816–821。[11] Lowder L,Malzahn A,Qi YP. Rapid evolution of manifold CRISPR systems for plant gene editing. Front Plant Sci, 2016, 7: 1683。[12] Maeder ML,Linder SJ,Cascio VM,等。CRISPR RNA引导的内源性人类基因激活。Nat Methods, 2013, 10(10): 977-979。[13] Lindhout BI,Pinas JE,Hooykaas PJJ,等。利用锌指人工转录因子文库筛选拟南芥同源重组突变体。Plant J, 2006, 48(3): 475-483。[14] Liu WS,Rudis MR,Peng YH,等。合成TAL效应物用于靶向增强植物转基因表达。Plant Biotechnol J,2014,12(4):436-446。[15] Qi LS、Larson MH、Gilbert LA等。将CRISPR重新用作RNA引导平台,用于序列特异性控制基因表达。Cell,2013,152(5):1173-1183。[16] Chylinski K、Le Rhun A、Charpentier E。II型CRISPR-Cas免疫系统的tracrRNA和Cas9家族。RNA Biol,2013,10(5):726-737。[17] Nishimasu H、Cong L、Yan WX等。金黄色葡萄球菌Cas9的晶体结构。Cell,2015,162(5):1113-1126。 [18] Jinek M, Jiang FG, Taylor DW 等. Structures of Cas9 endonucleases reveal RNA-mediated configuration activity. Science, 2014, 343(6176): 1247997。[19] Anders C, Niewoehner O, Duerst A 等. Structural basis of PAM-dependent target DNA identification by the Cas9 endonuclease. Nature, 2014, 513(7519): 569-573。[20] Wang Y, Zhang ZT, Seo SO 等. Gene transcription repression in Clostridium beijerinckii using CRISPR-dCas9. Biotechnol Bioeng, 2016, 113(12): 2739-2743。[21] Bikard D, Jiang WY, Samai P 等.利用工程化的 CRISPR-Cas 系统可编程地抑制和激活细菌基因表达。Nucleic Acids Res,2013,41(15):7429-7437。[22] Didovyk A、Borek B、Tsimring L 等人。利用 CRISPR-Cas9 进行转录调控:原理、进展和应用。Curr Opin Biotechnol,2016,40:177-184。[23] Li ZX、Xiong XY、Li JF。工作死物:将失活的 CRISPR 相关核酸酶重新用作植物中的可编程转录调节剂。aBIOTECH,2020,1(1):32-40。[24] Piatek A、Ali Z、Baazim H 等人。RNA 引导的
摘要:制药和化学工业提供社会大部分日常使用的材料,但是它们是主要污染者,对碳排放量产生了重大贡献,并且产生了比产品多5-100倍。在这种情况下,生物催化成为一种有前途的方法,可以发展出蓝细菌作为当前使用的异养费用的替代底盘的绿色,更可持续和更便宜的化学制造。旨在表达与工业相关的异源酶,例如氢化酶和单加氧化酶[1],产生了几种具有流线性光合电子流量的综合囊体突变体。我们的目标包括编码推定竞争电子水槽的基因,例如:双向氢化酶HOX,Flavodiiron蛋白FLV1/3,NDH-1复合物的NDHD2亚基,Cox终端氧化酶和天然CYP120A1。当前,这些底盘的有效性,从电子流向氧化还原酶方面,正在通过P450传感器蛋白(CYP1A1)通过乙氧基resorufin-O-二甲基酶(EROD)测定进行评估。初步结果表明,与野生型相比,突变体的CYP1A1活性更高。并行,生成并测试了合成装置的合成装置,并生成了合成装置,并生成了并测试并测试了合成装置,并具有合成装置,并测试了。 与野生型相比,该装置在综合囊体突变体中缺乏生产的生产中缺乏天然兼容溶质葡萄糖基甘油(δGGP)增强了3%NaCl的生长[2,3]。 参考文献1。 Mascia等。 Ferreira等。 (2018)Synt。。与野生型相比,该装置在综合囊体突变体中缺乏生产的生产中缺乏天然兼容溶质葡萄糖基甘油(δGGP)增强了3%NaCl的生长[2,3]。参考文献1。Mascia等。Ferreira等。(2018)Synt。通过将AHBET装置引入EPS生产中的突变体中,评估了推定碳竞争途径的损害,即细胞外聚合物(EPS)对甘氨酸甜菜碱的产生的影响。Δkpsm_AHBET突变体比δGGPS_AHBET产生的甘氨酸蛋白甜味蛋白多2倍,并增加了前体甘氨酸的可用性,从而产生了更高的甘氨酸菜碱的产生。然而,作为δGGPS_AHBET,δkpsm_AHBET突变体在3%NaCl以下的生长没有增加。因此,针对海水中的大规模培养,例如AHBET被引入染色体中性位点[4]。(2022)绿色化学,doi.org/10.1039/d1gc04714k 2。biol。,doi.org/10.1093/synbio/ysy014 3。Ferreira等。(2022)正面。Bioeng。Biotechnol。,doi.org/10.3389/fbioe.2021.821075 4。Pinto等。(2015)DNA res。,doi.org/ 10.1093/dnares/dsv024
Giulia Zancolli,洛桑大学生态与进化系,瑞士洛桑1015。电子邮件:giulia.zancli@gmail.com; Agostinho Antunes,CIIMAR/CIMAR,海洋与环境研究跨学科中心,Porto de Leix其他Porto de LeixThes Cruise Terminal,AV。 诺顿·德·马托斯将军,S/N,4450-208 Porto,葡萄牙。 电子邮件:aantunes@ciimar.up.pt†第一名合着者。电子邮件:giulia.zancli@gmail.com; Agostinho Antunes,CIIMAR/CIMAR,海洋与环境研究跨学科中心,Porto de Leix其他Porto de LeixThes Cruise Terminal,AV。诺顿·德·马托斯将军,S/N,4450-208 Porto,葡萄牙。电子邮件:aantunes@ciimar.up.pt†第一名合着者。电子邮件:aantunes@ciimar.up.pt†第一名合着者。