里(Edward Perry),经济合作与发展组织)(亚历山大·皮尔顿(Alexandra Pinzon),凯利·托尔斯(Alexandra Pinzon)(肯德拉·托尔斯(Alexandra Pinzon),凯利竞技场(伦敦国防部)基金),乔瓦尼·鲁塔(Giovanni Ruta)(世界银行),林恩·斯卡特(Lynn Scarlett)(自然保护协会),休·塞特(Hugh Searight)(世界银行),安德鲁·塞德尔(UNDP生物多样性财务倡议),普里亚·shyamsundar(自然保护协会),自然保护协会,克里斯塔·图基尼(Krista tukiainen) Mike Wironen(自然保护协会),Tracy Wolstencroft(国家地理)和Zhao Xiaolu(中国环境国防基金)
Leila Ahmadi、Abdul Manan Ahmadzai、Aisser Al-Hafedh、Valentina Anchevska、Julie Astoul、Bogdan Becirovic、Tsegahiwot Abebe Belachew、Hernando Bernal、Enrico Bisogno、Jorge Cabrera Camacho、Chloé Carpentier、Kyungsoon Choi、Alan Cole、Mark Colhoun、莱昂纳多·科雷亚、德瓦什什·达尔、西尼萨·杜尔库利奇、安德拉达-玛丽亚·菲利普、莎乐美·弗洛雷斯、茹海达·哈纳诺、马修·哈里斯-威廉姆斯、克里斯蒂安·霍尔格、San Lwin Htwe、大卫·伊扎迪法、Marhabo Jonbekova、Antero Keskinen、Anja Korenblik、Nina Krotov-Sand、Banele Kunene、Chantal Lacroix、Rakhima Mansurova、Jose Maria Izabal Martinez、Antonio Mazzitelli、Marie-Anne Menier、Roberto Murguia Huerta、尼维奥·纳西门托、特雷莎·纳瓦雷特·雷耶斯、卡姆兰·尼亚兹、拉什达·赛义夫·尼亚齐、基思·威廉·诺曼、赫克托·杜阿尔特·奥尔蒂斯、迈克尔·奥斯曼、凯蒂尔奥特森、苏鲁奇·潘特、托马斯·大卫·帕克、托马斯·皮奇曼、雷金纳德·皮茨、塞西尔·普鲁内特、蒂埃里·罗斯坦、路易莎·桑切斯·伊里亚特、朱塞佩·塞尔尼亚、Inshik Sim、吞奈·索、米洛斯·斯托贾诺维奇、奥利弗·斯托尔佩、米尔扎希德·苏丹诺夫、丹尼斯·托切耶夫、伊万·特鲁希略、鲍勃·范·登·伯格、洛伦佐·瓦列霍斯、洛伦佐·维塔、比尔·伍德和纳斯拉图拉·扎尔霍恩
日本宇宙航空研究开发机构(JAXA)在2021财年(第四阶段中长期目标的第四年)中,在持续的疫情下,继续彻底实施针对COVID-19的感染控制措施,同时完成了多项重要任务。在低地球轨道上,宇航员野口和星出完成了国际空间站(ISS)的长期太空任务。特别是,星出成为第二位以国际空间站指挥官身份登上宇宙飞船的日本人。这些成就进一步增强了国际社会对日本作为国际空间站计划国际合作伙伴的信心,并正在稳步用于维持和提高日本在美国主导的阿尔特弥斯计划和月球轨道平台“Gateway”中的存在。2021财年,我们13年来首次招募日本宇航员,预计日本宇航员的活动将扩展到月球附近和月球表面,迄今为止收到了最多的申请者。放眼深空,对小行星样本返回任务隼鸟2号带回的龙宫小行星样本(岩石和沙子)进行初步分析,证实日本已获得世界上第一个最原始太阳系物质样本。在支持日本独立太空活动的太空运输领域,我们成功发射了目前所有的旗舰火箭H-IIA和Epsilon,并为政府和商业卫星的发射做出了贡献,进一步提高了我们世界领先的可靠性。至于日本新旗舰火箭H3运载火箭的开发,所有相关方共同努力,克服了第一级发动机的技术问题。同时,我们正在稳步努力改善工作环境,包括节能等环境考虑,并改善工作与生活的平衡。此外,为了进一步加速JAXA对可持续发展目标的努力并提高员工的意识,我们新制定了可持续发展目标基本行动方针。日本是世界上少数几个能够自主开展广泛太空活动的国家之一。在 JAXA,正在进行的具有挑战性的项目正在达到高潮。作为通过技术支持日本航空航天开发和利用的核心实施机构,在 2022 财年,我们将通过董事和员工的共同努力,勇敢地迎接任何艰难的挑战,努力创造成果,完成第 4 阶段,同时充分考虑环境,将我们的劳动成果回馈社会。2022 年 9 月
AST月,OpenAI首席执行官Sam Altman终于承认了研究人员多年来一直在说的话 - 人工智能(AI)行业正处于能源危机的方面。这是一个不可接受的入学。在世界经济论坛在瑞士达沃斯举行的年度会议上,奥特曼警告说,下一波生成的AI系统将消耗的力量要比预期的要大得多,并且能源系统将难以应付。“没有突破就无法到达那里,”他说。我很高兴他说了。自从我从2018年开始发布有关AI行业的环境成本以来,我已经看到一贯的低调和否认。Altman的承认使研究人员,监管机构和行业巨人谈论了生成AI的环境影响。那么,Altman Banking启动了什么能源突破?不是更可持续的AI系统的设计和部署,而是核融合。他在那场比赛中也有皮肤:2021年,阿尔特曼(Altman)开始投资华盛顿埃弗里特(Everett)的Fusion Company Helion Energy。大多数专家都同意,核融合不会显着构成在本世纪中叶脱碳以应对气候危机的关键目标。Helion最乐观的估计是,到2029年,它将产生足够的能量,为40,000个平均美国家庭供电;一项评估表明,由OpenAI在加利福尼亚州旧金山创建的聊天机器人Chatgpt已经消耗了33,000户房屋的能源。据估计,由生成AI驱动的搜索使用了传统网络搜索能量的四到五倍。,这不仅仅是能量。在几年内,大型AI系统可能需要与整个国家一样多的能量。生成的AI系统需要大量的淡水来冷却其处理器并发电。在爱荷华州西得梅因市,一个巨大的数据中心集群为OpenAI最先进的型号GPT-4提供。当地居民的诉讼显示,2022年7月,即Openai完成了培训模型的一个月,该集群使用了该地区约6%的水。根据公司的环境报告,当Google和Microsoft准备了大型语言模型时,两者都在用水方面有很大的峰值 - 在一年内分别增加了20%和34%。一个预印本1表明,在全球范围内,对AI的水需求可能是2027年的一半。在另外2个中,Facebook AI研究人员称工业的环境影响是追求规模的“房间里的大象”。而不是管道梦,我们需要务实的
2025 Mike Barish博士神经科学系贝克曼研究学院希望城市杜阿尔特市,巴里什博士正在调查发展中的海马和皮质的早期电活动及其与神经出生,迁移和成熟的关系。与M.D. Karen Aboody合作,(血液学/HCT)和Carlotta Glackin博士。 ,还在检查神经祖细胞细胞向神经胶质瘤和大脑外肿瘤的分子机制,并使用永生化的神经祖细胞对这些肿瘤靶向这些肿瘤。有关Barish博士研究的更多详细信息,请访问www.cityofhope.org/neurosciences,您可以通过mbarish@coh.org与Barish博士联系。Michel Baudry博士生物医学研究生学院西部健康科学大学Pomona CA研究兴趣:1。机械机理与海马和其他大脑区域的长期突触增强和抑郁症有关。 2。 调节谷氨酸受体。 3。 氧自由基在中枢神经系统中的作用。 4。 选择性神经元变性的机制。 5。 计算神经科学有关更多信息,请访问www.westernu.edu。 您可以通过mbaudry@weaternu.edu Xiaoning Bi M.D.,博士与Baudry教授联系。 我的实验室中太平洋西部健康科学研究研究的基础医学科学学院试图了解神经元如何正常发展,成熟和功能,以及在自然衰老过程,内在的遗传缺陷或各种侮辱时如何应对自然衰老过程的挑战时如何死亡。Michel Baudry博士生物医学研究生学院西部健康科学大学Pomona CA研究兴趣:1。机械机理与海马和其他大脑区域的长期突触增强和抑郁症有关。2。调节谷氨酸受体。3。氧自由基在中枢神经系统中的作用。4。选择性神经元变性的机制。5。计算神经科学有关更多信息,请访问www.westernu.edu。您可以通过mbaudry@weaternu.edu Xiaoning Bi M.D.,博士与Baudry教授联系。 我的实验室中太平洋西部健康科学研究研究的基础医学科学学院试图了解神经元如何正常发展,成熟和功能,以及在自然衰老过程,内在的遗传缺陷或各种侮辱时如何应对自然衰老过程的挑战时如何死亡。您可以通过mbaudry@weaternu.edu Xiaoning Bi M.D.,博士与Baudry教授联系。我的实验室中太平洋西部健康科学研究研究的基础医学科学学院试图了解神经元如何正常发展,成熟和功能,以及在自然衰老过程,内在的遗传缺陷或各种侮辱时如何应对自然衰老过程的挑战时如何死亡。我们希望通过了解基本
任务 1. 1990 年 3 月 - 1991 年 2 月,本科飞行员培训,哥伦布空军基地,密西西比州。 2. 1991 年 2 月 - 1994 年 8 月,C-141 星际运输机空中加油和空投飞机指挥官、调度员,第 18 空运中队,麦圭尔-迪克斯-莱克赫斯特联合基地,新泽西州 3. 1994 年 8 月 - 1997 年 3 月,C-17 环球霸王 III 初始干部、飞行指挥官、评估飞行员,第 17 空运中队,查尔斯顿空军基地,南卡罗来纳州 4. 1997 年 3 月 - 1999 年 4 月,标准化和评估助理主管,第 97 空运联队,阿尔特斯空军基地,俄克拉荷马州。 5. 1999 年 4 月 - 2002 年 11 月,教练飞行员,第 701 空运中队,查尔斯顿空军基地,南卡罗来纳州2002 年 10 月 - 2006 年 3 月,飞行指挥官/评估飞行员,第 337 空降师,马萨诸塞州韦斯托弗空军预备役基地。 7. 2006 年 3 月 - 2006 年 12 月,应急作战计划官,第 439 作战大队,马萨诸塞州韦斯托弗空军预备役基地。 8. 2007 年 10 月 - 2008 年 10 月,预备役首席飞行员,第 337 空降师,马萨诸塞州韦斯托弗空军预备役基地。 9. 2008 年 10 月 - 2009 年 10 月,作战官,第 337 空降师,马萨诸塞州韦斯托弗空军预备役基地。 10. 2009 年 10 月 - 2010 年 12 月,指挥官,第 337 空降师,马萨诸塞州韦斯托弗空军预备役基地。 11. 2011 年 1 月 - 2012 年 6 月,第 439 空降师副指挥官,马萨诸塞州韦斯托弗空军预备役基地。 2013 年,第 439 空战联队指挥官特别助理,马萨诸塞州韦斯托弗空军基地 13. 2013 年 2 月 - 2014 年 9 月,空军预备役司令部首席,战略规划局未来概念部,计划和项目副参谋长,五角大楼空军参谋总部,弗吉尼亚州阿灵顿 14. 2014 年 10 月 - 2015 年 1 月,预备役规划副主任,战略规划局,战略计划和要求副参谋长,五角大楼空军参谋总部,弗吉尼亚州阿灵顿 15. 2015 年 1 月 - 2017 年 7 月,第 618 空中作战中心指挥官动员助理,伊利诺伊州斯科特空军基地 16. 2017 年 7 月 - 2019 年 7 月,演习和评估主任兼预备役部队指挥官高级顾问,
1个低音(2023)‘萨蒂亚·纳德拉(Satya Nadella)说,山姆·阿尔特曼(Sam Altman)将领导微软的新室内AI团队”,《时代》杂志,https://time.com/6337503/6337503/sam-altman-altman-altman-aintman-coins-microsoft-ai/-2 deffenbaugh 2 deffenbaugh(2024)'Amazon oprifit in 2.75亿美元,$ 4亿美元的投资,商务日报,https://www.investors.com/news/technology/amazon- hanthropic-inthropic-investment-iai/3 IoT Analytics研究(2023)生成AI市场报告2023-2030,2023-2030,https:// iot-sance.com.com.com.com.com/lead-ranadics.com/leading-generation-rismerife no no no no no no no no no no no kak and kak and kak and kak and kak and kake Big Tech',MIT技术评论,https://www.technologyreview.com/2023/12/05/1084393/make-no-mistake-ias-ai-is-is-is-is-is-by-big-tech/-big- tech/5 mccabe(2024)‘联邦贸易委员会启动调查A.I。由科技巨头交易,《纽约时报》,https://www.nytimes.com/2024/01/25/technology/ftc-ai-microsoft-amazon-google.html 6参见上文。7 Hern (2024) ‘Microsoft deal with AI startup to be investigated by UK competition watchdog', The Guardian, https://www.theguardian.com/business/article/2024/jul/16/microsoft-deal-with-ai- startup-to-be-investigated-by-uk-competition-watchdog 8 McCabe (2024) ‘Federal贸易委员会将调查询问由科技巨头交易,《纽约时报》,https://www.nytimes.com/2024/01/25/technology/technology/ftc-ai-microsoft-microsoft-amazon-google.html 9 elsaadi(2024)(2024)使用Instagram和Facebook porte nowsercence of Sav a abc abc abc of instagram和Facebook save nation n sab abc abc of instagram and abc abc abc of。 https://www.abc.net.au/news/2024-06-10/instagram-facebook-train-train-train- meta-ai-tools-no-opt-no-opt-no-australia/103958308 10 tan(2024)‘当服务条款变为A.I时的服务条款时,14见上文。培训',《纽约时报》,https://www.nytimes.com/2024/06/06/26/technology/terms-service-aibia-ai-training.html 11 Ingram(2024)(2024) https://www.nbcnews.com/tech/tech/tech-news/doj-antitrust-chief-say-say-ai-companies-must---赔偿 - 赔偿 - 赔偿 - 劳斯特-rcna154720 12 elsaadi(2024)(2024年)‘使用Instagram和Facebook 2007年培训人工智能工具的META使用Instagram和Facebook帖子https://www.abc.net.au/news/2024-06-10/instagram-facebook-train-train- meta-ai-tools-no-opt-no-opt-ut-australia/103958308 13见上文。15新闻/媒体联盟(2022)Google如何滥用其作为强大新闻发布者和伤害新闻业的市场主导平台的地位,https://www.newsmediaalliance.org/wp- content/oploads/2022/2022/2022/09/nma-white-paper_redpaper_revise_revise_revise_revise-revise-revise-sept-20222.17 Agarwal(2023)“有声读物叙述者担心苹果用他们的声音训练AI',有线,https://www.wired.com/story/story/paptory/apple/apple-spotify-audiobook-narrators-narrators-narrators-narrators-aii-contract/? 4F48-B976-E7DA7A982E4D.1724031522764 18 ROTH(2024)“ Adobe的新服务条款说,它不会使用您的工作来训练AI, https://www.theverge.com/2024/6/6/18/24181001/adobe-updated-terms-of-service-wont-train-train-ai-ai-on-on-work
补充方法 DNA 分离 使用自动 DNA 提取仪按照其协议(chemagic MSM I,PerkinElmer,美国马萨诸塞州沃尔瑟姆)从血液样本中分离 DNA。 使用试剂盒“EZ1&2 DNA Tissue”(Qiagen,德国希尔登)按照协议使用自动 DNA 提取仪 EZ1 Advanced XL(Qiagen)从羊膜细胞和绒毛中分离 DNA。 染色体微阵列(CMA) 使用 SureTaq DNA 标记试剂盒(Agilent,美国加利福尼亚州圣克拉拉)标记 DNA,并根据制造商的说明在 GenetiSure Cyto 4x180K CGH 微阵列(Agilent)上进行杂交。使用 InnoScan 910 AL 扫描仪(Innopsys,Carbonne,法国)扫描载玻片,并使用分析程序 Mapix(Innopsys)和 CytoGenomics 版本 5.1.2.1 和 5.3.0.14(Agilent)进行处理。使用参考基因组 GRCh38 评估数据。染色体分析和荧光原位杂交使用标准方法从肝素血样以及绒毛和羊膜细胞培养物中进行中期制备。简而言之,将来自肝素血样的细胞培养在含有植物血凝素作为有丝分裂原的 LymphoGrow 培养基(CytoGen,Sinn,德国)中,羊膜细胞培养在 Amniogrow plus 培养基(Cytogen,Sinn,德国)中,CVS 细胞培养在 Chang 培养基 D(Fujifilm,Minato,日本)中。固定后,将中期细胞滴到载玻片上,然后在 60 °C 下干燥过夜。使用核型分析系统 Ikaros(MetaSystems,德国阿尔特鲁斯海姆)通过 GTG 显带评估中期染色体的扩散情况。对于 FISH 分析,使用 Empire Genomics(美国纽约州布法罗)的探针 RP11-213E22-green 和 RP11-577D9-orange(7 号染色体)以及 RP11-358H10-green 和 RP11-241M19-orange(16 号染色体)。所有探针均按照制造商的说明使用。使用 Isis 数字成像系统(Metasystem Inc.,德国阿尔特鲁斯海姆)分析图像。 PCR 和测序 在适用的情况下,确认并进一步指定 OGM 分析中的断点,方法是使用 MinION 测序仪(Oxford Nanopore,英国牛津)进行第三代长距离测序,或使用 Hitachi 3500xL 基因分析仪(Thermo Fisher Scientific,美国马萨诸塞州沃尔瑟姆)进行 Sanger 测序。引物是根据 Dremsek et al., 2021 中描述的策略设计的。为了将引物定位得尽可能靠近预期的断点,OGM 数据和 CMA 数据都融入了其设计中。为了分析P1,进行了长距离PCR(连接点B/D*的扩增子:正向引物:5'-ggaggacaattttatcccccaggg-3'和反向引物:5'-gtgagccgtgagtttgccactat-3';连接点D*/B*的扩增子:正向引物:5'-tcgttgacggtgaaatgctacgt-3'和反向引物:5'-gcagataacggagtgaggaaggc-3')。PCR扩增后,使用引物 5' -acagctcactatagcagataggtgt- 3'、5' - ttgcatcaggaacatgtggacct- 3'、5' -ctggtcacaggcgcaaatcaaag- 3'、5' -gtcagcaaaggagagaagcagct- 3' 和 5' - gcaggttggctctttcccaagta- 3' 制备连接点 B/D* 的扩增子(大小为 4 kbp)进行 Sanger 测序。使用引物 5' -agggaaaagagatgtgtaaaatactgt- 3', 5' -agatgaggaagggcatctgac- 3', 5' -tcaagttgtcattgtggtgaatt- 3', 5' - cagatgccagcgctaagacgat- 3', 5' -aggttattacacacccctcct- 3', 5' -tgttcattatcactggccatcaga- 3', 5' -aaggggaaacctcctgctactct- 3', 5' - tgcacccactaacgtgtcatcta- 3', 5' -gggttggttccaagtctttgcta- 3', 5' -gctgaaactggatcccttcctta- 制备连接点 D*/B* 的扩增子(大小为 13 kbp),进行 Sanger 测序。 3'、5' -tgtagggacatggatgaaattgg- 3' 和 5' -ccaaacaccgcatattctcactc- 3'。为了分析 P3,进行了长距离 PCR(正向引物:5' -ttaccacgaaagagcaaacggtga- 3' 和反向引物:5' - aacgttattccttccagtcacccac- 3')。PCR 扩增后,根据制造商的方案(SQK -LSK109,Oxford Nanopore),制备 9 kbp 大小的扩增子以在 MinION 106D 流动槽上进行测序。对于家族检测,建立了 PCR,使用倒位特异性引物 5' -tgcctctgcttaataggaagttttgg- 3' 和 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3'(产生 1247 bp 扩增子),以及野生型引物 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3' 和 5' -ctgttgaaggacacaagctctggc- 3'(产生 778 bp 扩增子)(见 S.3)。MLPA 分析进行多重连接依赖性探针扩增 (MLPA) 以验证在 CMA 中检测到的增益并测试亲属的携带者状态。对于 MLPA,将 DNA 与探针杂交并根据制造商的说明进行扩增。使用 Hitachi 3500xL 基因分析仪(Thermo Fisher)对扩增的 DNA 进行片段分析,并使用 SeqPilot(JSI,德国埃滕海姆)分析程序处理数据。用于所呈现的临床病例的 MLPA 探针组是 P034-B2、P035-B1(P1)和 P216-C1(P3)(MRC-Holland,荷兰阿姆斯特丹)。5' -tgtagggacatggatgaaattgg- 3' 和 5' -ccaaacaccgcatattctcactc- 3'。为了分析 P3,进行了长距离 PCR(正向引物:5' -ttaccacgaaagagcaaacggtga- 3' 和反向引物:5' - aacgttattccttccagtcacccac- 3')。PCR 扩增后,根据制造商的方案(SQK -LSK109,Oxford Nanopore),制备 9 kbp 大小的扩增子以在 MinION 106D 流动池上进行测序。对于家族检测,建立了 PCR,使用倒位特异性引物 5' -tgcctctgcttaataggaagttttgg- 3' 和 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3'(产生 1247 bp 扩增子),以及野生型引物 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3' 和 5' -ctgttgaaggacacaagctctggc- 3'(产生 778 bp 扩增子)(见 S.3)。MLPA 分析进行多重连接依赖性探针扩增 (MLPA) 以验证在 CMA 中检测到的增益并测试亲属的携带者状态。对于 MLPA,将 DNA 与探针杂交并根据制造商的说明进行扩增。使用 Hitachi 3500xL 基因分析仪(Thermo Fisher)对扩增的 DNA 进行片段分析,并使用 SeqPilot(JSI,德国埃滕海姆)分析程序处理数据。用于所呈现的临床病例的 MLPA 探针组是 P034-B2、P035-B1(P1)和 P216-C1(P3)(MRC-Holland,荷兰阿姆斯特丹)。5' -tgtagggacatggatgaaattgg- 3' 和 5' -ccaaacaccgcatattctcactc- 3'。为了分析 P3,进行了长距离 PCR(正向引物:5' -ttaccacgaaagagcaaacggtga- 3' 和反向引物:5' - aacgttattccttccagtcacccac- 3')。PCR 扩增后,根据制造商的方案(SQK -LSK109,Oxford Nanopore),制备 9 kbp 大小的扩增子以在 MinION 106D 流动池上进行测序。对于家族检测,建立了 PCR,使用倒位特异性引物 5' -tgcctctgcttaataggaagttttgg- 3' 和 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3'(产生 1247 bp 扩增子),以及野生型引物 5' - cagccaataacgtgagtttaggagt- 3' 和 5' -ctgttgaaggacacaagctctggc- 3'(产生 778 bp 扩增子)(见 S.3)。MLPA 分析进行多重连接依赖性探针扩增 (MLPA) 以验证在 CMA 中检测到的增益并测试亲属的携带者状态。对于 MLPA,将 DNA 与探针杂交并根据制造商的说明进行扩增。使用 Hitachi 3500xL 基因分析仪(Thermo Fisher)对扩增的 DNA 进行片段分析,并使用 SeqPilot(JSI,德国埃滕海姆)分析程序处理数据。用于所呈现的临床病例的 MLPA 探针组是 P034-B2、P035-B1(P1)和 P216-C1(P3)(MRC-Holland,荷兰阿姆斯特丹)。
亚历山德拉·维多利亚·巴斯利、1,2,4,20 O´scar Gutie´rrez-Gutie´rrez、1,2,20 Elke Hammer、3,5 Fabian Koitka、1,2,4 Amin Mirzaiebadizi、6 Martin Steinegger、7 Constantin Pape、4,8 Linda Bo´hmer、1 Henning Schroeder、9 Mandy克莱因索格、1,2 梅兰妮·恩格勒、10 离子·克里斯蒂安·西尔斯泰亚、10 洛萨·格雷默、11,12 迪特·威尔博尔德、11,12 珍妮·阿尔特姆·乌勒、13,14 菲利克斯·马尔巴赫、15,16 格德·哈森福斯、1,2,4 沃尔夫拉姆-休伯特·齐默尔曼、2,4,17,18穆罕默德·礼萨·艾哈迈迪安,6 Bernd Wollnik, 2,4,19 和 Lukas Cyganek 1,2,4,18,21,* 1 哥廷根大学医学中心心脏病学和肺病学诊所干细胞科,哥廷根,德国 2 德国心血管研究中心 (DZHK),哥廷根,德国 3 德国心血管研究中心 (DZHK),格赖夫斯瓦尔德,德国 4 哥廷根大学卓越集群“多尺度生物成像:从分子机器到可兴奋细胞网络”(MBExC),哥廷根,德国 5 格赖夫斯瓦尔德大学医学院遗传学和功能基因组学跨学院研究所,格赖夫斯瓦尔德,德国 6 乌塞尔多夫海因里希海涅大学医学院和大学医院生物化学和分子生物学 II 研究所,乌塞尔多夫,德国 7 生物科学学院,首尔国立大学,首尔,韩国 8 乔治·奥古斯特·哥廷根大学计算机科学研究所,哥廷根,德国 9 马克斯·普朗克多学科科学研究所 NMR 信号增强组,哥廷根,德国 10 乌尔姆大学应用生理学研究所,乌尔姆,德国 11 海因里希·海涅大学物理生物学研究所,乌塞尔多夫,德国 12 生物信息处理研究所、结构生物化学研究所(IBI-7),J ulich GmbH 公司,J ulich,德国 13 科隆大学医学院和科隆大学医院科隆基因组学中心,科隆,德国 14 柏林医学系统生物学研究所基因组学平台,马克斯·德尔布吕克分子医学中心 - 柏林,德国 15 科隆大学医院人类遗传学研究所,科隆,德国 16 研究所海德堡大学人类遗传学研究所,海德堡,德国 17 哥廷根大学医学中心药理学和毒理学研究所,哥廷根,德国 18 弗劳恩霍夫转化医学和药理学研究所 ITMP 转化神经炎症和自动显微镜研究所,哥廷根,德国 19 哥廷根大学医学中心人类遗传学研究所,哥廷根,德国 20 这些作者贡献相同 21 主要联系人 *通信地址:lukas.cyganek@gwdg.de https://doi.org/10.1016/j.celrep.2024.114448