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可差异的CRE重组酶允许在Berghei疟原虫的蚊子阶段进行有条件的基因组编辑
疟原虫的无性血液阶段很容易通过同源重组来适应遗传修饰，从而使寄生虫基因的功能性研究在生命周期的这一部分中并非必不可少。然而，常规的反向遗传学不能应用于无性血液阶段复制中必不可少的基因的功能分析。已经开发了各种策略，用于浆细胞的条件诱变，包括基于重组酶的基因缺失，可调节启动子以及mRNA或蛋白质破坏稳定系统。在其中，可二聚Cre（DICRE）重组酶系统已成为p中有条件基因缺失的强大方法。恶意。在该系统中，噬菌体CRE以两种单独的酶无活性多肽的形式表达，每种酶融合了不同的雷帕霉素结合蛋白。雷帕霉素诱导的两个成分的异二聚化恢复重组酶活性。我们已经在啮齿动物疟原虫p。berghei，并表明可以在哺乳动物和蚊子寄生虫阶段具有很高的效率来实现雷帕霉素诱导的floxed DNA序列切除。此工具可用于投资基本基因的功能，不仅在无性血液阶段，而且在疟原虫生命周期的其他部分。
使用CRE/LOXP重组系统靶向基因整合到微藻的核基因组
抽象的遗传修饰的微藻被认为是生物能源和重组蛋白质产生的有用工具。然而，微藻核基因组中转基因的随机整合易受异源基因表达的基因沉默。在这里，我们试图使用CRE/ LOXP重组系统进行稳定的转基因表达，将靶向基因整合到雷目层的预定的核基因组位点中。我们构建了一个表达载体质粒编码报告基因（Zeocin耐药基因和绿色荧光蛋白基因； ZEO-2A-GFP）和突变的LOXP来产生创建者细胞。构建了编码IFNα-4的供体载体和抗性霉素的抗性基因，构造了相应突变的LOXP S，并与CRE表达载体一起构建并引入创始人细胞。通过计算抗霉素抗性菌落的数量来确定供体载体与CRE表达载体的最佳比率。对于已建立的克隆，使用各种特定引物集通过基因组PCR确认了靶向积分。供体载体中的靶基因可以使用CRE/ LOXP系统整合到Reinhardtii的预期基因组位点中。rt-PCR表明，IFNα-4在测试的五个独立的转基因细胞系中表达。该结果表明，基于CRE的细胞工程是一种产生表达外源基因的智能微藻的有前途的方法。
缘干细胞衰竭，该衰竭因药物治疗而下降...
结果：平均年龄为35.5±23.8岁（范围为5-71岁），男女比率为6:15。LSCD的主要病因是12例患者（57.1％），边缘性角膜炎，在8例患者中的边缘性角膜炎（38.1％）和1例患者的局部药物毒性（4.8％）。平均基线最佳校正视力（BCVA）为最小分辨率角（logmar）的0.25±0.26对数（范围为0-1 logmar）。预处理LSCD阶段是5眼（17.2％）（17.2％），12眼（41.4％）（41.4％），4眼（13.8％）（13.8％）的1C，4眼（13.8％）（13.8％）的2A阶段（13.8％）和4眼（13.8％）中的2B。在6眼（20.7％）中实现了LSCD的完整回归，其治疗方法针对主要病因。在剩下的眼睛中，治疗后，LSCD的严重程度降低到手术阈值以下，该阈值被认为是2B期。平均最终BCVA为0.07±0.1 logmar（范围为0-0.4 logmar）。
使用笼子乙基雌二醇和诱导的Cre/Lox系统迈向眼睛的光介导的基因疗法
摘要：越来越多地，正在用病毒介导的基因疗法治疗视网膜病理。能够以光特定针对视网膜病理区域的病毒转基因表达，我们确定了视网膜组织的体内光活化基因表达para-digm。基于诱导型Cre/Lox系统，我们发现乙基雌二醇是他莫昔芬的合适替代品，因为乙基雌二醇更适合通过光敏保护化合物（即“笼子”）修饰。在计算机结合研究中支持了突变的人雌二醇受体的乙基甲基二醇作为配体的鉴定，该研究表明笼中乙基雌二醇的结合降低。用依赖性的TDTOMATO报告基因转基因注入双转基因GFAP-CREERT2小鼠的眼睛中，然后用450 nm的光照射。光活化显着增加了视网膜TDTOMATO表达。因此，我们展示了为眼睛开发靶向的，光介导的基因治疗的第一步。
Cas9和雷帕霉素诱导的CRE重组酶的本构表达促进了Berghei疟原虫中的条件基因组编辑
疟疾是由疟原虫属的原生动物寄生虫引起的，并且仍然是全球健康问题。寄生虫具有高度适应的生命周期，其中包括脊椎动物宿主中的连续无性复制和蚊子载体围绕中的性成熟。寄生虫的遗传操纵对破译疟原虫基因功能的功能具有重要作用。常规的反向遗传工具不能用于研究无性血液阶段的基本基因，从而需要制定条件策略。在各种此类策略中，雷帕霉素可诱导的可二聚化CRE（DICRE）重组酶系统是一种有条件地编辑人类感染的恶性疟原虫和啮齿动物疟疾模型寄生虫寄生虫P. Berghei的强大方法。我们先前生成了表达二甲虫的berghei线，并通过有条件地删除了几个必不可少的无性阶段基因来验证它，从而揭示了它们在孢子虫中的重要作用。另一个有效的工具是CRISPR/CAS9技术，该技术已启用了具有更高精度和特异性的目标基因组编辑，并且在疟原虫属中具有大量先进的基因组工程。在这里，我们通过在寄生虫中整合了Dicre盒和荧光标记来开发新的Berghei寄生虫线，以组成表达Cas9。由于CRISPR/CAS9和DICRE的双重整合，这些新系列允许同时进行无与伦比的基因修饰和条件调节。为了说明这种新工具的多功能性，我们有条件地淘汰了编码贝尔格（P. Berghei）类似claudin的apicomplexan微米蛋白（夹具）的基本基因，并确认了夹具在侵入红细胞细胞中的作用。
CDC AR 实验室网络：州和地方公共卫生实验室 CRE 和 CRPA 检测指南
目的。州和地方公共卫生实验室由 CDC 的流行病学和实验室能力合作 (ELC) 协议资助，用于收集、确认和鉴定耐碳青霉烯类肠杆菌科 (CRE) 和铜绿假单胞菌 (CRPA) 分离株。这些活动有助于识别产生碳青霉烯酶的分离株并对存在的碳青霉烯酶类型进行分类。分离株应从管辖范围内的医疗保健机构或为这些机构服务的临床实验室收集，采用一种策略，允许在公共卫生实验室服务的人群中检测产碳青霉烯酶的菌体 (CPO)。州和地方公共卫生实验室将与州 HAI/AR 预防计划以及抗生素耐药性实验室网络区域实验室合作。本指导文件将确定对 ELC 资助的公共卫生实验室的测试、提交、报告和存储方法以及实验室培训和能力的期望。
一种由内源性 Lcn9 启动子驱动的附睾起始节段特异性表达 Cre 重组酶的新型小鼠系
从睾丸释放的精子经历成熟过程并通过附睾运输获得使卵子受精的能力。附睾分为四个区域，每个区域都有独特的形态、基因谱、腔内微环境和截然不同的功能。为了研究附睾起始节（IS）中相关基因的功能，通过 CRISPR/Cas9 技术建立了一种新的 IS 特异性小鼠模型——Lcn9-Cre 敲入（KI）小鼠系。TAG 终止密码子被 2A-NLS-Cre 盒替换，导致 Lcn9 和 Cre 重组酶共表达。从出生后第 17 天首次观察到 IS 特异性 Cre 表达。使用 Rosa26 tdTomato 报告小鼠，Cre 介导的 DNA 重组仅在主细胞中检测到。使用 Lcn9-Cre 小鼠与携带 Tsc1 floxed 等位基因 (Tsc1 flox/+) 的小鼠品系杂交，进一步证实了附睾 IS 特异性 Cre 体内活性。Cre 表达不影响正常发育或雄性生育力。与之前报道的任何附睾特异性 Cre 小鼠不同，新型 Lcn9-Cre 小鼠品系可用于引入整个 IS 特异性条件基因编辑以进行基因功能研究。
Latrophilin-3与LPHN3全球KO大鼠相比，酪氨酸羟化酶神经元（LPHN3-TH-CRE）中的有条件敲除：LPHN3在酪氨酸羟化酶神经元中对这种ADHD usiptibility Gene 的作用
辛辛那提大学医学院神经科学的研究生课程，俄亥俄州辛辛那提45267 B当前地址：部门密歇根大学医学中心3703 Med Sci II，1241 E. Catherine St.，Ann Arbor，MI 48109-5618。 C当前地址：密歇根州立大学神经科学的研究生课程，东兰辛，密歇根州艺术与科学学院，辛辛那提大学，辛辛那提大学，辛辛那提大学医学院儿科学系，辛辛那提儿童学系和辛辛那提儿童研究基金会，辛辛那提儿童研究基金会0000-0001-9198-1411，C.S.0000-0002-4577-2659，M.T.W。0000-0001-9841-9683，C.V.V。0000-0003-3558-8812。
DOI: 10.29261/pakvetj/2021.053 利用 CRISPR/Cas9 和 Cre/Lox 构建针对伪狂犬病毒的三基因删除活疫苗候选物
当前市场上销售的伪狂犬病毒（PRV）疫苗的免疫保护效果逐渐降低，并未能对新型PRV变种提供完全保护。本研究利用CRISPR/Cas9和Cre/LoxP基因编辑系统及低熔点琼脂糖纯化法，同时敲除三种主要毒力基因（gE/gI和TK），成功构建了三基因删除活毒株rZDΔTK-gE-gI。接种rZDΔTK-gE-gI PRV候选疫苗的3周龄仔猪在感染PRV强毒株后均存活，且未出现任何临床症状，而所有未接种疫苗的仔猪均出现PRV呼吸道和神经系统症状，感染后7天内死亡率100％。 rZDΔTK-gE-gI候选疫苗在接种仔猪后诱导出高水平的抗gB抗体，其免疫保护效果优于经典毒株Bartha-K61。因此，三基因缺失活PRV候选疫苗有望控制目前由PRV变异株引起的伪狂犬病疫情。
克里斯蒂安·卡斯特罗中士于 1997 年 8 月入伍，并参加了在俄克拉荷马州西尔堡举行的 13B - Cannon Cre 单站单位训练
他目前担任首席立法联络办公室的高级士兵顾问。他最近的作战任务是担任德国格拉芬沃尔第 41 野战炮兵旅的指挥军士长。卡斯特罗军士长的其他任务包括第 5 营、第 3 野战炮兵、第 18 空降军参谋部、牵引炮兵、机械化炮兵和火箭炮兵部队的指挥军士长，这些部队驻扎在德国、华盛顿州、北卡罗来纳州、韩国、俄克拉荷马州和佐治亚州。